토끼 내 분사 : 토끼 매머 글랜드에 관심의 솔루션의 현지화 전달

Overview

이 비디오에서우리는 토끼의 유방 덕트에 관심있는 용액을 투여하고 조영제의 고해상도 초음파 이미징에 의해 전달을 확인하는 기술을 설명합니다.

Protocol

1. 수술 전 준비

1. 각 토끼의 체중을 기록합니다. 모든 전임상 연구와 마찬가지로 동물의 무게를 정기적으로 모니터링하여 잠재적인 독성을 평가합니다.
2. 토끼를 마취하기 전에, 50 mL 원콘튜브를 시판 가능한 초음파 젤로 채우고 30 s용 500 x g에서 회전하십시오. 원심 분리가 완료되면 젤에 눈에 보이는 거품이 없어야합니다.
3. 글리카프로산은 0.1 mg/kg의 용량으로 피하시 투여하고 0.75 mg/kg의 용량으로 근육질로 아세프로마진을 투여합니다. 활력 징후와 행동을 모니터링하는 동안 진정제가 적용될 때까지 15-20분 정도 기다립니다.
   참고: 글리카프로슬레이트는 서맥을 방지하고 호흡기 및 GI 분비를 줄이는 항 콜린성 제제입니다. 아세프로마진은 마취를 위한 사전 약물로 작용하는 진정제입니다.
4. 투여 35 케타민의 mg/kg과 5 mg/kg의 자일라진 은 마취제로서 피하. 그러나, 운영자가 더 경험이 되고 더 빨리 내 전달을 달성할 수 있는 때, 케타민의 15 mg/kg 및 자일라진의 3 mg/kg으로 약물 복용량을 감소시키는 것은 피하; 이것은 마취 시간과 동물이 마취에서 회복하는 데 필요한 시간을 단축합니다.
5. 15분마다 심박수, SPO_2, 온도, 호흡률 및 점액막 색상을 확인하고 문서화합니다. 눈 윤활제를 양쪽 눈에 바르습니다.
   참고: 적절한 교육을 받고 기관의 IACUC에 의해 승인 된 직원만 마취를 관리하거나 모니터링해야합니다. 수의 마취 모니터의 사용은 활력 징후를 획득하는 데 도움이 될 수 있으며 권장됩니다. 그러나 수의 마취 모니터는 15분마다 동물을 수동으로 확인할 필요가 없습니다. 수의학 모니터의 적절한 사용에 대한 제조업체의 지침을 참조하십시오.
6. 부드러운 발가락 핀치에 의해 마취의 발병을 확인; 토끼는 계속하기 전에 응답하지 않아야합니다.
7. 세 번째와 네 번째 쌍의 잉게날 젖꼭지 주변에서 토끼의 코달 복부를 조심스럽게 면도하십시오.
8. 대부분의 모발을 제거하면 면도 부위에 창구 판매 제모 크림을 발라주세요. 따뜻한 물로 젖은 젖은 종이 타월을 사용하여 적용 후 크림을 10 분 제거하십시오.
   참고: 토끼 피부는 매우 깨지기 쉽고 민감합니다. 제모 크림은 10 분 이상 사용해야합니다. 실제로 5분에 "테스트 스팟"을 시도하는 것이 더 안전하며 테스트 스팟이 더 긴 기간이 필요하다는 것을 나타내는 경우에만 더 오래 방치하는 것이 더 안전합니다.
9. 알코올에 흠뻑 젖은 거즈 패드로 부위를 닦아 주입 부위를 청소하십시오.
10. 토끼를 dorsum에 놓고 따뜻한 물 담요와 흡수 패드가 늘어선 V 자 형 트로프에 놓습니다.

2. 조영제 준비

1. 제조업체의 지침에 따라 비표적 대비 시약을 재구성합니다. 파이펫을 부드럽게 위아래로 섞어 주세요.
   참고: 이 프로토콜에 사용되는 조영제는 재구성 후 4-6h의 실온에서 안정적입니다. 각 검색 사이에 유리병을 부드럽게 흔들어 보냅니다.
   참고: 필요한 솔루션의 양은 주입할 덕트의 수에 따라 달라집니다. 토끼는 젖꼭지 당 4 덕트 개구부를 가지고 있으며, 용액의 0.2 mL은 성인 뉴질랜드 화이트 토끼(Oryctolaguscuniculus)의하나의 덕트 트리를 채우기에 충분하다. 따라서, 총 부피 0.8 mL은 1마리의 유방선으로 전달될 수 있다.

3. 대회 배송

1. 주입할 적절한 젖꼭지를 찾습니다. 동물이 도르섬에 배치될 때 쉽게 시각화할 수 있기 때문에^3rd 및^4th 쌍의 잉게인 티츠를 권장합니다.
2. 22G 바늘이 있는 1mL 루어 락 결핵 주사기에 멸균 0.9% 식염수0.2mL를 적재한다. 식염수가 주사기에 들어가면 22G 바늘을 적절히 폐기하고 멸균 25 게이지 바늘로 교체하십시오. 거즈 패드에 85% 이소프로필 알코올로 부위를 부드럽게 닦아냅니다.
3. 바늘의 배꼽과 주사기가 동물의 신체와 평행하게 되면 바늘의 벨을 젖꼭지 측면에 삽입하고 0.1-0.2 mL의 식염수를 천천히 주입합니다. 이렇게 하면 덕트 개구부를 더 잘 시각화할 수 있습니다.
4. 1 mL 루어 락 결핵 주사기에 주입 용액의 0.2 mL을로드합니다.
5. 엄지와 검지 손가락으로 젖꼭지를 부드럽게 잡고 약간 들어 올려 자궁 내 주입을 위해 배치하십시오. 착용할 수 있는 안구 루프는 덕트 개구부를 시각화하는 데 도움이 될 수 있습니다.
6. 젖꼭지의 해제 된 위치를 유지하면서 25 G 무딘 팁 바늘을 사용하여 관심덕트를 조심스럽게 관리하십시오.
7. 캐니핑 후, 루어 락 주사기를 무딘 팁 주입 바늘의 허브에 부드럽게 비틀어 제자리에 고정될 때까지 비틀어냅니다.
8. 젖꼭지를 들어 올리고 용액을 천천히 주입하여 덕트 내에서 빠르게 움직이는 유체로 인한 잠재적 손상을 최소화합니다. 솔루션을 주입 할 때 저항이 없어야합니다.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
MicroMarker non-targeted contrast reagent	VisualSonics	VS-11694
Luer Lock 1 mL Syringes	BD	309628
Glycopyrrolate 0.2 mg/mL	Wedgewood Compounding Pharmacy	GLYCOP-INJ013VC	6 month shelf life, supply may be limited.
Ketamine HCL 100 mg/mL	Animal Health International	21250699	http:// www.animalhealthinternational.com/
Acepromazine 10 mg/mL	Animal Health International	17640541
Xylazine 20 mg/mL	Animal Health International	20101547
Hair Removing Cream	Veet		Sensitive skin solution. Available through local retailers.
Blunt tip infusion needles	Sai Infusion Technology	B14-50	http://www.sai-infusion.com/ collections/blunt-needles
Veterinary Pulse Oximeter	EdanUSA	VE-H100B	http://www.edanusa.com/Product/ VE-H100B-Veterinary-PulseOximeter.html
Warm Water Pump	Gaymar	TP700
Warm Water Blanket	Animal Health International	21232696	Maxi-Therm Lite Warming Pads