Name: Titolo Incapsulamento cella di goccioline (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T13:09:54.000+00:00
Duration: 13 min 10 s
Description: Scopri l'incapsulamento cellulare per la biostampa 3D utilizzando valvole solenoidi e gel specifici. Questo metodo consente di creare strutture cellulari complesse per applicazioni in ingegneria tissutale.

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NIH3T3 cellule preparazione: Le cellule A. espulsione <ol><li> Trypsinize cellule, poi diluire 1:1 con mezzi di comunicazione cellulare, e il trasferimento da un pallone T75 ad un tubo da 15 ml Falcon </li><li> Spin le cellule in una pallina da centrifugazione, aspirare il surnatante e lavare le cellule con DPBS </li><li> Spin le cellule in una pallina di nuovo e aspirare il surnatante </li><li> Risospendere le cellule in mezzi di comunicazione </li><li> Determinare la densità delle cellule con emocitometro (~ 200 x 10 4 cellule / ml per T75 fiasco) </li><li> Cellula soluzione centrifuga, aspirare il surnatante e risospendere in giusta quantità di supporti per la variazione delle concentrazioni di cellule </li></ol> B. cella di espulsione <ol><li> Cellule vortice prima di utilizzare per l&#39;espulsione </li><li> Trasferire 200 ul di soluzione di cella in siringa </li><li> Impostare la modalità appropriata sul generatore di impulsi <ol><li> Per espellere gocce singole e multiple gocce (treni), insieme al generatore di impulsi &quot;E. BUR&quot; modalità </li><li> Per l&#39;espulsione delle gocce continuo, generatore di impulsi impostato in modalità &quot;NORM&quot; </li></ol></li><li> Modificare le impostazioni del segnale <ol><li> Impostare il livello alto e basso livello di tensione di uscita: HIL a 5 V e LOL a 0 V e assicurarsi che il &quot;LIM&quot; LED è acceso </li><li> Impostare il segnale come un impulso quadrato </li><li> Modificare la quantità di tempo la valvola solenoide è aperta per l&#39;espulsione delle gocce, modificando il valore di &quot;WID&quot; o cambiando duty cycle (&quot;dovere&quot;) </li><li> Modificare la frequenza di espulsione, modificando il valore di &quot;PER&quot; </li><li> Modificare il numero di goccioline espulse in uno scoppio, modificando il valore di &quot;BUR&quot; </li></ol></li><li> Cellula soluzione di espulsione su substrato preparato per l&#39;imaging con microscopio </li></ol> C. colorazione <ol><li> Portare soluzione colorante con 0,5 microlitri calceina-AM e 2 omodimero microlitri di etidio per ml di DPBS </li><li> Immergere substrato preparato in soluzione colorante </li><li> Lasciare campione ad incubare per 10 minuti a 37 ° C prima di imaging </li></ol> Esperimento di convalida <ol><li> Su una Nikon Eclipse TE-2000 Microscopio U fluorescente <ol><li> Spot software avanzato (Diagnostics, Inc.) </li><li> Live / Dead Assay </li></ol></li></ol>

Gli autori non hanno nulla da dichiarare.

<table><tbody><tr><td>Microscopio a fluorescenza</td><td></td><td>Nikon Instruments</td><td>Eclipse TE-2000 U</td><td></td></tr><tr><td>Eiettore di cellule a valvola solenoide</td><td></td><td></td><td></td><td>Frequenza di funzionamento: 1 kHz, 30 psi, 50 nl~0,5 µl. Alimentatore per valvola a 12 V: corrente di pilotaggio 2,5 A</td></tr><tr><td>Serbatoio d'aria portatile da 5 galloni</td><td></td><td>Coleman</td><td>Powermate CT5</td><td>Aria compressa: 30 psi</td></tr><tr><td>Regolatori di pressione</td><td></td><td>Marsh Bellofram</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Generatore di impulsi</td><td></td><td></td><td>HP8112A</td><td>Generazione della frequenza di attuazione: 50 MHz</td></tr><tr><td>Stadio XYZ</td><td></td><td>Newmark Systems</td><td></td><td>Con motore passo-passo: stadio xy con corsa di 6 pollici (NLS4-6-25), stadio z con corsa di 2,5 pollici (NLS4-2.5-25), controllore a 3 assi (NSC-G3), risoluzione 0,1 µm</td></tr><tr><td>NIH 3T3</td><td>Linea cellulare</td><td></td><td></td><td>fibroblasti</td></tr><tr><td>Tripsina</td><td></td><td></td><td></td><td>Soluzione allo 0,05%</td></tr><tr><td>Mezzo per cellule NIH 3T3</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Tampone</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>T75</td><td></td><td></td><td></td><td>Flaconi per coltura cellulare</td></tr><tr><td>Tubi conici in plastica</td><td></td><td></td><td></td><td>15 ml, per coltura cellulare</td></tr></tbody></table>

titolo incapsulamento cella di goccioline

Title Cell Encapsulation by Droplets

Titolo Incapsulamento cella di goccioline

Il mio nome è Hang Moon. Sto lavorando con il professore dei preservativi. Lui e io lavoriamo con la piattaforma XYJ per creare una struttura tridimensionale della cellula.Ciao, sono PE e Lynn e stiamo lavorando al progetto di stampa cellulare con incapsulamento cellulare e mezzi e gel. Questo è un solenoide per l'eiezione di una cellula e di una miscela cellulare di aros sul mezzo cellulare. La valvola solenoide viene attivata da due linee di segnale.Il cavo del segnale proviene da una scheda secca qui. Il segnale proviene da qui. Quel cavo attraverso quel collegamento, quello è il generatore di funzioni principale.Quindi, in primo luogo, viene generato tramite il nostro metodo programmato. Quindi, se si desidera modificare il flusso, è possibile modificare il programma con la riga di interruttori oppure controllare quel generatore di processo tramite computer. La valvola cellulare si apre e si chiude in risposta a un segnale elettrico, ma la cellula viene alimentata attraverso quella linea.La cella e il mezzo o il gel di agarosio vengono forniti attraverso siringhe. Le siringhe all'interno dell'acqua, all'interno della siringa, sono sottoposte a pressione leggera causata dall'ari

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Vi presentiamo i protocolli per le 3 dimensioni (3D) incapsulamento delle celle all'interno di idrogel sintetico. La procedura di incapsulamento viene delineato per due metodi comunemente usati di reticolazione (michael-tipo di addizione e di luce iniziata meccanismi di radicali liberi), come pure una serie di tecniche per la valutazione del comportamento delle cellule incapsulate.

Incapsulamento cellulare in idrogel 3D per l&#39;ingegneria tissutale

Combinando goccia generazione monodisperse con ordinamento inerziale di cellule e particelle, si descrive un metodo per incapsulare un numero desiderato di celle o particelle in una singola goccia a tassi kHz. Abbiamo dimostrato efficienze due volte superiori a quelli di incapsulamento non ordinate per raccogliere le gocce singola e doppia-particelle.

High Throughput singola cellula e cellula Multiple-Micro-incapsulamento

Questo video mostra una tecnica per l'immunocolorazione delle cellule incapsulate in un idrogel 3D. La coltura di idrogel contenente cellule progenitrici neurali viene fissata, permeabilizzata e trattata con una soluzione bloccante per prevenire l'immunocolorazione non specifica. Viene aggiunto un cocktail di anticorpi primari per legare proteine specifiche, seguito da anticorpi secondari marcati in fluorescenza e da una colorazione nucleare. Il campione viene quindi montato su un vetrino e...

Immunocolorazione di cellule incapsulate in un sistema di idrogel 3D

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L&#39;incapsulamento delle cellule dei mammiferi nei branelli di Alginate usando un vaso semplice mescolato

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Metodo basato su un puntale per semina cellule a goccia microfluidici piattaforme

Presentato qui è un protocollo per l'uso dell'alginato come polimero nel microincapsulamento di cellule immortalate per la consegna a lungo termine di biologici agli occhi dei roditori.

Tecnologia a cellule incapsulate per la consegna dei biologici all'occhio del mouse

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Scopri l'incapsulamento cellulare per la biostampa 3D utilizzando valvole solenoidi e gel specifici. Questo metodo consente di creare strutture cellulari complesse per applicazioni in ingegneria tissutale.

Titolo Incapsulamento cella di goccioline

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