Titolo Incapsulamento cella di goccioline

Il mio nome è Hang Moon. Sto lavorando con il professore di preservativi. Lui ed io lavoriamo con lo stadio XYJ per creare una struttura 3D della cellula.

Ciao, sono PE e Lynn e sto lavorando al progetto di stampa cellulare con incapsulamento cellulare e terreni e gel. Questo è il solenoide per l'espulsione di una cellula e di una miscela cellulare di aros su mezzi cellulari. La valvola so è attivata da due linee di segnale.

La linea del segnale proviene da una tavola asciutta qui. Il segnale è arrivato da qui. Quella linea che passa attraverso quella linea, quella è la funzione prima generatore.

Quindi, per prima cosa viene generato dal nostro modo programmato. Quindi, se vuoi, vuoi cambiare la borsa, puoi cambiare il programma con la linea che cambia o puoi controllare quel generatore di processi al computer. La valvola cellulare è aperta e chiusa dal segnale elettrico, ma la cella viene alimentata attraverso quella linea.

La cellula e il terreno o agro gel vengono forniti attraverso le siringhe siringa. Le siringhe all'interno dell'acqua, all'interno della siringa è la luce della pressa dall'aria. L'aria pressurizzata viene fornita da un serbatoio come in questo caso la linea.

Quindi la piccola linea e l'aria izzata volano attraverso il filtro dell'aria. Il filtro dell'aria discrimina la polvere e altri tipi di sporco. Questo è il generatore di pressione lo chiamiamo, sta generando il segnale utilizzato per aprire la campana dell'aria solare o chiuso il computer della valvola dell'aria solare è collegato tramite il connettore P-I-B-U-S-V.

Quindi possiamo utilizzare la porta USB direttamente dal nostro computer, il computer portatile. Quella è collegata a quel lato qui. E poi possiamo controllare attraverso il laptop di controllo qui.

Quindi, se vogliamo sincronizzare il movimento del palco e l'apertura della campana può essere controllata dallo stesso controller di un laptop. In questo modo possiamo controllare i tempi quando si apre, quando si chiude, quando si muove e quando si ferma. E possiamo sincronizzare il movimento e la campana di apertura.

Questo stadio è lo stadio motorizzato. Viene spostato automaticamente attraverso la linea del segnale di morte e il motore. Quindi la motorizzazione è di 0,1 micrometri.

Quindi può idealmente tracciare la linea fino a 100 millimetri. Quindi l'asse del getto si muove, va su e giù in questo modo. Quindi controlla il tappo tra il substrato e la cintura solare.

Quindi può controllare l'altezza di espulsione. Quel substrato è collegato agli stadi XY qui, X qui e Y là. Quindi si sta muovendo intorno a un piano XY.

Quindi disegna alcune fasi di prova delle funzionalità è tre Xs, X, Y e G.So l'asse del getto con o l'asse XY è controllato dal segnale qui. Quindi la linea del segnale è collegata al controller di movimento qui. Quel controller di movimento non ha alcun interruttore manuale perché non può essere controllato manualmente.

È controllato tramite il computer portatile. Quindi il computer portatile è collegato. Sul retro del controller, abbiamo tre x per una cella di stampa XY jet.

Quindi produce tre diversi tipi di segnale in modo indipendente. E poi il controller di movimento comunica attraverso i connettori rf 2, 3, 2 è collegato direttamente all'USV. E poi l'USV è collegato al computer portatile.

Quindi il mutuatario controllato dal computer portatile. Usiamo il programma AutoCAD, creiamo un percorso gen A in questo modo bam. E poi si passa al linguaggio macchina in questo modo.

Quindi il linguaggio macchina viene trasferito al carattere semplice e ai numeri così. C'è ogni posizione relativa alle fasi X, Y, Z qui scelgo il file, contengo quel tipo di programma e poi apro il programma di download in questo modo. E poi scelgo da un file come fa esattamente lo stesso, il file di testo.

Viene scaricato solo il file di testo, scegliere il file di testo e scaricarlo automaticamente dal computer portatile al controller di movimento com executive e quindi il carattere BAM come ho detto prima, BAM. In questo pallone sono presenti N IH 3G tre celle di fibra di topo. E per prima cosa aspirerò i vecchi media.

Questo processo consiste nel far passare le celle e le cellule vengono fatte aderire al fondo del pallone. Quindi, dopo aver aspirato il terreno, inserirò sei RYS in cui è un enzima. Ok? Quindi, dopo che la tripsina è stata messa nel pallone, dobbiamo attendere da tre a cinque minuti affinché le cellule si stacchino dal fondo del pallone.

Ora siamo pronti per inserire il terreno e far passare le celle in una provetta da centrifuga. È una diluizione uno a uno. Quindi sto mettendo sei milioni di questo supporto proprio qui e laverò un po' le seghe per assicurarmi che siano tutte passate.

E ora le celle sono pronte per essere centrifugate in questa provetta. Ora centrifugheremo queste celle a mille giri/min, da tre a cinque minuti. Ora che le cellule sono state trasformate in una pallina, aspirerò il surnatante.

Ora laverò le cellule con il PBS. E questo è per, questo è per colorare le cellule. I coloranti che stiamo utilizzando sono substrati di esterasi.

Ok, ora centrifughiamo di nuovo e facciamo girare le cellule in un palato. Aspirerò il PBS e resinerò le cellule. Sono nei media per essere contato.

Sto mescolando le cellule in modo che quando ne preleviamo un campione, la concentrazione sarà uniforme in tutta la provetta. Ora prenderò un centinaio di microlitri di cellule per misurare la densità cellulare. Ora sto mettendo un centinaio di microlitri di carattere e blu, che è una macchia.

Aspetteremo dai tre ai cinque minuti affinché la macchia permei le membrane delle cellule morte. Quando contiamo le cellule, quelle blu non le contiamo. Le cellule sono pronte per essere contate con l'emocitometro, trasferirò 50 microlitri della miscela cellulare su ciascun lato dell'emocitometro.

Ok, lo coprirò con un lato scorrevole di vetro. Ci sono due lati dell'emocitometro. Conterò il primo lato e dopo aver contato entrambi i lati, prenderò la media e poi moltiplicherò per due perché abbiamo avuto una diluizione uno a uno con il tipo in blu.

Quindi, in pratica, la nostra densità cellulare sarà 135 volte 10 per quattro cellule per mil. Per il nostro esperimento, utilizzeremo una soluzione cellulare con una concentrazione di mezzo milione di cellule per mil. E così, dato che abbiamo 13,5 milioni di cellule, sospenderò nuovamente le cellule in 27 milioni di terreni.

Stiamo utilizzando due diversi tipi di macchie. Questo è un saggio di morte viva da sonde molecolari. La nostra prima macchia si chiama calcium am.

Il nostro secondo colorante è chiamato omodimero AUM. Colora le cellule morte. Usiamo l'eccitazione blu per ottenere la fluorescenza verde e l'eccitazione verde per ottenere la fluorescenza rossa Per queste due colorazioni, quando stiamo visualizzando l'imaging, la nostra soluzione di dadi sarà preparata in PBS.

Quindi, per prima cosa, trasferirò cinque mil di PBS in una provetta di soluzione salina tamponata con fosfato. Questa è una soluzione salina. Ora aggiungerò mezzo microlitro di calcio am per mil.

Ora sto aggiungendo 2,5 microlitri di calcio am al tubo e due microlitri di athe omodimero per mil di PBS. Ecco la macchina btex. Rende la cellula e il terreno ben distribuiti in tutto il volume.

Ora carichiamo la cella da 200 microlitri sul sette qui. E poi mettiamo il tappo, questo è un ermetico ermetico, in questo modo qui apro la valvola e poi entra la pressione dell'aria leggera e poi regolo la cinghia in questo modo. E poi cambia la pressione.

Quindi mi adeguo. La pressione è di cinque PSI. La pressione all'interno del tubo è di cinque PSI.

Da qui a qui, si collegava attraverso questo all'interno del foro. Quindi apriamo la campana qui e poi la cella iniettata con la pressione di cinque PSI e poi inizia ad aprirsi. E poi la valvola Sona che inizia a funzionare.

E poi arrotoliamo il substrato. Il substrato è solo un semplice vetrino scorrevole. E poi carichiamo la parte corretta e metto del nastro adesivo per fissare il substrato in quel modo, giusto?

E semplicemente lo aggiusto e basta. Quindi stiamo impostando l'intera cosa la cella e la valvola e il substrato durante lo spostamento del lavoro ary, iniziano a lavorare. Quindi siamo impostati tutto e poi aprire l'avvio della valvola ary.

E poi spostiamo il palco in questo modo, giusto? E poi facciamo un po' di pattern sul substrato, pattern sul substrato e bam character. Immergerò queste goccioline che abbiamo stampato in questa soluzione colorante che abbiamo fatto in precedenza.

E ora le goccioline saranno incubate per 10 minuti e poi sottoposte a ripresa. Per prima cosa regolerò l'immagine attraverso l'oculare. La nostra prima immagine è solo un'immagine in campo chiaro.

Spengo la luce e cambio il filtro in modo da avere un'eccitazione blu, che mostrerà una fluorescenza verde. E la terza immagine che scatteremo sono le cellule morte, che è la colorazione di Thm Homodimer. E con la luce verde, otterremo la fluorescenza rossa.