March 13th, 2012
בגלל הפשטות של ניתוח תוצאות התנהגותיות חזקים, היצרות כרונית של עצב השת הוא אחד מראש יחסני במודלים של בעלי חיים של כאב נוירופתי. תוך 24 שעות לאחר הניתוח, רגישות יתר לכאב הוא הקים ניתן למדוד כמותית באמצעות פריי פון aesthesiometer (מבחן מכני) ו מטר כאבים plantar (מבחן תרמית).
המטרה הכוללת של הליך זה היא לבצע התכווצות כרונית, פגיעה בעצב הסיאטי, מודל מכרסמים נפוץ של כאב נוירופתי, ולמדוד כמותית את התנהגויות הכאב הנובעות מכך. זה מושג על ידי הצבת ארבע רצועות מעיים כרומיות סביב העצב הסיאטי החשוף בגובה אמצע הירך כדי ליצור פגיעת התכווצות בעצב הסיאטי. לאחר מכן, עקוב אחר התנהגויות כאב בכפה האחורית בנקודות זמן רצויות על ידי מדידה כמותית של סף נסיגת הכפות לגירוי מכני באמצעות פון פריי אנטס וחביון נסיגת כפות לגירוי תרמי באמצעות מד שיכוך כאבים פלנטרי.
בסופו של דבר ניתן להשיג תוצאות המראות את קיומם של כאבים מכניים ותרמיים, רגישות יתר של כף הרגל האחורית הפגועה באמצעות מדידת תגובות נסיגה מעוררות לגירויים מכניים ותרמיים כאחד. שיטה זו של פגיעה עצבית היקפית שפותחה לראשונה על ידי Bene ו-Z יכולה לעזור לנו לענות על שאלות מפתח בתחום הכאב הכרוני, כגון מהם המנגנונים ההיקפיים והמרכזיים שבאמצעותם נוצר כאב נוירופתי. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על טיפול בכאב נוירופתי מכיוון שמודל זה מספק את הבסיס לבחינת אסטרטגיות חדשות להפחתת רגישות יתר לכאב.
בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו מכיוון שהצבת תפרי המעיים ה-cmic סביב העצב הסטטי והידוק מתאים כדי לגרום לפגיעה עצבית מספקת אך לא מוגזמת היא מאתגרת במיוחד. כדי להתחיל בהליך זה, יש לחטא את משטח העבודה הכירורגי עם אתנול 70% ולהכין את המכשירים הסטריליים סיכות גזה וספוגיות, שעברו חיטוי בעבר. לאחר מכן, יש להרדים את החולדה בתא אינדוקציה באמצעות 5% ISO פלואור.
העבירו אליו 2% ISO פלואור באמצעות מסכת פנים בהתאמה אישית במהלך הניתוח. לאחר מכן, גלחו את הרגל האחורית השמאלית של החולדה, ואז הניחו את החיה על מחצלת חימום מווסתת תרמית בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס. יש למרוח משחת עיניים סיכה על העיניים.
לאחר מכן הכינו את תפר המעי הכרומי על ידי חיתוך לחתיכות קטנות של כשלושה סנטימטרים, טבלו אותם במי מלח סטריליים. לאחר מכן, יש לעקר את האזור המגולח בשלושה יישומים חלופיים של תמיסת אלכוהול ויוד. כשהחיה שוכבת על בית החזה, הרם את רגלה האחורית השמאלית והחזק את עצם הירך ב-90 מעלות לעמוד השדרה באמצעות מסקינגטייפ על כף הרגל.
לאחר מכן בצע חתך בעור כשלושה עד ארבעה מילימטרים מתחת לעצם הירך. הפרד את העור מהשריר המקיף את החתך על ידי חיתוך רקמת החיבור. השתמש במספריים קהים כדי לחתוך את רקמת החיבור בין הגלוטאוס שטחי לשרירי השריר הדו-ראשי.
לאחר מכן, השתמש במחזיר כדי להרחיב את הפער בין שני השרירים על מנת לאפשר הדמיה ברורה של העצב הסיאטי, ולאחר מכן השתמש במלקחיים ובמספריים המיקרו כדי לשחרר בעדינות כ -10 מילימטרים מהעצב הסיאטי מרקמת החיבור שמסביב. קשרו את הקשירה הראשונה הקרובה לטריפורקציה של העצב הסיאטי עבור כל קשירה. התחל עם לולאה רופפת אחת.
לאחר מכן אחוז בשני הקצוות קרוב ללולאה ומשוך עד שהלולאה בקושי צמודה והקשירה לא מחליקה לאורך העצב. לאחר מכן החזק את הלולאה במקומה הנכון והנח לולאה שנייה על גבי הלולאה הראשונה כדי להשלים את הקשר. לאחר מכן, חתוך את הקצוות הרופפים של הקשירה למילימטר עגול התכווצות העצב צריכה להיות מינימלית.
חזור על השלבים עבור שלושת הליגטורות הנותרות על-ידי קשירת כל ליגטורה נוספת בפרוקסימלית של מילימטר אחד יותר מהקודמת. כמו כן, עם התכווצות מינימלית בסוף הניתוח, השתמש בתפרים כדי לסגור את שכבת השריר וסיכות כדי להדק את העור. לאחר מכן, השתמש בתמיסת יוד כדי לעקר את הפצע.
התבונן מקרוב בבעל החיים במהלך תקופת ההתאוששות מההרדמה ואפשר לו להתאושש בכלוב נפרד עם מצעי נייר שטוחים. לפני תחילת הניסוי. טפל בבעל החיים מדי יום במשך מספר ימים.
לאחר מכן, לפני הבדיקה ההתנהגותית, הרגילו את החולדה במתחם. יש לשמור על סביבת הבדיקה שקטה ומבוקרת היטב עם רמות טמפרטורה ולחות קבועות, וכל מפגש בדיקה צריך להתבצע בשעה דומה ביום. כדי לחקור את סף הנסיגה המכני ביום הבדיקה, הנח את החולדה בכלוב בדיקת רצפת הרשת המוגבה, 15 עד 30 דקות לפני הניסוי באמצעות פלנטר פון פריי דינמי מקם את יחידת ממריץ המגע עם החוט ישירות מתחת למשטח העציץ האמצעי של הכפה האחורית ולחץ על מקש ההתחלה.
זה מרים את החוט כדי לעורר מכנית את משטח העציץ של הכפה האחורית בכוח הולך וגובר. לאחר מכן, רשום את סף הנסיגה המכני מכפות הרגליים האחוריות הפצועות והלא פצועות. מכשיר זה מתעד ומציג באופן אוטומטי את המקסימום המסופק בעת תגובת נסיגה.
חזור על הגירוי המכני שלוש פעמים במרווח של כחמש דקות בין בדיקת גירויים לכפות האחוריות הלא פצועות בסדר מאוזן, ולאחר מכן חשב את הממוצע של סף נסיגת הכפות. כדי לחקור את חביון הנסיגה התרמית ביום הבדיקה, הנח את החולדה ברצפת הזכוכית. כלוב בדיקה 15 עד 30 דקות לפני הניסוי באמצעות מכשיר לשיכוך כאבים תרמי, מקם את מקור האינפרא אדום ישירות מתחת למשטח העציץ האמצעי של הכפה האחורית ולחץ על מקש ההתחלה.
זה חושף את משטח העציץ של הכף האחורית לקרן חום קורנת דרך משטח זכוכית שקוף. לאחר מכן רשום את חביון הנסיגה מכפות הרגליים האחוריות הפצועות והלא פצועות. מכשיר זה מתעד אוטומטית את הזמן שלקח מתחילת הגירוי התרמי ועד לנסיגת הכפה ממקור החום.
חזור על גירוי החום לפחות שלוש פעמים במרווח של כחמש דקות בין גירויים הבודקים כפות אחוריות פצועות ולא פצועות בסדר מאוזן, ולאחר מכן חשב את הממוצע של נסיגת כפות חביון כאן מראה את סף הנסיגה המכני בכפות פצועות ולא פגועות של חולדות וויסטאר לפני ועד 12 יום לאחר התכווצות כרונית של העצב הסיאטי. יש ירידה משמעותית בסף נסיגת הכפות לגירויים מכניים בכף האחורית המקבילה הפגועה בהשוואה לכפה האחורית הנגדית הלא פגועה. מוצג כאן חביון הנסיגה התרמית בכפות פצועות ולא פצועות לפני ועד 12 ימים לאחר התכווצות כרונית של העצב הסיאטי.
באופן דומה, חביון הנסיגה התרמית מופחת משמעותית בכפה האחורית המקבילה הפגועה בהשוואה לכפה האחורית הנגדית הלא פגועה. לאחר השליטה בניתוח CCI ניתן לבצע כראוי תוך 20 דקות בלבד לכל בעל חיים, וכתוצאה מכך רגישות יתר לכאב לטווח ארוך של הכף האחורית. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לקשור את הקשירה באופן רופף מכיוון שמדובר בחנק עצמי מתחת לקשירה בעקבות בצקת, הגורמת להתכווצות לאחר התפתחותה.
טכניקה זו של פגיעה עצבית היקפית בשילוב עם בדיקת רגישות יתר לכאב גל P לחוקרים בתחום הכאב הנוירופתי כדי לחקור את המנגנונים העומדים בבסיס כאב כרוני עקב פגיעה עצבית.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
מאמר זה מפרט את הפגיעה הכרונית בצמצום של עצב הסיאטיקה, מודל נפוץ לחקר כאב נוירופתי ברודנטים. הנוהל מאפשר מדידה כמותית של התנהגויות כאב בתגובה לגירויים מכניים ותרמיים.
The chronic constriction injury (CCI) model enables mechanistic de-risking of neuropathic pain targets by establishing reproducible pain hypersensitivity phenotypes. Quantitative measurement of mechanical and thermal withdrawal thresholds provides predictive confidence for target validation in analgesic discovery. This disease-relevant system supports translational biomarker alignment and preclinical model continuity for go/no-go decisions in pain therapeutics pipelines.
The CCI model integrates into the discovery continuum from target hypothesis testing through lead identification to preclinical validation, enabling iterative refinement of analgesic candidates based on pain phenotype modulation.