Editing genico mediato da morfolino: una tecnica di knockdown genico che utilizza oligonucleotidi morfolini bloccanti traduzionali in uova di pesci delle caverne unicellulari

Il giorno dell'iniezione, utilizzare una pipetta di vetro per trasferire gli ovuli unicellulari nella piastra di iniezione, riempiendo fino a cinque file della piastra di iniezione con 30-40 uova per fila. Mantieni le uova idratate con una piccola quantità di acqua del sistema dei pesci. Scongelare il morfolino con ghiaccio e preparare la soluzione iniettabile in modo da iniettare 400 picogrammi di morfolino per uovo, utilizzando una punta lunga della pipetta Microloader o aggiungendo un bolo da 2 a 4 microlitri alla fine.

Quando tutti gli aghi sono stati caricati, utilizzare una pinza per tagliare la lunghezza in eccesso dalle punte dell'ago per iniezione e montare il primo ago in un micromanipolatore collegato a un microiniettore picolitro. Quindi, posizionare la piastra di iniezione sotto un microscopio da dissezione e utilizzare il micromanipolatore per penetrare ogni uovo con l'ago, prima di iniettare 1 nanolitro di soluzione per iniezione di morfolino direttamente nel tuorlo.