-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

HE

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

he_IL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Genetics
הגישה קומבינטורית תא בודד כדי לאפיין את מולקולרית והטרוגניות Immunophenotypic של גזע האדם ואוכלוס...
הגישה קומבינטורית תא בודד כדי לאפיין את מולקולרית והטרוגניות Immunophenotypic של גזע האדם ואוכלוס...
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
A Combinatorial Single-cell Approach to Characterize the Molecular and Immunophenotypic Heterogeneity of Human Stem and Progenitor Populations

הגישה קומבינטורית תא בודד כדי לאפיין את מולקולרית והטרוגניות Immunophenotypic של גזע האדם ואוכלוסיות קדמון

Full Text
7,141 Views
09:34 min
October 25, 2018

DOI: 10.3791/57831-v

Mikael N.E. Sommarin1, Rebecca Warfvinge1, Fatemeh Safi1, Göran Karlsson1

1Division of Molecular Hematology, Lund Stem Cell Center,Lund University

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a protocol that combines single-cell gene expression analysis with fluorescence-activated cell sorting (FACS) to explore heterogeneity in cell populations. It aims to characterize molecularly distinct cell types, particularly in the context of stem cells and cancer.

Key Study Components

Area of Science

  • Cell Biology
  • Neuroscience
  • Cancer Research

Background

  • Bulk gene expression measurements can obscure individual cell differences.
  • Understanding stem cell heterogeneity is crucial for therapeutic advancements.
  • FACS allows for the isolation of specific cell populations for detailed analysis.
  • This method provides insights into gene priming and lineage potential.

Purpose of Study

  • To delineate heterogeneity in cell populations.
  • To immunophenotypically characterize distinct cell types.
  • To investigate the effects of therapies on sensitive cancer cells.

Methods Used

  • Preparation of lysis buffer for single-cell analysis.
  • Use of fluorescence-activated cell sorting (FACS).
  • Single-cell gene expression analysis.
  • Downstream characterization of target subpopulations.

Main Results

  • The method effectively reveals stem cell heterogeneity.
  • It allows for the isolation of specific cancer cell populations.
  • Insights into gene priming and lineage potential were obtained.
  • The protocol is technically robust and reproducible.

Conclusions

  • This approach enhances the understanding of cellular diversity.
  • It has potential applications in both stem cell and cancer research.
  • The combination of techniques provides a comprehensive analysis of cell populations.

Frequently Asked Questions

What is the main advantage of this study?
The study combines single-cell gene expression analysis with FACS for detailed characterization of cell populations.
How does this method contribute to cancer research?
It allows researchers to isolate and study sensitive cancer cells, providing insights into treatment responses.
What are the key components of the lysis buffer?
The lysis buffer includes nuclease-free water, NP-40, dNTP, DTT, and RNAse inhibitor.
Can this method be used for other cell types?
Yes, it can be applied to various cell types beyond stem cells and cancer cells.
What insights can be gained from this protocol?
The protocol provides insights into cellular heterogeneity, gene priming, and lineage potential.
Is the protocol reproducible?
Yes, the method is designed to be technically robust and reproducible.

תפזורת ג'ין ביטוי מדידות ענן תא בודד הבדלים באוכלוסיות הטרוגניות תא. כאן, אנו מתארים את פרוטוקול עבור ביטוי מפענוח ואינדקס איך החד-תאיים מיון על-ידי Florescence מופעל התא מיון (FACS) יכול להיות משולב על הטרוגניות, immunophenotypically מאפיינות אוכלוסיות תאים נפרדים מולקולרי.

שיטה זו יכולה לענות על שאלות מפתח בשדות תאי גזע וסרטן כגון איך נראית הטרוגניות של תאי גזע וכיצד ניתן לבודד טיפול בתאי סרטן רגישים. היתרון העיקרי של מחקר זה הוא שהוא משלב ניתוח ביטוי גנים חד-תאי חזק מבחינה טכנית יחד עם חיסון לאפיון במורד הזרם של תת-כפילויות יעד. למרות שיטה זו יכולה לשמש כדי לחקור את הסרטן ואת הטרוגניות תאי גזע, זה יכול גם לתת תובנות לתוך priming גנים ופוטנציאל שושלת.

כדי להתחיל את הפרוטוקול, על ספסל נטול RNA / DNA, הכינו מספיק מאגר תמוגה ל-96 בארות עם תוספת של 10% על ידי ערבוב של 390 מיקרוליטרים נוקלאז מים חופשיים, 17 מיקרוליטרים של 10%NP-40, 2.8 מיקרוליטרים 10 מילימולרים dNTP, 10 מיקרוליטרים 0.1 מוליכים DTT, ו 5.3 מיקרוליטרים RNAse מעכב. וורטקס ותסתובבי במורד הצינור. לאחר מכן, להפיץ ארבעה microliters של חיץ תיזה לכל באר של צלחת PCR 96-well ולאטום את הצלחות עם סרט דבק.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

גנטיקה בעיה 140 הטרוגניות תא בודד RT-qPCR FACS מיון אינדקס immunophenotypic אפיון ניתוח ביטוי גנטי

Related Videos

ניתוח בידוד פנוטיפי של Murine בתאי גזע hematopoietic ו-Lineage מחויבים אבות

12:03

ניתוח בידוד פנוטיפי של Murine בתאי גזע hematopoietic ו-Lineage מחויבים אבות

Related Videos

19.4K Views

אפיון תאי גזע עוברי האנושי על ידי הפרט כמותי RT-PCR

09:03

אפיון תאי גזע עוברי האנושי על ידי הפרט כמותי RT-PCR

Related Videos

12.1K Views

ביטוי גנים תא בודד באמצעות Multiplex RT-qPCR לאפיון הטרוגניות של אוכלוסיות הלימפה נדירים

10:23

ביטוי גנים תא בודד באמצעות Multiplex RT-qPCR לאפיון הטרוגניות של אוכלוסיות הלימפה נדירים

Related Videos

11.5K Views

ניתוח המשובטים של תא גזע Hematopoietic מבשרי באמצעות אינדקס תא בודד מיון משולב עם תאי אנדותל נישה תרבות משותפת

09:32

ניתוח המשובטים של תא גזע Hematopoietic מבשרי באמצעות אינדקס תא בודד מיון משולב עם תאי אנדותל נישה תרבות משותפת

Related Videos

9K Views

זיהוי ובידוד של Oligopotent, ביצע לשושלת אבות מיאלואידית ממח העצם העכבר

07:21

זיהוי ובידוד של Oligopotent, ביצע לשושלת אבות מיאלואידית ממח העצם העכבר

Related Videos

9.5K Views

אפיון מרובה של סוגי תאים שאוחזרו ממוח העכבר/חוט השדרה דרך שיטות הומוקות שונות

10:24

אפיון מרובה של סוגי תאים שאוחזרו ממוח העכבר/חוט השדרה דרך שיטות הומוקות שונות

Related Videos

14.4K Views

ניתוח ציטומטריית זרימה של תאי גזע ותאי אב המטופויטיים של מח עצם מורין ותאי נישה סטרומליים

08:34

ניתוח ציטומטריית זרימה של תאי גזע ותאי אב המטופויטיים של מח עצם מורין ותאי נישה סטרומליים

Related Videos

6K Views

הערכה סימולטנית של קרבה, מספר חלוקה ופנוטיפ באמצעות ציטומטריית זרימה עבור תאי גזע המטופויטיים ותאי אב

10:20

הערכה סימולטנית של קרבה, מספר חלוקה ופנוטיפ באמצעות ציטומטריית זרימה עבור תאי גזע המטופויטיים ותאי אב

Related Videos

2.3K Views

הכנה איכותית של גרעיני מוח ומח עצם לבדיקות מולטיום של גרעינים בודדים

07:59

הכנה איכותית של גרעיני מוח ומח עצם לבדיקות מולטיום של גרעינים בודדים

Related Videos

3.7K Views

מיון חד-תאי של תאי גזע מזנכימליים אימונופנוטיפיים משיניים נשירות שעברו קילוף אנושי

13:44

מיון חד-תאי של תאי גזע מזנכימליים אימונופנוטיפיים משיניים נשירות שעברו קילוף אנושי

Related Videos

2.7K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code