Ottenere cellule di cancro ovarico primario da campioni solidi: un metodo per coltivare cellule di cancro ovarico epiteliale da campioni di tumore ovarico

Le cellule epiteliali presenti sulla superficie esterna dell'ovaio possono subire una trasformazione maligna in cellule cancerose che possono crescere in tumori ovarici.

Per isolare queste cellule epiteliali di cancro ovarico o EOC, inizia prendendo un campione di tumore ovarico e tritalo in piccoli pezzi. Trasferire i pezzi tritati in una provetta contenente un tampone di digestione integrato con l'enzima proteasi desiderato.

Queste proteasi degradano le proteine della matrice extracellulare all'interno del tessuto, rilasciando in sospensione cellule EOC, eritrociti e alcuni fibroblasti dissociati.

Filtrare l'impasto cellulare attraverso un colino per separare le singole cellule sospese dai pezzi di tessuto non dissociati. Centrifugare la sospensione per pellettizzare le cellule EOC, gli eritrociti e i fibroblasti. Eliminare il surnatante contenente enzima.

Risospendere il pellet cellulare in un terreno di crescita epiteliale e trasferirlo in un piatto di coltura. Incubare la coltura per consentire alle cellule EOC e ai fibroblasti di attaccarsi alla base della piastra mentre gli eritrociti galleggiano nel terreno.

Rimuovere gli eritrociti sospesi rinfrescando il terreno. Nel temp