Summary
Bakım noktasında doğru bir hemoglobin tahmin yöntemi eksiktir ve anemi tedavisi için popülasyona dayalı programları engelleyebilir. Bu nedenle, hemoglobin değerlerini farklı anemi derecelerine göre kategorize etmek için havuzlanmış kılcal kan ve özel bir yazılım uygulamasına entegre edilmiş bir oto-analizöre dayalı bir bakım noktası yöntemi geliştirdik.
Abstract
Popülasyon düzeyinde anemiyi tahmin etmek için sağlam bakım noktası yöntemleri gereklidir. Doğru yöntemler laboratuvar tabanlıdır ve bakım noktasında kullanılamaz. Bu uyarıyı gidermek için, Hb'nin tahmini için havuzlanmış kılcal kan ve taşınabilir bir otoanalizöre dayanan yeni bir yöntem geliştirilmiştir. Ayrıca, katılımcıları anında aneminin farklı aşamalarına ayırabilen bir karar destek aracı geliştirilmiştir. Karar destek aracı, Dünya Sağlık Örgütü'nün (WHO) nüfus düzeyinde anemi sınırına dayalı olarak tasarlandı ve tüm yaş ve cinsiyet grupları için mevcuttu. Bu basit ve kullanıcı dostu araç, sınırlı teknik becerilere sahip ön saflardaki sağlık çalışanları tarafından kolayca kullanılabilir. Genel olarak, geliştirilen yöntem bakım noktasında kullanılabilir ve doğrudur. Bu yüksek verimli yöntem, tüm yaş ve cinsiyet grupları için popülasyon düzeyinde anemi taraması için kullanılabilir.
Introduction
Anemi, küresel olarak, özellikle Hindistan'da önemli bir halk sağlığı sorunudur. Aneminin, nüfusun iş verimliliği ve ülkenin ekonomik büyümesi üzerinde zararlı bir etkisi olduğu iyi bilinmektedir1. Anemiyi azaltmak için ulusal düzeydeki çabalardan yararlanmak için, 2018'de başlatılan en son halk sağlığı programı Anemi Mukt Bharat programıdır (AMB). AMB, hassas yaş gruplarında anemi prevalansını azaltmak için en umut verici yaklaşımlardan biri olarak 'test' ve ardından kişiye özel 'tedavi' kavramını tanımlamaktadır2. Bununla birlikte, AMB'nin 'test et ve tedavi et' stratejisini uygulamak için anemi teşhisi için hemoglobinin (Hb) doğru bakım noktası (POC) tahminine ihtiyaç vardır. Ayrıca, büyük ölçekli topluluk anketlerinde anemiyi doğru bir şekilde tahmin etmek için sağlam yöntemler yararlıdır. Mevcut POC yöntemleri, non-invaziv ve minimal invaziv cihazları içerir ve Hb tahmini3 için kılcal kan örneklerini kullanırlar. Bununla birlikte, parmak delme boyutlarındaki varyasyon, derinin kalınlığı ve POC cihazlarının çevresel koşullar altındaki stabilitesi gibi birkaç pre-analitik faktör, kesin olmayan ölçümlere yol açar ve yaygınlık tahminlerinde büyük farklılıklara neden olur 3,4,5. Bu nedenle, mobil, kısa bir geri dönüş süresine (TAT) sahip ve kaynak açısından zayıf ayarlar için uygun bir Hb tahmin yöntemi oluşturmaya ihtiyaç vardır6. Bu ihtiyaçları karşılamak için, potasyum etilendiamintetraasetik asit (EDTA) mikrotainer tüplerine 6-8 damla serbest akışlı kan örneğini kolaylaştırmak için dokunmayla etkinleştirilen bir neşter (tek tip dikme derinliği ve boyutu sağlamak için) kullanılarak havuzlanmış bir kılcal kan alma yöntemi geliştirilmiştir. Bu örneklerdeki Hb daha sonra kesintisiz bir güç kaynağı ile donatılmış POC'de veya elektriği olan yakındaki bir merkezde (Anganwadi, Sağlık kliniği, Panchayath veya ev) bir araca yerleştirilen taşınabilir bir oto-analizör kullanılarak ölçüldü. Bu yöntemi iki altın standart yöntemle (eşleştirilmiş venöz kan örnekleri ve siyanometamoglobin yöntemi) karşılaştıran bir doğrulama çalışması, yüksek doğruluk ve kesinlik göstermiştir 7,8.
Geçerli ve güvenilir bir POC yöntemi oluşturmanın yanı sıra, popülasyon düzeyinde aneminin taranmasını ve tedavisini kolaylaştırmak için hızlı karar vermeye ihtiyaç vardır. Bu, Hb tahmininin sağlık kuruluşunda yapıldığı ve bir sağlık görevlisinin demir ve folik asit (IFA) takviyelerinin dağıtımını doğrudan denetlediği durumlarda şu anda mümkün değildir. Birinci basamak sağlık merkezlerindeki sağlık görevlileri tarafından karşılanan büyük nüfus nedeniyle, müdahalenin başlatılmasında önemli bir gecikme yaşanmaktadır. Sağlık görevlisi üzerindeki iş yükünü azaltabilecek ve ön saflardaki sağlık çalışanlarını, tıbbi personelin doğrudan katılımı olmadan müdahale sunumunu gerçekleştirmeleri için güçlendirebilecek teknolojiye ihtiyaç vardır. Bu nedenle, çalışma, makineden gelen verileri otomatik olarak iletebilen özel bir uygulama (eSTAR uygulaması) ve ön saflardaki çalışanlara Hb değerleri, yaş ve cinsiyet gruplarına dayalı olarak IFA dozu konusunda karar desteği sağlayan yerleşik bir algoritma geliştirmeyi amaçladı. Yazılım, entegre bir geliştirme ortamı olarak Visual Studio Code ile PHP: hypertext preprocessor (PHP) betik dili ve PHP masaüstü chrome gibi açık kaynaklı araçlar kullanılarak tasarlanmıştır. Anemi Mukt Bharat yönergelerine dayalı ayrıntılı bir tedavi protokolü Android uygulamasınaentegre edilmiştir 2.
Bu entegre yöntem, doğruluğu ve kesinliği korurken test sonuçlarının geri dönüş süresini kısaltmak için sürekli artan talebi ele alır. Ayrıca, dakikalar içinde sonuç verme yeteneği, tedavinin başlatılması konusunda hızlı karar vermeyi sağlar ve daha iyi müdahale sunumu ile sonuçlanır9. Bu entegre yöntem, Hb testini içeren herhangi bir saha düzeyindeki anketler veya müdahale programları için uyarlanabilir. Ek olarak, sağlık kuruluşunda sağlık personelinin IFA tedavisine karar vermesi için bir iş yardımı olarak kullanılabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Protokol, ICMR-Ulusal Beslenme Enstitüsü, Haydarabad, Hindistan (IRB. No.08/I/2018).
1. Hematoloji analizörü kullanılarak Hb analizi için havuzlanmış kılcal numune toplama10,11
- Barkod yazıcıyı ve tarayıcıyı yapılandırma
- Barkod yazıcıyı dizüstü bilgisayar sistemine bağlayın.
- Barkod yazıcı sürücüsünü dizüstü bilgisayara yükleyin.
- Yazıcıyı yazıcı özelliklerinde paylaşın.
- Herhangi bir hata için uygulamadaki barkod yazdırmayı test edin.
- Barkod tarayıcıyı Otomatik analizöre bağlayın, kendini otomatik olarak yapılandıracaktır.
- Masaüstü/dizüstü bilgisayarda yüklü olan uygulama yazılımını açmak için simgeye çift tıklayın. Oturum açma sayfasında yetkili kimlik bilgilerini girin.
NOT: Uygulamanın ana sayfası, laboratuvar sonucu yükleme, barkod yazdırma kalite kontrol (QC) raporları ve nihai hematoloji raporu için sekmelerden oluşur. - Barkod oluşturmak için, Barkod Yazdırma sekmesine tıklayın. Katılımcı listesi, köy adları gibi coğrafi bilgiler girildikten sonra otomatik olarak barkod yazdırma sekmesinde görünür.
- Ekran Seçimi'ne tıklayın. Liste görüntülenir. Barkod yazdır'a tıklayın.
- Havuzlanmış kılcal kan örneği alımı (Şekil 1)
- Yetişkin bir hastada kılcal kan örneklemesi için sol elin orta üç parmağından birini kullanın.
- Katılımcıdan rahat bir pozisyonda oturmasını isteyin,bu da flebotomistin parmağa erişmesini sağlar.
- Parmağınızı alkollü bir bezle (%70 izopropil alkol içerir) temizleyin ve kurumasını bekleyin.
- Mikrotainerleri, katılımcının tanımlanmasından hemen sonra ve cilt delinmeden önce katılımcıyla ilgili bilgilerle (barkod) etiketleyin.
- Kan örneğini tek kullanımlık bir güvenlik lanseti (temasla etkinleştirilen lanset 2.0 X 1.5 mm) kullanarak toplayın. Kan örneğini toplamak için, cildi parmağın ucundan orta nokta ile parmağın yan tarafı arasında yaklaşık 1 cm delin. Delinme, orta veya yüzük parmağının parmak ucunun avuç içi yüzeyinde olmalıdır.
- İlk kan damlasını silin ve sonraki kan örneklerini kaplanmış bir mikrotainerde toplayın.
- Parmağa masaj yapmayın.
- Mikrotainer'ı delinme bölgesinin altına dikey olarak yerleştirin, böylece kan damlacıkları basınç uygulamadan tüpe serbestçe akar. 4-6 damla (yaklaşık 200 μL) toplanana kadar tekrarlayın.
- İçeriği döndürerek ve ters çevirerek hafifçe karıştırın, ancak mikrotainer kabını kapattıktan sonra.
- 3-4 kan damlası toplandıktan sonra, parmak ucuna bir pamuklu çubuk bastırın ve katılımcının hareketsiz oturmasını sağlayın. Kanamayı durdurmak için manuel basınç uygulayın.
- Lanseti derhal biyolojik atık imha yönergelerine göre atın.
2. Hematoloji analizörü kullanarak analizler
- Otomatik analizörün yazılımla yapılandırılması
- FileZilla Server bileşenlerini (127.0.0.1) dizüstü bilgisayara indirin ve yükleyin.
Not: Windows güvenlik duvarını veya üçüncü taraf güvenlik duvarlarını devre dışı bırakın. - Özel yazılımı dizüstü bilgisayara yükleyin ve Amerikan Test ve Malzeme Derneği (ASTM) dosya konumunun yolunu kopyalayın (C/programfiles x86/hedef klasör/ Web/wb/astmfiles)
- FileZilla sunucu uygulamasında, kullanıcı ve şifreyi oluşturun ve astm dosya konumunu eşleyin.
- Otomatik çözümleyici makinesinde aynı IP serisini yapılandırın (ana ayarlarda).
- Otomatik analizörde, astm senkronizasyon seçeneğini FTP olarak değiştirin ve dizüstü bilgisayarda yapılandırılan IP ve kimlik bilgilerini sağlayın (örneğin, 192.168.1.1 ve FileZilla kullanıcı adı ve şifresi yapılandırıldı).
- Otomatik analizörü yeniden başlatın ve hazır olduğunda dosya senkronizasyon işlemini test edin.
- FileZilla Server bileşenlerini (127.0.0.1) dizüstü bilgisayara indirin ve yükleyin.
- Otoanalizör kullanılarak kan örneklerinin analizi
- Hb ve diğer kırmızı hücre indekslerinin (ortalama korpüsküler hacim [MCV], ortalama korpüsküler hemoglobin [MCH], ortalama korpüsküler hemoglobin konsantrasyonu [MCHC] ve kırmızı hücre dağılım genişliği [RDW]) anında ölçümü vermek için POC ayarında kullanılabilmesi için tam otomatik ve taşınabilir bir hematoloji analizörü kullanın.
- Çözücü seviyelerini kontrol edin (Reaktifşişesinin en az 1/4'ü doldurulur) ve yeterli miktarda bulunup bulunmadıklarını onaylayın.
NOT: Çözücüler, enzimatik çözelti, lizing çözeltisi ve tamponlu izotonik çözeltiden oluşur (Malzeme Tablosu). - Makinedeki ON/OFF düğmesine tıklayarak cihazı açın. Cihazın bir folyo bükümlü çift (FTP) kablosuyla bir dizüstü bilgisayara bağlandığından emin olun.
- Dış sıcaklığın analize başlamak için uygun olup olmadığını anlamak için sıvı kristal ekran (LCD) ekranını kontrol edin. >35 °C sıcaklık tavsiye edilmez. Makineyi ortam sıcaklığının <35 °C olduğu bir ortama yerleştirin.
- Başlatma tamamlandığında, analizörün otomatik olarak bir başlatma döngüsü çalıştırmasına izin verin (otomatik başlatma işlevi varsayılan olarak etkindir).
- Başlatma döngüsünden sonra, referans boş sayım için cihaz ekranını kontrol edin. Boş referans sayılarının aşağıdaki parametre sınırlarını aşmadığından emin olun: Hb < 0,3 g/dL ve WBC < 0,3 x 103/mm3, RBC < 0,02 x 106/mm3; HCT %0 ve PLT < 10 x 103/mm3. Ardından, boş sonuçları doğrulamak için √ düğmesine basın.
- Başlatma aşaması tamamlandıktan sonra analizör otomatik olarak bir başlatma döngüsü çalıştırmazsa, döngüyü başlatmak için cihazın ön panelindeki START-UP tuşuna basın.
- Şimdi, analizör bir oturum açma sayfası gösterecektir. Önceden tanımlanmış kullanıcı adı ve şifreyi girin. Daha fazla ilerlemek için √ düğmesine basın.
- Numune analizinden önce, analizörün hassasiyetini kontrol etmek için üç kontrol seviyesi (düşük, normal ve yüksek) çalıştırın. Kumandayı 2-8 °C'de saklayın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına (RT) getirin. Kullanmadan önce kontrolleri birkaç kez hafifçe karıştırın.
NOT: Kontroller, üreticiden kullanıma hazır reaktifler olarak temin edilir ve olduğu gibi yüklenir. Şişeler 4 °C'de saklanır. Normal raf ömrü 15 gündür. Kontroller, Levey Jenning'in grafiği kullanılarak düzenli olarak izlenmelidir. Kontrol değeri 3 SD'nin üzerine veya altına düşerse, tedarikçi tarafından sağlanan yıkama solüsyonunu kullanarak konsantre bir temizlik yapın. - Kalite kontrol adımı başarıyla tamamlandıktan sonra numune analizine hazırlanın.
- Numune kabına yapışan barkodu, analizöre bağlı tarayıcı ile tarayın ve X işaretine basın.
- Deneğin cinsiyetini (erkek veya kadın) belirtin ve devam etmek için √ düğmesine basın.
- Araç, konunun ayrıntılarını bir kodla birlikte gösterecektir. Girilen bilgiler yanlışsa X tuşuna basın.
- Kan örneğini makineye yüklemeden önce, kan örneğini nazikçe ve iyice karıştırın.
- Kan dökülmesine izin vermemek için kapağı dikkatli bir şekilde çıkarın.
- Tüpü numune alma iğnesinin altına yerleştirin ve numune alma iğnesi kana girene kadar tüpü yukarı doğru hareket ettirin.
- Başlat anahtarına basın. Örnekleme iğnesi 10 μL kan aspire edecektir. Analiz döngüsü yaklaşık 60 saniye sürecektir. Döngünün sonunda, sonuç LED panelinde görüntülenecektir.
- Yazıcı simgesine tıklayarak sonuçları yazdırın.
- İkinci örneğe devam etmek için geri oka tıklayın.
- Analiz tamamlandıktan sonra laboratuvar test sonuçlarını yükleyin.
- Verileri çözümleyiciden sunucuya yükleyin.
- Sistemi minimum 20 mbps hız sağlayan herhangi bir İnternet servis sağlayıcısına bağlayın.
- Kurulumdan sonra masaüstünde görünen uygulama yazılımı simgesini açmak için simgeye çift tıklayın. Oturum açma sayfasında yetkili kimlik bilgilerini girin.
NOT: Uygulamanın ana sayfası, laboratuvar sonucu yükleme, barkod yazdırma QC raporları ve nihai hematoloji raporu için sekmelerden oluşur. Laboratuvar test sonucu yükleme sayfası, tamamlanan testleri gösterir. Dosya adı, makine kimliğinden ve .astm biçimindeki analiz tarihinden oluşur. - Sonuçları Yükle düğmesine tıklayın. Sonuçlar başarıyla yüklendikten sonra, sunucuda.astm dosyaları .csv formatına dönüştürülür ve dönüştürülen dosyalar hematoloji raporunda görünür. Kayıtlar için dosyaları .astm formatında indirin.
NOT: Sayfa, açılır dosyaların başarıyla yüklendiğini gösterecektir. Yinelenen dosyalar varsa, bunlar tanımlanacaktır. - ASTM dosyalarının yüklendiği katılımcılar için anemi durumu kararı ( Tablo 1 ve Tablo 2'ye göre) web uygulamasında bir rapor olarak oluşturulacaktır. Anemi ile ilgili kararı görüntülemek için web uygulamasına giriş yapın, Raporlar'a tıklayın ve ardından EDSS'ye tıklayın. Rapor, tüm katılımcılar için tablo olarak görünür.
- Bireysel test sonuçlarını ve anemi durumu ile tedavi rejimi hakkındaki kararları görüntülemek için, takip uygulamasına giriş yapın, kimliği veya adı kullanarak katılımcıyı arayın, EDSS düğmesine tıklayın ve sonuçları görüntüleyin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Yöntemin geçerliliğinin test edilmesi
Bu yöntemin geçerliliği, venöz kan otoanalizörü tabanlı yöntem olan altın standart ile karşılaştırılarak ortaya konmuştur. Doğrulama çalışması başka bir yerde ayrıntılı olarak açıklanmıştır8. Kısaca, görünüşte sağlıklı olan 748 gönüllü, aynı gün içinde art arda bir venöz örnek ve bir kılcal damar örneği verdi. Analizler POC'de gerçekleştirildi. Katılımcılar çok çeşitli Hb değerlerine sahipti ve anemisiz, hafif, orta ve şiddetli anemi durumu kategorilerine aitti. Yöntemin geçerliliğini belirlemek için ortalama farklar ve güven aralıkları hesaplandı. Farklı yöntemler arasındaki yanlılık ve uyum sınırları Bland -Altman analizi kullanılarak tahmin edilmiştir.
Ortalama Hb değerlerindeki fark, kapiller kan otoanalizörü yöntemi ve altın standart venöz kan otoanalizörü yöntemi için sırasıyla küçüktü (Tablo 3). İki yöntem arasında karşılaştırma için Bland-Altman grafiği Şekil 2'de sunulmuştur. Ortalama fark ve anlaşma sınırları 0.1 g/dL (-1.0 ila 0.8) idi.
Anemi olmadığı prevalans tahmini, iki yöntem arasında %2.2 puan farklılık gösterdi. Farklı anemi derecelerinin prevalans tahminleri de çok yakındı ve yöntemin altın standart yönteme göre geçerliliğini ortaya koydu (Tablo 3).
Entegre yazılım ve karar destek aracının test edilmesi
Entegre yöntem, Narapally, Ghatkesar, Buggabai köyünden 68 katılımcı arasında denendi. Karar destek aracı, algoritmaya dayalı olarak saha sağlık görevlisi tarafından manuel olarak doğrulanan bu katılımcıların anemi durumunu ve IFA dozlarını doğru bir şekilde sağlamıştır (Tablo 4).
Sonuçlar, entegre POC yönteminin geçerli olduğunu ve popülasyon düzeyinde anemi prevalansını tahmin etmek için kullanılabileceğini göstermektedir. Bugüne kadar, bu yöntem kullanılarak farklı anemi dereceleri için yaklaşık 16.539 karar verilmiştir.
Şekil 1: Örnek toplama ve otomatik analizör kurulumu. (A,B) Havuzlanmış bir kılcal numunenin alınması. (C) Bakım noktasında oto analizör kurulumu. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: Mülayim Altman grafiği. Grafik, geliştirilen (kılcal kan oto-analizör yöntemi) ile altın standart (venöz kan-oto-analizör yöntemi) arasındaki ortalama farkı ve anlaşma sınırlarını karşılaştırır. İki yöntem arasındaki ortalama fark -0.1 (%95 CI, -0.2; -0.1) idi. Bu şekil Dasi ve ark.8'in izniyle değiştirilmiştir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3: Karar destek aracı. Araç, anemi derecesini ve demir ve folik asit ile tedavi dozunu gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
| Nüfus | Kesme (g/dL) | Hafif ve orta derecede anemi | Şiddetli anemi |
| 6-59 aylık çocuklar | ≥11.0 | ≥7.0–<11.0 | <7.0 |
| 5-11 yaş | ≥11,5 | ≥8.0–<11.5 | <8.0 |
| 12–19 yaş (Kızlar) | ≥12 | ≥8.0–<12 | <8.0 |
| 12–14 yaş (Erkek) | ≥12 | ≥8.0–<12 | <8.0 |
| 15–19 yaş (Erkek) | ≥13 | ≥8.0–<13 | <8.0 |
| Erkekler | ≥13 | ≥8.0–<13 | <8.0 |
| NPNL ve emziren kadınlar | ≥12 | ≥8.0–<12 | <8.0 |
| Hamile | ≥11 | ≥7.0–<11.0 | <7.0 |
Tablo 1: Katılımcıları farklı anemi derecelerine derecelendirme kriterleri
| Nüfus | Günlük doz (terapötik doz) |
| 6-59 aylık çocuklar | 3 mg/kg vücut ağırlığı (20 mg demir ve 100 μg folik asit içeren demir şurubu) |
| 5-9 yıl | 45 mg demir + 400 μg folik asit/gün (Vücut ağırlığı 18,5 kg'dan kesilene kadar, Pembe tablet) |
| 60 mg demir + 500 μg folik asit / gün (>18,5 kg, mavi tablet) | |
| 10-11 yaş | 120 mg demir + 1 mg folik asit (Mavi tablet) |
| 12–19 yaş (Kızlar) | 120 mg demir + 1 mg folik asit (Mavi tablet) |
| 12–14 yaş (Erkek) | 120 mg demir + 1 mg folik asit (Mavi tablet) |
| 15–19 yaş (Erkek) | 120 mg demir + 1 mg folik asit (Mavi tablet) |
| Erkekler | 120 mg demir + 1 mg folik asit (Kırmızı tablet) |
| NPNL ve emziren kadınlar | 120 mg demir + 1 mg folik asit (Kırmızı tablet) |
| Hamile | 120 mg demir + 1 mg folik asit (Kırmızı tablet) |
Tablo 2: Tedavi protokolü. Dozaj vücut ağırlığına göre verilmelidir (vücut ağırlığı yaşa göre daha az ise). Şiddetli anemik katılımcılar yerel birinci basamak sağlık merkezine sevk edildi. Profilaktik dozlar için, günde 1 tabletin verildiği gebeler hariç, haftada 1 IFA tableti takip edildi. Çocuklar için bu iki haftada bir 1 mL idi. Tedavi 3 ay boyunca verildi.
| Yöntemler | Ortalama Hb (SD) g/dL | Anemi prevalansı (Genel) (%) | Anemi derecelerinin prevalansı (%) | ||
| Hafif | Ilımlı | Şiddetli | |||
| Kılcal kan oto analizörü yöntemi | 11.0 (2.1) | 34.9 | 19.7 | 36.4 | 9.1 |
| Venöz kan oto analizörü yöntemi | 10.9 (2.0) | 32.2 | 20.7 | 37 | 10 |
Tablo 3: Havuzlanmış kapiller kan ve otoanalizör yöntemi ile elde edilen Hb tahminleri ile venöz kan otoanalizörü yönteminin karşılaştırılması.
| Yaş grubu | N | Ortalama Hb | SD | Entegre sistem tarafından üretilen kararlar* | ||
| Hafif | Ilımlı | Anemik olmayan | ||||
| 6–59 m | 11 | 9.7 | 1.41 | 4 | 5 | 2 |
| 5-11 yaş | 9 | 11.4 | 1.59 | 2 | 2 | 5 |
| 12–14 yaş | 4 | 12.4 | 1.56 | 1 | 1 | 2 |
| NPNL (NPNL) | 28 | 11.7 | 1.29 | 8 | 6 | 14 |
| Erkekler | 16 | 14.7 | 1.34 | 0 | 3 | 13 |
| Toplam | 68 | 11.98 | 1.44 | 15 | 17 | 36 |
| *Otomatik kararlar bir saha sağlık görevlisi tarafından doğrulandı | ||||||
Tablo 4: Entegre sistem tarafından üretilen ortalama Hb değerleri ve kararlar.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu makale, havuzlanmış bir kılcal kan örneği ve bir oto-analizör kullanan bir bakım noktası yöntemini açıklamaktadır. Yöntem, analizörden gelen sonuçları otomatik olarak sunucuya yükleyebilen ve anemi hakkında kararlar üretebilen özel bir yazılımla entegre edildi. Ayrıca, Ulusal program2'nin protokolüne göre IFA'nın tedavi dozlarını sağlayabilir.
Özel yazılım, barkod yazdırmayı, hematoloji verilerini dışa aktarmayı ve verilerin görselleştirilmesini entegre etmek için tasarlanmıştır. Entegre bir geliştirme ortamı olarak PHP betik dili ve görsel stüdyo kodu ile PHP masaüstü kromu kullanan çevrimiçi PHP tabanlı bir masaüstü uygulaması kullanılarak tasarlanmıştır. Kullanıcı arayüzünü tasarlamak için HTML 5, CSS ve JavaScript kullanıldı. Web servisleri PHP betik dili kullanılarak geliştirilmiştir. Bir kullanıcı, bir barkod yazıcısı aracılığıyla bu masaüstü uygulamasını kullanarak birden fazla barkod yazdırabilir. Barkod verilerine erişmek ve otomatik analizöre göndermek için bir barkod tarayıcı kullanıldı. Veriler, SqlLite kullanılarak yerel olarak ve ortam olarak MySql workbench ile MySql veritabanı kullanılarak sunucuda depolandı. Hematoloji raporları PDF formatında da indirilebilir. Android uygulamasına Anemi Mukt Bharat kılavuzlarına12 dayalı ayrıntılı bir tedavi protokolü entegre edilmiştir (Tablo 1 ve Tablo 2)2. Bu modül, katılımcının yaşına, cinsiyetine, fizyolojik durumuna ve Hb düzeyine göre IFA dozunu (IFA tabletlerinin türü ve sayısı) hesapladı. Demir şurubuna ihtiyaç duyacak küçük çocuklar söz konusu olduğunda, doz (mililitre şurup cinsinden) çocuğun vücut ağırlığına göre hesaplanmıştır. Elektronik karar destek sistemi (EDSS) ekranının bileşenleri şunları içeriyordu: (i) katılımcının anemi durumu (anemi derecesi veya anemi yok), (ii) reçete edilen IFA paketinin görsel tasviri (45 mg'lık bir tablet için pembe, ergenler için 60 mg'lık bir tablet için mavi ve yetişkinler için 60 mg'lık bir tablet için kırmızı), (iii) doz (1 ay boyunca verilecek tablet sayısı), (iv) sıklık ve zamanlama (yemekten sonra günlük veya haftalık) (Şekil 3).
Hindistan'daki mevcut anemi programı sekiz yaş ve cinsiyet grubunu kapsamaktadır. Tedavi dozları, 5 tip profilaktik doz ve 7 tip tedavi dozu ile farklıdır. Bu nedenle, sınırlı eğitim ve becerilere sahip ön saflardaki sağlık çalışanlarının karar vermede hata yapma olasılığı vardır. Bu yazılımı kullanarak hatalar ortadan kaldırılabilir ve tedavi sunumu daha hızlı ve daha doğru olabilir. Bu nedenle, yazılım, ön saflarda çalışanların anemi kontrol programlarını nüfus düzeyinde kullanıma sunmaları için bir iş yardımı olma potansiyeline sahiptir. Önceki çalışmalar, ön saflardaki sağlık çalışanlarının veri toplama ve kayıt tutma için dijital teknolojileri başarıyla kullanabileceğini göstermiştir13. Elektronik bir iş yardımı almak, bu önemli birinci basamak toplum sağlığı irtibat personelinin algılanan öz kimliğini de geliştirecektir14.
Bu yöntemi kullanan temel analiz maliyeti, numune başına yaklaşık 75 INR idi ve neşter, mikrotainer ve reaktifleri içeriyordu. Bu yöntemde şimdiye kadar sistematik bir maliyet analizi yapılmamış olsa da, toplam maliyetin, numune analizi başına yaklaşık 104-177 INR'ye mal olan dijital hemoglobinometre gibi yaygın olarak kullanılan diğer PoC yöntemleriyle karşılaştırılabilir olacağına inanıyoruz15. Ek olarak, RBC indeksleri gibi belirteçlerin elde edilebildiği oto analizörün önemli avantajları göz önüne alındığında, oto analizör tabanlı yöntemin popülasyon tabanlı araştırmalarda kullanım için umut verici olduğu düşünülebilir.
Entegre yöntemin saha ayarlarında en iyi şekilde kullanılması için izlenmesi gereken birkaç kritik adım vardı. Kan örneği alınırken parmaklara basılmamasına dikkat edilmelidir. Bir diğer kritik adım ise numune karıştırmaydı. Toplamadan hemen sonra ve analizden önce, doğru sonuçlar elde etmek için numune uygun şekilde karıştırılmalıdır. Örnek yükleme sırasında, dizüstü bilgisayarda yüklü olan güvenlik duvarlarının kapatılması gerekiyordu. Sistem, analiz cihazını yaklaşık 4 saat boyunca sürdüren 1 KVA piller yardımıyla kullanım noktasında kullanıldı.
Yöntemin bir sınırlaması, sıcaklık hassasiyetiydi. Ortam sıcaklıkları 35 °C'nin üzerinde olduğunda, analizör klimalı bir araçta en iyi şekilde çalışır. Analiz edilen örnek veriler iki kez karşıya yüklendiyse, tüm dosyalar arka uçta kullanılabilir olsa bile sistem otomatik olarak en son yüklemeyi görüntüler. Karar destek aracı, karar vermede doğruydu. Ancak kullanımı için ön saflardaki sağlık çalışanlarının dijital okuryazar olması gerekiyordu. Yazılım iki dilli olduğundan, ön saflardaki sağlık çalışanının ekran dilini anlaması zor olmayacaktı. Ancak, yazılımın Telangana dışındaki eyaletler için ölçeklendirilmesi gerekiyorsa, yeni dilin dahil edilmesi gerekir.
Algoritma tabanlı bir karar destek aracı ve basitleştirilmiş bir görsel çıktı yardımıyla, ön saflardaki sağlık çalışanları anemileri tedavi edebilecek ve tedavi süresi boyunca takip edebilecektir. Entegre yöntem, ölçek büyütme potansiyeline sahiptir, tamamen açık kaynaklı platformlar kullanılarak tasarlanmıştır ve birlikte çalışabilir. Bu dijital araç, kaynakların kısıtlı olduğu ortamlarda aneminin azaltılması için 'tara ve tedavi et' müdahalelerinin yaygınlaştırılması için önemli bir ivme sağlayacaktır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Hiçbiri belirtilmedi.
Acknowledgments
Ekip, karar destek aracını ve yazılımı başarıyla geliştiren Bay J Suresh, Bay Medappa, Bayan Madhu ve tüm Kavintech Corporation, Bangalore ekibine teşekkür eder. Yazarlar ayrıca, Hindistan Tıbbi Araştırma Konseyi'ne, Hindistan Hükümeti'ne finansman için ve halk sağlığı ve aile refahı departmanına, Telangana'ya çalışmayı kolaylaştırdığı için teşekkür etmek istiyor.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ABX Miniclean | Horiba Ltd, Japan | 23-450-004 | Enzymatic solution |
| ABX Minidil LMG | Horiba Ltd, Japan | 23-450-008 | Buffered isotonic solution for RBC/PLT dilution, sleeving and cleaning |
| ABX Minilyse | Horiba Ltd, Japan | 23-450-006 | Hb measurement; lysing solution |
| ABX Minocal | Horiba Ltd, Japan | 2032002 | Calibrator |
| ABX Minoclair | Horiba Ltd, Japan | 23-450-003 | Cleaning reagent |
| ABX Minotrol 16 - 2H | Horiba Ltd, Japan | 2042209 | Blood control |
| ABX Minotrol 16 - 2L | Horiba Ltd, Japan | 2042208 | Blood control |
| ABX Minotrol 16 - 2N | Horiba Ltd, Japan | 2042202 | Blood control |
| Autoanalyzer | Horiba Ltd, Japan | ABX Micros ES 60 | The FTP port should be functional |
| Barcode printer | Technology service corporation, USA | TSC Model TE 244 | 400 Mhz 32 bit RISC processor with 16 MB SDRAM, 8 MB Flash memory |
| Barcode Scanner | Retsol | LS-450 | Any company which can provide a scanner with the following specifications: 32 bit CPU fast decode ability, IP 54 rated, Light source – visible laser diode 650 nm, Single scan pattern with scan rate of 100scans/second, Scan width of 200 mm & precision of 4 mil, Scan angle – YAW 65 Deg, Rotation 30 Deg & Pitch 55 Deg, Scan indication – buzzer, light indicator, Scan mode both manual & continue scanning |
| BD needles holder | Becton, Dickinson and company Ltd, Dublin, Ireland | 364879 | |
| Contact activated lancet | Becton, Dickinson and company Ltd, Dublin, Ireland | 366594, 366593 | For children below 1 year, venous blood sample has been collected. |
| Custom software | Kavin Corporation, Bangalore | N/A | |
| K2-EDTA Microtainer-5 mL | Becton, Dickinson and company Ltd, Dublin, Ireland | 363706 | EDTA tube for blood profile analysis with 1.0 mg K2 EDTA, dimensions 13 x 75 mm |
| Labels | G-Technologies, Secunderabad, telangana | N/A | |
| Laptop | Any | N/A | Intel Core I3-1005G1, 8GB DDR4, 1TB HDD, 15.6 FHD LED, WIN 11 HOME and MS OFFICE H&S |
References
- Abhiyan, P. Ministry of Women and Child Developmen. Press Information Bureau, Government of India. , Available from: https://pib.gov.in/Pressreleaseshare.aspx?PRID=1797687 (2020).
- Ministry of Health and Family Welfare Government of India. , New Delhi. Available from: https://main.mohfw.gov.in/ (2018).
- Neufeld, L. M., et al. Hemoglobin concentration and anemia diagnosis in venous and capillary blood: biological basis and policy implications. Annals of New York Academy of Sciences. 1450 (1), 172-189 (2019).
- Haggenmüller, V., et al. Smartphone-based point-of-care anemia screening in rural Bihar in India. Community Medicine (Lond). 3 (1), 38 (2023).
- Neogi, S. B., et al. Diagnostic accuracy of point-of-care devices for detection of anemia in community settings in India. BMC Health Service Research. 20 (1), 468 (2020).
- Sharma, S., Zapatero-Rodríguez, J., Estrela, P., O'Kennedy, R. Point-of-care diagnostics in low resource settings: Present status and future role of microfluidics. Biosensors (Basel). 5 (3), 577-601 (2015).
- Augustine, L. F., Dasi, T., Palika, R., Pullakhandam, R., Kulkarni, B. Point of care diagnosis of anemia using portable auto analyzer. Indian Pediatrics. 57 (6), 568-569 (2020).
- Dasi, T., et al. Hemoglobin measurement in capillary blood by a portable autoanalyzer for population level screening of anemia: validation in cross-sectional and longitudinal studies. British Journal of Nutrition. 128 (6), 1108-1117 (2022).
- Briggs, C., Kimber, S., Green, L. Where are we at with point-of-care testing in haematology. British J Haematology. 158 (6), 679-690 (2012).
- Krleza, J. L., Dorotic, A., Grzunov, A., Maradin, M. Capillary blood sampling: national recommendations on behalf of the Croatian Society of Medical Biochemistry and Laboratory Medicine. Biochemical Medicine (Zagreb). 25 (3), 335-358 (2015).
- World Health Organization. WHO Guidelines on Drawing Blood: Best Practices in Phlebotomy). World Health Organization. , (2010).
- World Health Organization. Iron Deficiency Anaemia. Assessment Prevention and Control. A Guide for Programme Managers. World Health Organization. , Available from: https://cdn.who.int/media/docs/default-source/2021-dha-docs/ida_assessment_prevention_control.pdf (2001).
- Zaidi, S., et al. Operability, usefulness, and task-technology fit of an mHealth app for delivering primary health care services by community health workers in underserved areas of Pakistan and Afghanistan: Qualitative study. Journal of Medical Internet Research. 22 (9), e18414 (2020).
- Meena, S., Rathore, M., Kumawat, P., Singh, A. Challenges faced by ASHAs during their field works: A cross sectional observational study in rural area of Jaipur, Rajasthan. International Journal of Medicine and Public Health. 10 (3), 97-99 (2020).
- Neogi, S. B., et al. Cost-effectiveness of point-of-care devices for detection of anemia in community settings in India. Clinical Epidemiology and Global Health. 14, 100995 (2022).
