Generazione di ricostruzioni organotipiche della pelle completa: una procedura per stabilire un modello di pelle 3D utilizzando campioni di pelle umana

La pelle è costituita principalmente da uno strato epidermico superiore e da uno strato dermico inferiore. Le cellule epidermiche sono stratificate in più strati che vanno dalle cellule meno differenziate presenti alla base alle cellule altamente differenziate alla periferia. Per far crescere un tessuto cutaneo che imita gli aspetti morfologici e biochimici della pelle normale, possiamo stabilire un modello di pelle organotipica.

Per iniziare, prendi una piastra a più pozzetti con un inserto membranoso. Aggiungere all'inserto fibroblasti dermici mescolati con collagene. Incubare per facilitare la solidificazione della matrice di collagene per incorporare i fibroblasti e imitare il compartimento dermico della pelle.

Quindi, aggiungi una sospensione di cellule di cheratinociti sullo strato dermico. Incubare la piastra per consentire ai cheratinociti di aderire al compartimento dermico. Integrare la coltura con un terreno di epidermlizzazione per avviare la proliferazione dei cheratinociti e la formazione di uno strato epidermico.

Infine, trasferire gli inserti su una piastra multipozzetto nuova. Aggiungere un mezzo di stratificazione tale da coprire solo la base del costrutto, creand