Trapianto di tumore omotrapianto ortotopico: una tecnica per generare modelli murini di tumore pancreatico

- Durante il trapianto tumorale omotopico ortotopico, le cellule tumorali o i frammenti tumorali di un donatore canceroso vengono trapiantati in un ricevente appartenente alla stessa specie in un organo o sito che corrisponde all'istotipo tumorale. Inizia prendendo un topo donatore anestetizzato portatore di un tumore, contenente cellule di origine pancreatica. Sterilizzare l'area e prelevare chirurgicamente il tumore. Lavare il fazzoletto per rimuovere il sangue e tagliarlo in frammenti. Quindi, posizionare un topo ricevente anestetizzato in posizione laterale destra e sterilizzare la sua zona addominale. Esporre chirurgicamente la milza.

Successivamente, estrarre delicatamente una parte del pancreas da sotto la milza. Posizionare il frammento tumorale sul pancreas e suturarli insieme. Chiudi l'addome e lascia che il topo si riprenda in una gabbia. Monitorare quotidianamente il topo ricevente per osservare la crescita del tumore pancreatico ortotopico. Nel seguente protocollo, mostreremo il trapianto ortotopico di adenocarcinoma duttale pancreatico omotrapianto da un topo donatore nero 6 C57 nel pancreas di un topo ricevente nero 6 C57.

- Monitorare il peso corporeo dei topi C57 black 6 utilizzando una bilancia. Inoltre, monitorare il volume tumorale dei topi donatori portatori di tumore mediante misurazione a pinza. Dopo l'eutanasia dell'animale in un cappuccio a rischio biologico come da protocollo, sterilizzare la pelle intorno al tumore utilizzando tamponi di iodoforo. Dopo aver rimosso chirurgicamente il tumore come descritto nel protocollo di testo, posizionare il tumore in una capsula di Petri contenente 20 millilitri di PBS che è stata preraffreddata a quattro gradi Celsius. Se c'è sangue contaminante, trasferire il tumore in un'altra capsula di Petri e lavare il tumore con PBS.

Taglia il tumore a metà. Rimuovere la pelle, i vasi, le calcificazioni e/o la necrosi in eccesso. Scegli solo pezzi di tumore intatti e mettili in una provetta da centrifuga sterile da 50 millilitri. Aggiungere 20 millilitri di PBS prima di trasportare la provetta in una stanza separata per gli animali per gli studi farmacologici. Per prepararsi all'impianto ortotopico, fissare il topo completamente anestetizzato su una scheda sperimentale nella posizione laterale destra. Disinfettare la pelle intorno alla milza con iodio e poi deiodinare con alcol etilico al 75%.

Trova il punto medio della milza e fai un'incisione verticale di un centimetro sull'addome per esporre la milza. Estrarre delicatamente una parte del tessuto pancreatico sotto la milza utilizzando una pinzetta a punta piatta e suturare un pezzo di tumore omotrapianto di topo dal topo seme sul pancreas del topo ricevente mediante sutura chirurgica assorbibile 9-0. Chiudere l'addome con una sutura di seta 6-0 con doppia cucitura. Ottenere l'omeostasi mediante compressione.

Dopo aver terminato l'impianto del tumore, tenere gli animali in una gabbia calda finché non si verificano sanguinamenti o perdite di tessuto tumorale. Monitorare l'animale fino a quando non riacquista una coscienza sufficiente per mantenere la decubito sternale. Riporta l'animale nella stanza degli animali dopo il completo recupero dall'anestesia. Monitora i topi portatori di tumore palpando l'addome vicino alla milza e seleziona i topi portatori di tumori ortotopici.

• Orthotopic Homograft Transplantation - Procedure of transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient at a corresponding organ.
• Pancreatic Cancer Homograft Models - Scientific models used for studying pancreatic cancer by transplanting tumor homografts.
• Orthotopic - Refers to the transplantation of cells or tissues into their natural site of occurrence in the body.
• Tumor Homograft Models - Research models involving the transplantation of tumor tissues between same-species subjects.
• Mouse Cancer Models - Laboratory mice bred or genetically engineered for use in cancer research.

• Introduce Orthotopic Homograft Transplantation – This procedure involves transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient (e.g., mouse tumor).
• Key Concepts – Pancreatic Cancer Homograft Models allow us to study pancreas cancer progression (e.g., tumor mouse models).
• Underlying Mechanisms – Transplantation is done at matching organ site for accurate reflection of cancer progression.
• Connect to Experiment – The procedure mentioned is used to establish a mouse model for studying pancreatic cancer progress.

• Practical Applications – Allows for accurate representation of cancer progression enhancing research (e.g., tumor mouse model).
• Industry Impact – Impact on medical and biotechnological sectors (e.g., healthcare).
• Societal Importance – Enhances understanding of cancer which could lead to better treatments (e.g., health).
• Link to Scientific Advancements – Establishes a platform for scientific research and innovations in cancer treatment.