Summary
Här beskriver vi metoden att generera en artificiell decidualiseringsmodell med hjälp av den ovariektomerade musen, ett klassiskt endometriellt decidualiseringsexperiment inom forskningsområdet endometriedecidualisering.
Abstract
Endometrial decidualisering är en unik differentieringsprocess av endometrium, nära besläktad med menstruation och graviditet. Försämring av decidualisering leder till olika endometriella störningar, såsom infertilitet, återkommande missfall och för tidig födsel. Utvecklingen och användningen av endometriedecidualiseringsmodellen i reproduktionsstudier har länge varit en höjdpunkt för reproduktiva forskare. Musen har använts i stor utsträckning för att studera reproduktion och decidualisering. Det finns tre väletablerade musmodeller avseende decidualisering, nämligen naturlig graviditetsdecidualisering (NPD), artificiell decidualisering (AD) och in vitro decidualisering (IVD). Bland dem anses AD vara en pålitlig modell för musdecidualisering, vilket är lätt att implementera och nära NPD. Denna artikel fokuserar på en modifierad metod för generering och applicering av musens artificiella decidualiseringsmodell med ovariektomi för att undvika äggstockseffekter, vilket kan ge mycket reproducerbara resultat med små inom gruppvarianser. Denna metod ger en bra och pålitlig djurmodell för studier av endometriell decidualisering.
Introduction
Med utvecklingen av humanassisterad reproduktionsteknik har den nuvarande kliniska graviditetsfrekvensen för in vitro-fertilisering-embryoöverföring (IVF-ET) nått eller till och med överskridit den för naturlig graviditet. Trots detta genomgår många patienter i assisterad befruktning fortfarande flera embryoöverföringar men misslyckas med att uppnå graviditet som önskat. Men dess specifika molekylära mekanism är fortfarande oklar, så klinisk intervention är ineffektiv, vilket är en av de betydande utmaningarna för reproduktiv medicin 1,2.
Endometriella faktorer står för ungefär två tredjedelar av orsakerna till IVF-misslyckande3. Implantation av mänskliga embryon är uppdelad i tre steg: positionering, vidhäftning och invasion 4,5,6. Moderns endometrium genomgår en rad förändringar för att möta embryonets ankomst. Att bilda en implantation "fönsterperiod" ger gynnsamma förutsättningar för embryoimplantation 7,8.
I de flesta däggdjur, efter att blastocysten fäster vid livmoderns luminala epitel, börjar stromacellerna som omger blastocysten snabbt att proliferera och differentiera, och den snabba ombyggnaden av mesenkymet ändrar dess form och funktion, vilket leder till embryoimplantation 5,9,10. Den snabba ökningen av platsvolym och vikt gör att blastocysten kan bäddas in i livmoderstroma, en process som kallas decidualisering11. Endometriestroma differentierar och omformas som förberedelse för graviditet, medan övergången av stromaceller ger utrymme och nya signalförbindelser för decidala celler att utföra sina funktioner12,13. Stromaceller omvandlas till decidala celler och utsöndrar många ikoniska faktorer som prolaktin (PRL), insulinliknande tillväxtfaktorbindande protein 1 (Igfbp1) och så vidare. Studier har visat att onormal decidualisering är en av de viktigaste orsakerna till embryoimplantationsfel, men orsaken till onormal decidualisering är fortfarande oklar och måste belysas ytterligare 1,14.
Musens artificiella decidualiseringsmodell är avgörande för att studera den fysiologiska processen och molekylära mekanismer som ligger bakom decidualisering. Artificiell decidualisering (AD) avser huvudsakligen processen för endometriell decidualisering etablerad genom artificiella metoder för att simulera graviditet eller menstruationscykeln. När det gäller morfologi är det liten total skillnad mellan graviditetsdecidualisering och artificiell decidualisering15,16. Livmoderkörtlarna finns i endometrium före deciduaform och försvinner efter decidualisering. När det gäller genuttrycket identifieras endast en liten skillnad mellan naturlig graviditetsdecidualisering (NPD) och AD15. Följaktligen kan den artificiella decidualiseringsmodellen hos möss simulera graviditetsdecidualisering för att utforska den okända patogenesen och ny behandling av mänskliga reproduktionssjukdomar.
NPD, AD och in vitro decidualisering (IVD) är tre metoder för att uppnå musdecidualisering. NPD-modellen beror på naturlig graviditet och ligger närmast moderns fysiologiska tillstånd, inklusive effekterna från embryon. Att jämföra skillnaderna mellan implantations- och icke-implantationsställen är ett mer fysiologiskt och bekvämt tillvägagångssätt för att studera decidualisering. AD-modellen utvecklades genom att använda en intrauterin injektion av sesamolja som ett stimulerande medel för att inducera decidualisering i en pseudogravid kvinnlig mus parad med vasektomerade män för att undvika påverkan från embryon. Både NPD- och AD-modeller spelar viktiga roller i olika forskningsändamål, men de kan inte undvika parningsfel och skillnader inom gruppen som orsakas av de olika aktiviteterna i moderns hormonmetabolism. IVD är en metod som är beroende av behandling av kombinerat östrogen och progesteron på cellnivå, vilket kräver strängare experimentella förhållanden och driftsförmåga. In vitro-modellen kan dock inte helt simulera det decidala svaret under fysiologiska förhållanden15. Därför föreslår vi en enkel och förbättrad induktionsmetod modifierad från traditionell AD för att minska effekten av endogena hormoner på decidualisering. Baserat på att säkerställa framgången med decidualiseringsinduktion är den närmare det fysiologiska tillståndet och mer lämplig för experiment som behöver utesluta embryofaktorer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla djurförsök som beskrivs godkändes av Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School's Committee on the Use and Care of Animals (nr 20171202). All verksamhet följer lämpliga riktlinjer för djurvård och användning och nationella riktlinjer.
OBS: Möss föddes upp i en specifik patogenfri (SPF) miljö, med en temperatur på 22 ° C ± 1 ° C, relativ luftfuktighet på 50% ± 1%, en ljus / mörk cykel på 12 h / 12 h och fri tillgång till mat och vatten.
1. Mus ovariektomi
- Sterilisera de kirurgiska instrumenten med en högtemperatur- och högtryckssterilisator 1 dag före operationen.
- Väg upp 8 veckor gamla C57BL / 6-möss och intraperitonealt (i.p) injicera 1% natriumpentobarbital i enlighet därmed för att bedöva mössen. Den använda dosen är 40 mg/kg17. Denna dos ger 40-60 minuters sedering, vilket uppfyller kraven för en ovariektomi. Vid preoperativ analgesi, injicera möss med 5 mg/kg meloxikam (s.c).
OBS: Framgångsrik anestesi hos möss kan indikeras genom försvinnandet av djupa muskelreflexer och stadig andning. Tecken på framgångsrik anestesi inkluderar ingen blinkning vid beröring av den inre canthusen, ingen sväljning när du drar tungan, ingen benböjning när du klämmer huden mellan tårna och ingen studsar när du nålar svansen. - Applicera den skyddande ögonsalvan på ögonbollarna för att förhindra torrhet under anestesin.
- Starta operationen när möss är helt bedövade. Placera och fixera mössen i utsatt läge på arbetsytan och raka håret på baksidan efter att ha fuktat dem med tvålvatten. Desinficera huden med 70% etanol efter rakning.
- Hitta operationssnittet på 0,5 cm (eller 1,0 cm under revbenet) på den övre kanten av lårroten på båda bakbenen parallellt med ryggraden (figur 1A).
OBS: En korrekt snittplats är avgörande för att snabbt lokalisera äggstocken. - Ta snittstället som centrum och desinficera snittområdet med jodofor 3x, placera sedan ett kirurgiskt draperi runt snittområdet.
- Gör ett längsgående snitt på ca 0,5-1,0 cm med sax. Skär fascia och passivt separera musklerna med pincett.
- Hitta en bit av den vita fettkudden i snittfältet nära njurens nedre pol genom det tunna muskelskiktet (figur 1B).
OBS: Den vita fettkudden är den mest uppenbara indikatorn på äggstockens placering. - Kläm fast fettmassan med hemostatiska klämmor och dra äggstocken som lindas av fettkudden ur snittet.
- Kläm fast korsningen mellan äggstocken och äggledaren med krökt pincett och ta bort äggstocken längs äggstockspedikeln med sax. Stoppa blödningen med hjälp av en elektrokoaguleringspenna eller en nål på en 1 ml spruta uppvärmd på alkohollampan.
OBS: Var noga med att bevara äggledaren, som är det anatomiska landmärket för efterföljande injektion av sesamolja i livmoderhornen. - Skölj det kirurgiska snittet med normal saltlösning för att förhindra vävnadshäftning, använd en 4-0 sutur för att sy muskeln respektive huden och desinficera det kirurgiska snittet med jodofor igen.
- Placera mössen i utsatt läge i buren och återuppliva dem i en 25 °C inkubator utrustad med en ljuskälla och ett ventilationssystem i ca 2 timmar.
- Var uppmärksam på mössen efter operationen, sätt tillbaka dem på den ursprungliga utfodringsplatsen ensam tills de återhämtar sig helt och ge dem tillräckligt med vatten och mat.
2. Postoperativ vila och östrogen- och progesteronformulering
- Se till att mössen vilar i 2 veckor efter ovariektomi.
- I ett ultrarent skåp, tillsätt östrogen (2 ng / μL) och progesteron (0,2 ng / μL) i sesamolja i RNA-enzymfria centrifugrör.
- Placera centrifugrören i ett termostatiskt vattenbad vid 37 °C och skaka rören kontinuerligt för att påskynda upplösningen.
- Efter fullständig upplösning, dela sesamoljelösningen i 100 μL aliqouts för bekväm användning. Förvara de beredda östrogen- och progesteronlösningarna i kylskåp vid 4 °C.
3. Inducerad artificiell decidualiseringsmodell
- Subkutant (s.c) injicera 100 ng östrogen i 50 μL sesamolja i varje mus i 3 dagar, följt av 2 dagars vila15.
OBS: Se till att östrogen och progesteron har formulerats och placerats på olika ställen. Eventuell kontaminering av östrogen med progesteron kan leda till misslyckande. - Injicera (s.c.) 1 mg progesteron och 10 ng östrogen i 50 μL sesamolja i varje mus i ytterligare 3 dagar15.
- Använd mössen för att inducera den artificiella decidualiseringsmodellen15 6 h efter den tredje kombinerade östrogen-progesteroninjektionen.
- Hitta livmoderhornet i nedre änden av äggledarna och injicera 20 μL sesamolja långsamt tillsammans med livmoderhornet, tryck tillbaka vävnaden, suturera snittet och låt musen återhämta sig. Tillvägagångssättet för drift är detsamma som musovariektomi15.
OBS: Fortsätt endast med den andra operationen i händelse av en lyckad ovariektomi (hudsnittet är väl läkt, äggstocken skärs ut fullständigt och den återstående änden av äggledaren fästs inte vid de omgivande vävnaderna).
OBS: För inducering av AD-modellen är 20 μL sesamolja lämplig; mer än 20 μL sesamolja tränger lätt in på andra sidan. - Injicera (s.c.) 50 μL sesamolja innehållande 1 mg progesteron och 10 ng östrogen (H.) i ytterligare 4 dagar. Se närmare uppgifter i figur 2: 15,18.
4. Insamling av prover
- Avliva mössen (n = 6) genom koldioxidkvävning och samla livmodern. Observera formen på den bilaterala livmodern, ta bilder och väga livmoderhornen (figur 3A, B).
- Fixa 3-5 mm av livmodervävnaden med 10% formalin, bädda in paraffin och sektionera dem. Färga sektionerna med hematoxylin och eosin för att observera de morfologiska förändringarna19 (figur 4A).
- Bädda in ytterligare 3-5 mm av livmodervävnaden i optimal skärtemperaturförening (OCT), frys i flytande kväve och förvara i ett kylskåp med −80 °C. Vävnaden fryses till 10 μm och alkalisk fosfatasaktivitet detekteras i livmodervävnaden med azokopplingsmetod20 (figur 4B).
OBS: Tillfredsställande resultat kan erhållas med frysta sektioner för att detektera ALP-innehåll, inte paraffinsektioner. - Extrahera livmoderns totala RNA med Trizol-reagens och utföra kvantitativ realtids-PCR (qPCR) på ett PCR-system i realtid (Table of Materials) med qPCR-mastermix (Table of Materials) för att detektera det relativa mRNA-uttrycket av prolaktinfamilj 8 subfamiljemedlem 2 (Prl8a2), alkaliskt fosfataslever/ben/njure (Alpl) och insulinliknande tillväxtfaktorbindande protein 1 (Igfbp1)15 genom normalisering till 18S mRNA-nivåer (figur 4C-E ). Följ PCR-förhållandena: Steg 1, 95 °C i 30 sekunder; Steg 2, 95 °C i 10 sekunder och 60 °C i 30 sekunder. Upprepa cykeln 40x. En fullständig lista över primersekvenser finns i tabell 1.
- Analysera qPCR-data med hjälp av 2-ΔΔCT-metoden och en t-testmetod för statistisk analys i lämplig programvara. I denna studie ansågs p < 0,05 vara statistiskt signifikant.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Musdecidualiseringsmodellindexen inkluderar livmoderns allmänna morfologi, massförhållandet mellan den decidualiserade och icke-decidualiserade livmodern, endometriumets histologiska morfologi och uttrycksnivån för decidualiseringsmarkörmolekyler. Den allmänna morfologin hos den artificiella decidualiserade livmodern hos möss inducerad av olja är närmare livmoderns under graviditeten. Livmoderkroppen blir tjock och livmoderhålan blir mindre än den icke-inducerade sidan. Volymen och vikten av det inducerade livmoderhornet är signifikant högre än den för den icke-inducerade sidan (figur 3A,B). Färgning av livmodervävnad visade att körtlarna försvinner och endometriella stromaceller på det inducerade hornet differentieras till stora, runda, cytoplasmatiska och flerkärniga decidala celler med oklara cellgränser. De icke-inducerade sidosektionerna visar endometrievävnadens morfologi under ett normalt fysiologiskt tillstånd (figur 4A). Resultatet av azokopplingsmetoden visade att halten alkaliskt fosfatas på den oljeinducerade sidan var signifikant högre än den icke-inducerade sidan (figur 4B). qPCR-resultaten visade att mRNA-uttrycket av Prl8a2, Alpl och Igfbp1 i det inducerade hornet var signifikant högre än det i det icke-inducerade, vilket tyder på att olja kan inducera artificiell decidualisering hos möss (figur 4C-E).
Figur 1: Det operativa snittet av musen ovariektomi . (A) Musens ovariektomiposition. (B) Musäggstockens position under ovariektomi. (C) Platsen för äggstocken under ovariektomi. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: Förfarandet för operationen. Hela proceduren innefattar ovariektomi, postoperativ vila, induktion av den artificiella decidualiseringsmodellen och fenotypisk validering. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 3: Generering av musens artificiella decidualiseringsmodell . (A) Representativ bild av artificiell decidualisering inducerad av olja. Den högra sidan livmodern injicerades inte med olja, namngiven olja (-). Den vänstra livmodern injicerades med olja, namngiven olja (+). (B) Livmoderns vikt injicerad med eller utan olja. p < 0,001. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 4: Validering av musens artificiella decidualiseringsmodell . (A) Representativ bild av artificiell decidualisering inducerad av olja. Skalstång = 1 mm och 100 μm. (B) Azokopplingsmetoden detekterade den alkaliska fosfatasaktiviteten hos artificiell decidua. Skalstänger = 200 μm och 50 μm. (C) Uttrycksnivån för Prl8a2 mRNA detekterades med qPCR. * p < 0,05. (D) Uttrycksnivån för Alpl-mRNA . ** p < 0,01. (E) Uttrycksnivån för Igfbp1 mRNA. ** p < 0,01. Klicka här för att se en större version av denna figur.
| Igfbp1 Mus qPCR-F | GCCCAACAGAAAGCAGGAGATG |
| Igfbp2 mus qPCR-R | GTAGACACACCAGCAGAGTCCA |
| Prl8a2 Mus qPCR-F | ACCACAACCCATTCTCAGCTGG |
| Prl8a2 mus qPCR-R | TGTTCAGGTCCATGAGCTGGTG |
| Alpl Mus qPCR-F | CCAGAAAGACACCTTGACTGTGG |
| Alpl Mus qPCR-R | TCTTGTCCGTGTCGCTCACCAT |
| 18s mus qPCR-F | ATGGCCGTTCTTAGTTGGTG |
| 18s mus qPCR-R | CGGACATCTAAGGGCATCAC |
Tabell 1: Förteckning över primersekvenser.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Decidualisering hos möss är en spontan process beroende på närvaron av embryon, som skiljer sig från människor. Det har emellertid visat sig att artificiell stimulering såsom livmoderinjektion av glaspärlor och livmoderlaceration kan inducera decidualisering av endometrium istället för embryon. Dessutom fann forskare att många faktorer kan inducera decidal eller delta i decidualisering, såsom injektion av steroidhormoner, prostaglandiner och tillväxthämmande faktorer i livmoderhålan21. Jämfört med modelleringsmetoderna ovan kan musmodellen som beskrivs här med ovariektomi, med sesamolja som stimulans, utesluta effekterna av östrogen och progesteron endogent producerat. Därför är det ekonomiskt och enkelt att använda.
Äggstockarna ska avlägsnas rent för att förhindra kvarvarande äggstocksvävnad, vilket kommer att påverka den efterföljande induktionen av decidualisering. Detta steg syftar till att minska effekterna av endogent östrogen och progesteron som produceras av äggstockarna. Skador på äggledaren bör undvikas eftersom det kan användas som ett tecken för att leta efter livmodern när man injicerar sesamolja i livmoderhålan. Om bukadhesion eller äggledarborttagning inträffar måste operatören vara uppmärksam på att skilja livmodern från tarmen.
Oljeläckage uppstår lätt vid subkutan injektion. Man bör välja bukhuden som ett subkutant injektionsställe och undvika bröstvårtorna. Det är nödvändigt att injicera oljan och dra ut nålen långsamt. Om nålen inte kan dras ut när musen är aktiv resulterar det lätt i läckage. Man bör trycka på nålstället med en bomullstuss ett ögonblick för att förhindra läckage. Exogena östrogen- och progesteroninjektioner användes i denna operation för att hålla mössens hormonnivåer stabila före den inducerande decidualiseringsoperationen. Denna injektionsmetod simulerade hormonförändringar i periimplantationsperioden hos möss. Häri inducerade vi decidualisering efter den andra östrogentoppen.
Nyckeln till framgången med denna operation är mängden sesamolja som injiceras. För mycket sesamolja kommer att tränga in i håligheten i livmoderns andra horn. Otillräcklig sesamolja kommer att leda till minskad decidualiseringsrespons eller ojämn decidualisering längs livmodern, vilket resulterar i oväntade experimentella skillnader. Under operationen ska man föra in sprutnålen i livmoderhålan när man injicerar sesamolja och dra försiktigt fram och tillbaka för att säkerställa att nålen är i livmoderhålan. En del av livmoderhålan kan ses som transparent om den injiceras framgångsrikt. Man bör försiktigt klämma nålsticket med pincett i cirka 10 s för att säkerställa att det är stängt, vilket kan förhindra läckage av sesamolja efter att ha dragit ut nålen. Tryck samtidigt försiktigt livmoderkroppen nedåt med nålen för att få sesamoljan att spridas jämnt i livmoderhålan.
Efterbehandlingen och återupplivningen är andra nycklar till modellens framgång. För det första är det viktigt att hålla en steril miljö för snittet under operationen. Innan mössen återupplivas, desinficera operationssnittet med jodofor och täck det med en bit medicinsk gasbindning för att minska förekomsten av infektion. Efter operationen måste mössen metabolisera anestetika i 2-3 timmar för att återhämta sig. Under denna period måste mössen placeras i en 25 ° C inkubator för att återhämta sig snabbare och undvika hypotermi orsakad av desinfektion med 70% alkohol och jodofor. Man bör vara uppmärksam på läkningen inom några dagar efter operationen och hantera olika typer av operativa komplikationer i tid, såsom snittsprickbildning, svullnad, sårbildning och så vidare.
Prl8a2 och Alpl är de mest klassiska decidualiseringsmarkörerna. Igfbp1 är också huvudproteinet i deciddualiserade celler hos möss och anses vara den specifika markören för decidualisering hos möss. Uttrycksnivåerna av Prl8a2, Alpl och Igfbp1 mRNA i det oljeinducerade livmoderhornet ökar signifikant jämfört med kontrollsidan utan oljeinjektion. Dessutom är alkalisk fosfatasaktivitet på den oljeinducerade sidan signifikant högre än på kontrollsidan. Dessa resultat indikerar alla framgången för den artificiella decidualiseringsmodellen15.
Musens artificiella decidualiseringsmodell kan användas för att validera patogena infertilitetsmolekyler och ge en bra valideringsmodell för att diagnostisera och behandla infertilitet i samband med onormal endometriedecidualisering. Denna modell är användbar för att studera reproduktiva sjukdomar, såsom upprepad abort och upprepad implantationsfel. Det används för att studera rollen av moderfaktorer i embryoimplantation och invasion. Denna AD-modell har god säkerhet, en hög framgångsgrad och löser påverkan av endogena hormoner. Det är dock en tidskrävande och mycket krävande process. Vi kommer att ytterligare optimera våra experimentella metoder för att underlätta forskningen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inget att avslöja.
Acknowledgments
Författarna vill erkänna stöd från National Nature Science Foundation of China (82001629, XQS), Youth Program of Natural Science Foundation of Jiangsu Province (BK20200116, XQS) och Jiangsu Province Postdoctoral Research Funding (2021K277B, XQS).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Estrogen | Sigma | E2758 | Hormone supplement |
| Progesterone | Sigma | P0130 | Hormone supplement |
| Sesame oil | Sigma | S3547 | Hormone supplement |
| Sodium pentobarbital | Dainippon Sumitomo Pharma Co.,Ltd. | Anaesthesia | |
| Meloxicam injection | Qilu Animal Health Products Co., Ltd | Analgesia | |
| Alkaline phophatase stain kit(kaplow's/azo coupling method) | Solarbio | G1480 | Alkaline phophatase stain |
| Eosin | Servicebio | G1005-2 | HE stain |
| Hematoxylin | Servicebio | G1005-1 | HE stain |
| ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix | Vazyme | Q711-02 | qPCR |
| 70% ethanol | Lircon | ZH1120090 | Disinfect |
| Iodophor | Runzekang | RZK-DF | Disinfect |
| Erythromycin Eye Ointment | Guangzhou Baiyunshan | Mice eyeball protect | |
| 4-0 suture | Ethicon | W329 | Incision suture |
| 10% formalin | Yulu | L25010118 | Tissue fix |
| Optimal cutting temperature compound | Sakura | 4583 | Ssection |
| Trizol reagent | Ambion | 15596018 | qPCR |
References
- Carson, S. A., Kallen, A. N. Diagnosis and management of infertility: A review. JAMA. 326 (1), 65-76 (2021).
- Yatsenko, S. A., Rajkovic, A. Genetics of human female infertility dagger. Biology of Reproduction. 101 (3), 549-566 (2019).
- Sang, Y., Li, Y., Xu, L., Li, D., Du, M. Regulatory mechanisms of endometrial decidualization and pregnancy-related diseases. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 52 (2), 105-115 (2020).
- Ng, S. W., et al. Endometrial decidualization: The primary driver of pregnancy health. International Journal of Molecular Sciences. 21 (11), 4092 (2020).
- Birgit, G., Brosens, J. J. Cyclic decidualization of the human endometrium in reproductive health and failure. Endocrine Reviews. 35 (6), 851-905 (2014).
- Owusu-Akyaw, A., Krishnamoorthy, K., Goldsmith, L. T., Morelli, S. S. The role of mesenchymal-epithelial transition in endometrial function. Human Reproduction Update. 25 (1), 114-133 (2019).
- Paulson, E. E., Comizzoli, P. Endometrial receptivity and embryo implantation in carnivores-commonalities and differences with other mammalian species. Biology of Reproduction. 104 (4), 771-783 (2021).
- Kelleher, A. M., Milano-Foster, J., Behura, S. K., Spencer, T. E. Uterine glands coordinate on-time embryo implantation and impact endometrial decidualization for pregnancy success. Nature Communications. 9 (1), 2435 (2018).
- Tian, J., et al. Attenuated monoamine oxidase a impairs endometrial receptivity in women with adenomyosis via downregulation of FOXO1dagger. Biology of Reproduction. 105 (6), 1443-1457 (2021).
- Large, M. J., DeMayo, F. J. The regulation of embryo implantation and endometrial decidualization by progesterone receptor signaling. Molecular and Cellular Endocrinology. 358 (2), 155-165 (2012).
- Dunn, C. L., Kelly, R. W., Critchley, H. O. Decidualization of the human endometrial stromal cell: an enigmatic transformation. Reproductive BioMedicine Online. 7 (2), 151-161 (2003).
- Zhu, H., Hou, C. C., Luo, L. F., Hu, Y. J., Yang, W. X. Endometrial stromal cells and decidualized stromal cells: Origins, transformation and functions. Gene. 551 (1), 1-14 (2014).
- Jose, R. M., et al. Endometrial and decidual stromal precursors show a different decidualization capacity. Reproduction. 160 (1), 83-91 (2020).
- Pan-Castillo, B., et al. Morphophysical dynamics of human endometrial cells during decidualization. Nanomedicine. 14 (7), 2235-2245 (2018).
- Wang, C., et al. Comparative analysis of mouse decidualization models at the molecular level. Genes. 11 (8), 935 (2020).
- De Clercq, K., Hennes, A., Vriens, J. Isolation of mouse endometrial epithelial and stromal cells for in vitro decidualization. Journal of Visualized Experiments. (121), e55168 (2017).
- Kerger, H., et al. Microvascular oxygen delivery and interstitial oxygenation during sodium pentobarbital anesthesia. Anesthesiology. 86 (2), 372-386 (1997).
- Filant, J., Spencer, T. E. Endometrial glands are essential for blastocyst implantation and decidualization in the mouse uterus. Biology of Reproduction. 88 (4), 93 (2013).
- Sheng, X., et al. The mitochondrial protease LONP1 maintains oocyte development and survival by suppressing nuclear translocation of AIFM1 in mammals. EBioMedicine. 75, 103790 (2022).
- Grogg, E., Pearse, A. G. Coupling azo dye methods for histochemical demonstration of alkaline phosphatase. Nature. 170 (4327), 578-579 (1952).
- Labarta, E., et al. Analysis of serum and endometrial progesterone in determining endometrial receptivity. Human Reproduction. 36 (11), 2861-2870 (2021).
