Name: A Novel vertebrale metodo di stabilizzazione per la produzione di Contusivi Cord Injury spinale (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-01-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 24 s
Description: Impara un metodo per generare lesioni spinali contusive riproducibili nei ratti adulti utilizzando uno stabilizzatore vertebrale innovativo. Questa tecnica minimizza la variabilità sperimentale e migliora la consistenza dei modelli di lesione del midollo spinale.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Questo lavoro è stato sostenuto dal National Institutes of Health [NS36350, NS52290, e NS50243 a X-MX]; Mari Hulman George Endowment Fund; lo Stato dell&#39;Indiana; e Ruth L. Kirschstein Servizio Nazionale Research Award (NRSA) 1F31NS071863 a CLW

1. L&#39;esposizione della cervicale spinale Lamine <ol><li> Pulire la superficie chirurgica con il 70% di etanolo, pre-riscaldato con una piastra elettrica. Coprire la superficie con un telo chirurgico sterile prima di garza sterile, tamponi di cotone, e strumenti chirurgici autoclavato nell&#39;area chirurgia. Utilizzare uno sterilizzatore microperla per inter-chirurgia sterilizzazione di strumenti chirurgici. </li><li> Anestetizzare ratto con ketamina (87,7 mg / kg) / xilazina (12,3 mg / kg) per via intraperitoneale (IP). Il corretto piano di anestesia è raggiunto quando l&#39;animale cessa di rispondere ad uno stimolo pinch punta. Sottocutanea iniettare 0,01-0,05 mg / kg buprenorfina e 5 mg / kg Carprofen prima procedura chirurgica. La buprenorfina deve quindi essere somministrato ogni 8-12 ore e Carprofen una volta al giorno, per i primi 4-7 giorni dopo l&#39;intervento. </li><li> Applicare una pomata protettiva per gli occhi dell&#39;animale contro l&#39;essiccamento della cornea durante un intervento chirurgico. </li><li> Radere l&#39;area chirurgica sulla dorsalesuperficie ratto dalla regione mediotoracico alla parte posteriore della testa con tagliaunghie. Rimuovere pelliccia rasata utilizzando un vuoto equipaggiato con un filtro HEPA. </li><li> Applicare soluzione betadine alla zona rasata come una macchia chirurgico poi pulire la zona con il 70% cotone imbevuto di alcol isopropilico. </li><li> Utilizzare un bisturi per eseguire 3-4 cm incisione mediana nella pelle dalla base della testa caudalmente a metà torace. </li><li> Identificare la linea mediana della fascia e muscoli sottocutanei anteriori alla ghiandola letargo al collo inferiore; tagliare il trapezio e altri muscoli lungo la linea mediana per ridurre l&#39;emorragia. </li><li> Trovare la linea mediana di due regioni di tessuto adiposo sottostante i muscoli; tagliare muscoli paraspinali caudalmente strettamente lungo la linea mediana, e strati muscolari separati usando un piccolo divaricatore tissutale finché il livello del processo spinoso toracico T2 è raggiunto. </li><li> Identificare e tagliare il muscolo collegato al processo spinoso T2 utilizzare thiStruttura s come un punto di riferimento anatomica. </li><li> Rimuovere la punta cartilaginea del processo spinoso T2 per migliorare la visibilità delle vertebre cervicali. </li><li> Separare i muscoli paravertebrali lateralmente dai processi spinosi e lamine di C4-T1; Tuttavia, risparmiare il muscolo copre sulla lamina C3 per impedire il sanguinamento. </li><li> Tagliare i muscoli sopra lamine da C4-T1 lateralmente verso le sfaccettature sui due lati della colonna vertebrale. </li><li> Dopo le lamine vertebrale sono esposti, posizionare l&#39;animale sulla sua superficie ventrale nel canale a forma di U dello stabilizzatore. </li><li> Identificare la vertebra C5 contando i processi spinosi rostralmente dal punto di riferimento T2 a T1, C7, C6, e, infine, C5. </li></ol> 2. Stabilizzazione Le vertebre e Esecuzione Injury Impact <ol><li> Posizionare i due bracci in acciaio inox di stabilizzatore di sospendere l&#39;animale posizionando i bordi dentellati delle braccia sotto il lateral sfaccettature del C5-6 vertebre (Figura 1C). Dopo aver fissato i bracci con vertebre in posizione (figura 2B), regolare il dispositivo di stabilizzazione per garantire la colonna vertebrale è piana e centrata. Infine, bloccare le braccia stringendo le viti dello stabilizzatore. </li><li> Tagliare i legamenti tra i processi spinali e lamine a C4-5 e C5-6 identificare il margine della lamina C5. </li><li> Utilizzando un micro-rongeur, agganciare distanza metà della lamina sulla destra al C5 come previsto per SCI (Figura 5C-E). Dopo laminectomia, trasportare l&#39;animale con lo stabilizzatore sotto il dispositivo di lesioni. Fissare l&#39;animale con stabilizzante su un supporto (Figura 3A-C) per allineare con precisione lo stantuffo sul bersaglio midollo spinale usando un micro-manipolatore laterale (Figura 3). </li><li> In alto ingrandimento, individuare le zone di ingresso delle radici dorsali C5 e C6 (DREZs) sulla superficie midollo spinale dorsale esposta senza durotomy. Mirare il pistone al centro dei due DREZs individuati e metà strada tra la linea mediana e il bordo laterale del midollo spinale (Figura 5B). </li><li> Uso di un dispositivo di simulazione NYU / Mascis con una punta diametro di 2,5 mm (Figura 3A e B), produrre un emi-C5 contusione (Figura 5B e E) da una altezza di caduta 10 g stelo x 12.5 mm (Figura 2A). </li><li> Verificare il danno visivamente lividi sul midollo spinale (Fig. 5E, freccia) e controllare i parametri di pregiudizio forniti dal software NYU 12,17 (Figura 6). </li><li> Muscoli di sutura e dei tessuti molli con sterile 4-0 Vicryl sutura, quindi chiudere l&#39;incisione cutanea con graffette chirurgiche (Clips EZ). </li><li> Applicare una pomata antibatterica al sito chirurgico. </li><li> Somministrare 5,0 ml di sterile allo 0,9% per via sottocutanea salina per l&#39;animale per l&#39;idratazione. </li><li> Posto l&#39;animale in un caloreambiente controllata al (ricircolo padcage acqua calda su una piastra elettrica)) con il cibo umido previsto sulla biancheria (cambiati ogni giorno), e una bottiglia di acqua con un lungo beccuccio per un facile accesso posto sul pavimento della gabbia. Fornire assistenza per garantire un adeguato recupero prima di tornare l&#39;animale alla gabbia di casa. </li><li> Poiché si tratta di una unilaterale cervicale lesioni contusivo, l&#39;animale probabilmente perde la funzione dell&#39;arto anteriore ipsilaterale, transitoriamente, che inizia a recuperare nel corso delle prime settimane dopo la lesione. Tuttavia, la funzione controlaterale dovrebbe rimanere intatto, così l&#39;animale deve essere in grado di mangiare e bere senza valore, e solo di valore minore in locomozione e governare. </li></ol>

<ol><li>Noyes, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electromechanical+impactor+for+producing+experimental+spinal+cord+injury+in+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Biol.+Eng.+Comput%22%5BJournal%5D)">Electromechanical impactor for producing experimental spinal cord injury in animals.</a> Med. Biol. Eng. Comput. 25 (3), 335-340 (1987).</li>
<li>Behrmann, D. L., Bresnahan, J. C., Beattie, M. S., Shah, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+injury+produced+by+consistent+mechanical+displacement+of+the+cord+in+rats%3A+behavioral+and+histologic+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Spinal cord injury produced by consistent mechanical displacement of the cord in rats: behavioral and histologic analysis.</a> J. Neurotrauma. 9 (3), 197-217 (1992).</li>
<li>Stokes, B. T., Noyes, D. H., Behrmann, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+electromechanical+spinal+injury+technique+with+dynamic+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">An electromechanical spinal injury technique with dynamic sensitivity.</a> J. Neurotrauma. 9 (3), 187-195 (1992).</li>
<li>Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C., Anderson, D. K., Faden, A. I., Gruner, J. A., Holford, T. R., Hsu, C. Y., Noble, L. J., Nockels, R., Perot, P. L., Salzman, S. K., Young, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MASCIS+evaluation+of+open+field+locomotor+scores%3A+effects+of+experience+and+teamwork+on+reliability.+Multicenter+Animal+Spinal+Cord+Injury+Study%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">MASCIS evaluation of open field locomotor scores: effects of experience and teamwork on reliability. Multicenter Animal Spinal Cord Injury Study.</a> J. Neurotrauma. 13 (7), 343-359 (1996).</li>
<li>Jakeman, L. B., Guan, Z., Wei, P., Ponnappan, R., Dzwonczyk, R., Popovich, P. G., Stokes, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+spinal+cord+injury+produced+by+controlled+contusion+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Traumatic spinal cord injury produced by controlled contusion in mouse.</a> J. Neurotrauma. 17 (4), 299-319 (2000).</li>
<li>Young, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+contusion+models%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Spinal cord contusion models.</a> Prog. Brain Res. 137, 231-255 (2002).</li>
<li>Ghasemlou, N., Kerr, B. J., David, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+displacement+and+impact+force+are+important+contributors+to+outcome+after+spinal+cord+contusion+injury.+Exp.+Neurol%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Tissue displacement and impact force are important contributors to outcome after spinal cord contusion injury. Exp. Neurol.</a> 196 (1), 9-17 (2005).</li>
<li>DeVivo, M. J., Chen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+in+new+injuries%2C+prevalent+cases%2C+and+aging+with+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Phys.+Med.+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Trends in new injuries, prevalent cases, and aging with spinal cord injury.</a> Arch. Phys. Med. Rehabil. 92 (3), 332-338 (2011).</li>
<li>Onifer, S. M., Rodríguez, J. F., Santiago, D. I., Benitez, J. C., Kim, D. T., Brunschwig, J. P., Pacheco, J. T., Perrone, J. V., Llorente, O., Hesse, D. H., Martinez-Arizala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+spinal+cord+injury+in+the+adult+rat%3A+assessment+of+forelimb+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Restor+Neurol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cervical spinal cord injury in the adult rat: assessment of forelimb dysfunction.</a> Restor Neurol Neurosci. 11 (4), 211-223 (1997).</li>
<li>Schrimsher, G. W., Reier, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forelimb+motor+performance+following+cervical+spinal+cord+contusion+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Forelimb motor performance following cervical spinal cord contusion injury in the rat.</a> Exp. Neurol. 117 (3), 287-298 (1992).</li>
<li>Soblosky, J. S., Song, J. H., Dinh, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graded+unilateral+cervical+spinal+cord+injury+in+the+rat%3A+evaluation+of+forelimb+recovery+and+histological+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Graded unilateral cervical spinal cord injury in the rat: evaluation of forelimb recovery and histological effects.</a> Behav. Brain Res. 119 (1), 1-13 (2001).</li>
<li>Pearse, D. D., Lo, T. P. Jr, Cho, K. S., Lynch, M. P., Garg, M. S., Marcillo, A. E., Sanchez, A. R., Cruz, Y., Dietrich, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathological+and+behavioral+characterization+of+a+novel+cervical+spinal+cord+displacement+contusion+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Histopathological and behavioral characterization of a novel cervical spinal cord displacement contusion injury in the rat.</a> J. Neurotrauma. 22 (6), 680-702 (2005).</li>
<li>Gensel, J. C., Tovar, C. A., Hamers, F. P., Deibert, R. J., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+histological+characterization+of+unilateral+cervical+spinal+cord+contusion+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Behavioral and histological characterization of unilateral cervical spinal cord contusion injury in rats.</a> J. Neurotrauma. 23 (1), 36-54 (2006).</li>
<li>Anderson, K. D., Sharp, K. G., Steward, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+cervical+contusion+spinal+cord+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Bilateral cervical contusion spinal cord injury in rats.</a> Exp. Neurol. 220 (1), 9-22 (2009).</li>
<li>Gruner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+monitored+contusion+model+of+spinal+cord+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A monitored contusion model of spinal cord injury in the rat.</a> J. Neurotrauma. 9 (2), 123-126 (1992).</li>
<li>Scheff, S. W., Rabchevsky, A. G., Fugaccia, I., Main, J. A., Lumpp, J. E. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+modeling+of+spinal+cord+injury%3A+characterization+of+a+force-defined+injury+device%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Experimental modeling of spinal cord injury: characterization of a force-defined injury device.</a> J. Neurotrauma. 20 (2), 179-193 (2003).</li>
<li>Zhang, Y. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+contusion+based+on+precise+vertebral+stabilization+and+tissue+displacement+measured+by+combined+assessment+to+discriminate+small+functional+differences%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Spinal cord contusion based on precise vertebral stabilization and tissue displacement measured by combined assessment to discriminate small functional differences.</a> J Neurotrauma. 25 (10), 1227-1240 (2008).</li>
<li>Walker, C. L., Walker, M. J., Liu, N. K., Risberg, E. C., Gao, X., Chen, J., Xu, X. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+bisperoxovanadium+activates+Akt%2FmTOR%2C+reduces+autophagy%2C+and+enhances+recovery+following+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Systemic bisperoxovanadium activates Akt/mTOR, reduces autophagy, and enhances recovery following cervical spinal cord injury.</a> PLoS One. 7 (1), e30012(2012).</li>
<li>Irvine, K. A., Ferguson, A. R., Mitchell, K. D., Beattie, S. B., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+assessing+proximal+and+distal+forelimb+function+in+the+rat%3A+the+Irvine%2C+Beatties+and+Bresnahan+%28IBB%29+forelimb+scale%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A novel method for assessing proximal and distal forelimb function in the rat: the Irvine, Beatties and Bresnahan (IBB) forelimb scale.</a> J. Vis. Exp. (46), 2246(2010).</li>
<li>Martinez, M., Brezun, J. M., Bonnier, L., Xerri, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+rating+scale+for+open-field+evaluation+of+behavioral+recovery+after+cervical+spinal+cord+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A new rating scale for open-field evaluation of behavioral recovery after cervical spinal cord injury in rats.</a> J Neurotrauma. 26 (7), 1043-1053 (2009).</li>
<li>Cao, Q., Zhang, Y. P., Iannotti, C., DeVries, W. H., Xu, X. M., Shields, C. B., Whittemore, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+and+electrophysiological+changes+after+graded+traumatic+spinal+cord+injury+in+adult+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Functional and electrophysiological changes after graded traumatic spinal cord injury in adult rat.</a> Exp. Neurol. 191 Suppl 1, S3-S16 (2005).</li>
<li>Lee, J. H., Streijger, F., Tigchelaar, S., Maloon, M., Liu, J., Tetzlaff, W., Kwon, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Contusive+Model+of+Unilateral+Cervical+Spinal+Cord+Injury+Using+the+Infinite+Horizon+Impactor%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor.</a> J. Vis. Exp. (65), e3313(2012).</li>
<li>Zhang, Y. P., Walker, M. J., Shields, L. B. E., Wang, X., Walker, C. L., Xu, X. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+Cervical+Laceration+Injury+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Controlled Cervical Laceration Injury in Mice.</a> J. Vis. Exp. (75), e50030(2013).</li>
</ol>

Non abbiamo nulla da rivelare.

Qui abbiamo dimostrato un metodo stabilizzazione del rachide cervicale per la produzione unilaterale contusivo SCI a C5. Questo metodo di stabilizzazione aumenta la precisione del trauma anatomicamente e produce coerente deficit funzionali 13,18. In altri modelli che si basano sulla serraggio dorsale dei processi spinosi, il rischio di danni o processo spinoso distacco delle fascette dal vertebra è abbastanza elevato. Questi modelli possono anche permettere una notevole colonna vertebrale spostamento e cedevole dalla forza contusione e la natura flessibile della colonna vertebrale e colonne vertebrali (Figura 1A e B). Il tessuto cedendo altera il tempo di contatto pistone-tissutale e risultati vigenti danno imprevedibile (Figura 1A-B &amp; 6B). La nostra stabilizzazione vertebrale descritto fornisce anche altri vantaggi alla preparazione chirurgica: 1) questo metodo stabilizza completamente vertebre C5 centrata sotto ilmicroscopio chirurgico che aumenta l&#39;accuratezza di laminectomia (Figura 1C); 2) l&#39;animale montata entro lo stabilizzatore a forma di U può essere preso direttamente dal luogo chirurgico per l&#39;attacco di montaggio su misura, che evita la procedura di rimontare l&#39;animale su dispositivi SCI e fa risparmiare tempo; e 3) stabilizzazione delle vertebre a livello del pregiudizio e dorsale direttamente e caudale al luogo previsto di lesione può diminuire notevolmente il movimento del corpo causate dalla respirazione, un&#39;altra misura per ridurre la variabilità. Il vantaggio principale di utilizzare questo metodo di stabilizzazione è la quantità ridotta di cedere, o movimento ventrale del midollo spinale e della colonna al momento dell&#39;impatto. Sulla base semplice fisica di una contusione, la forza e l&#39;energia dell&#39;impatto trasferirà dallo stelo al midollo spinale, idealmente con il cavo di assorbire questa energia al sito di impatto. Tuttavia, se le rese colonna vertebrale sotto il cavo, come è possibilenel metodo di bloccaggio spinoso dorsale (Figura 1A e B), la forza effettiva applicata al cavo viene diminuito e variabili, a seconda del grado di rendimento. Anche se il video mostra l&#39;intera procedura di un modello di contusivo SCI cervicale, l&#39;essenza di questo articolo è l&#39;introduzione del metodo di stabilizzazione della colonna vertebrale che usiamo in varie applicazioni nel nostro laboratorio, in particolare per gli studi SCI. Una versione modificata del dispositivo di stabilizzazione e metodo è stato utilizzato su topi SCI 23. Questo semplice metodo di stabilizzazione della colonna vertebrale è molto utile per la ricerca SCI, e abbiamo precedentemente utilizzato questo metodo e apparecchiatura per effettuare contusione toracica e lacerazione modelli SCI. Un altro laboratorio ha recentemente descritto una variante di questa forma di stabilizzazione per le lesioni cervicali in questa rivista 22. In sintesi, si introduce il metodo di stabilizzazione vertebrale romanzo a diversi Surgicprocedure AL per la generazione riproducibile SCI sperimentale vanno dalla laminectomia alla produzione lesioni. I vantaggi di questo dispositivo di stabilizzazione non sono limitati a cervicale contusione del midollo spinale, in quanto questo metodo di stabilizzazione è stato adattato per una vasta gamma di esperimenti come le iniezioni intra-spinale, il trapianto cellulare, raccolta CSF dalla cisterna magna, emisezione e transezione lesioni, lesioni contusione toracica, imaging in vivo utilizzando la microscopia a due fotoni, e la registrazione elettrofisiologica spinale. Aumentare la qualità delle procedure chirurgiche e lesioni spinali e riducendo la variabilità sperimentale contribuirà a fornire insight in veri meccanismi di danno e di recupero, e lo schermo gli effetti di diverse terapie sulla malattia devastante di SCI.

Coerente e replicabile forza meccanica sul bersaglio tessuto spinale è fondamentale per ridurre al minimo la variabilità funzionale e istologiche e per stabilire efficaci lesioni del midollo spinale contusivo (SCI) modelli 1-7. La quantità di forza applicata ad una regione bersaglio del midollo spinale dipende dai metodi utilizzati per la stabilizzazione della colonna vertebrale. Spostamento di posizione della colonna di destinazione durante il contatto tra lo stantuffo impatto e il midollo spinale altera la forza conseguente pregiudizio. Il modello di contusivo SCI cervicale è un modello più clinicamente rilevante rispetto ad altre forme di SCI, in quanto circa il 50% dei casi SCI umani si verificano a questo livello 8, e diversi studi SIC sono stati condotti utilizzando animali modelli di lesioni cervicali 9-14. Sebbene i modelli contusivi SCI spesso utilizzano una qualche forma di stabilizzazione fissando anteriore e posteriore processi spinali al sito della lesione, questa preparazione è difficile per la produzione SCI cervicale. &amp;# 160; Come mostrato in questa dimostrazione, il metodo di stabilizzazione abbiamo sviluppato è vantaggioso nella sua capacità di aumentare sia la qualità e la riproducibilità di lesioni contusione. In particolare, questo metodo di stabilizzazione vertebrale è stata istituita nel tentativo di modificare le carenze e le sfide di altri modelli: 1) variabilità vertebrale cedere sotto la forza d&#39;urto può avvenire fissando dorsali adiacenti processi spinosi rostrale e caudale alla laminectomia. Il grado di spostamento vertebrale dipende dal numero dei giunti vertebrali tra l&#39;impatto e le vertebre è stabilizzata (Figura 1). Pertanto, i più articolazioni coinvolte la meno stabile la colonna vertebrale diventa; 2) i processi dorsali spinoso sono guasti morsetto fragili e causare come risultato di frattura processo spinoso o morsetto sfilamento del processo; e 3) i processi spinosi su queste vertebre sono estremamente brevi tra C3 a T1 vertebre rispetto a quelle del verte toracicaBrae, il che rende difficile utilizzare morsetti tradizionali per cogliere i processi spinosi per stabilizzare la colonna cervicale. Qui si descrive un nuovo metodo di stabilizzazione della colonna vertebrale per la produzione di C5 contusivo SCI in femmina adulta Sprague-Dawley. Questo metodo può essere utilizzato per la stabilizzazione di altri livelli della colonna vertebrale e del midollo spinale, e coniugati e con altri dispositivi contusivi SCI, incluso il cavo di New York University / Multicenter Animal Spinal Injury Study (NYU / Mascis) urto 15 (figura 2) Sistemi di precisione e Strumentazione, LLC Infinite Horizon (IH) dispositivo 16, Ohio State University / elettromagnetica Spinal Cord Injury dispositivo 1, e l&#39;Apparato Louisville sistema Injury (LISA) 17, consentendo l&#39;uso diffuso nella ricerca SCI.

<table><tbody><tr><td>Prodotti Purdue Betadine Scrub chirurgico</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-027132</td><td></td></tr><tr><td>Spugne di garza Dukal</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-415-490</td><td></td></tr><tr><td>Ketamina (87,7 mg/kg)/Xilazina (12,3 mg/kg)</td><td>Webster Veterinary</td><td>07-881-9413, 07-890-5745</td><td></td></tr><tr><td>Decon Ethanol 200 Proof</td><td>Fisher Scientific</td><td>04-355-450</td><td></td></tr><tr><td>Lacrime artificiali Occhio Unguento</td><td>Webster Veterinary</td><td>07-870-5261</td><td></td></tr><tr><td>Unguento antiobiotico</td><td>Webster Veterinary</td><td>07-877-0876</td><td></td></tr><tr><td>Applicatori con punta in cotone</td><td>Fisher Scientific</td><td>1006015</td><td></td></tr><tr><td>Rongeur</td><td>Fine Science Tools</td><td>16000-14</td><td></td></tr><tr><td>Forbici Surigical</td><td>Fine Science Tools</td><td>15009-08</td><td></td></tr><tr><td>Forbici (dissezione smussata)</td><td>Strumenti per le scienze</td><td>14040-10</td><td></td></tr><tr><td>Divaricatore chirurgico</td><td>Strumenti per le scienze</td><td>17005-04</td><td></td></tr><tr><td>Pinze grandi</td><td>Strumenti per le scienze</td><td>11024-18</td><td></td></tr><tr><td>Pinze per le</td><td></td> scienze <td>11223-20</td><td></td></tr><tr><td>Emostatico</td><td>Strumenti per le scienze</td><td>13004-14</td><td></td></tr><tr><td>Bisturi</td><td>Strumenti per le scienze</td><td>10003-12</td><td></td></tr><tr><td>Lama per bisturi #15</td><td>Fisher Scientific</td><td>10015-00</td><td></td></tr><tr><td>Clip EZ Fisher</td><td>Scientific</td><td>59027</td><td></td></tr><tr><td>Suture sterili</td> Strumenti per la <td>scienza fine</td><td>12051-10</td><td></td></tr><tr><td>Sterilizzatore per strumenti</td><td>Strumenti per la scienza fine</td><td>14040-10</td><td></td></tr><tr><td>Stabilizzatore chirurgico</td><td>Prodotto su misura</td><td>N/A</td><td>Contatta Y. Ping Zhang per i dettagli. (yipingzhang50@gmail.com)</td></tr><tr><td>Barre di stabilizzazione vertebrale (piedi terminali artigliati)</td> <td>Prodotto su misura</td><td>N / A</td><td>Contatta Y. Ping Zhang per i dettagli. (yipingzhang50@gmail.com)</td></tr><tr><td>NYU/MASCIS Impactor</td><td>Device Realizzato su misura</td><td>W. M. Keck Center for Collaborative Neuroscience Rutgers, The State University of New Jersey e-mail: impactor@biology.rutgers.edu</td><td></td></tr></tbody></table>

a novel vertebrale metodo di stabilizzazione per la produzione di contusivi cord injury spinale

A Novel Vertebral Stabilization Method for Producing  Contusive Spinal Cord Injury

Clinicamente rilevanti cervicale lesioni del midollo spinale degli animali (SCI) modelli sono essenziali per sviluppare e testare potenziali terapie; Tuttavia, producendo affidabile SCI cervicale è difficile a causa della mancanza di metodi soddisfacenti di stabilizzazione vertebrale. Il metodo convenzionale per stabilizzare la colonna vertebrale è di sospendere la colonna cervicale rostrale e caudale via morsetti collegati ai processi spinosi cervicali. Tuttavia, questo metodo di stabilizzazione non impedire il tessuto cedevole durante la contusione come i processi spinali cervicali sono troppo breve per essere efficacemente protetto dalle pinze (Figura 1). Qui si introduce un nuovo metodo per stabilizzare completamente i vertebra cervicale allo stesso livello della lesione impatto. Questo metodo riduce efficacemente il movimento della colonna vertebrale nel sito di impatto, che migliora notevolmente la produzione di SIC coerenti. Forniamo descrizione visiva delle apparecchiature (Figura 2-4), il metodos, e un protocollo passo-passo per la stabilizzazione della vertebra cervicale 5 (C5) di ratti adulti, effettuare laminectomia (Figura 5) e producono un SCI contundente successivamente. Anche se abbiamo solo dimostriamo un emi-contusione cervicale utilizzando il dispositivo di simulazione NYU / Mascis, questa tecnica di stabilizzazione vertebrale può essere applicato ad altre regioni del midollo spinale, o essere adattato ad altri dispositivi SCI. Migliorare l&#39;esposizione del midollo spinale e la fissazione per la stabilizzazione vertebrale può essere utile per la produzione di ferite compatibili e affidabili al midollo spinale. Questo metodo di stabilizzazione vertebrale può essere utilizzato anche per iniezioni stereotassica di cellule e traccianti, e per l&#39;imaging mediante microscopia a due fotoni in vari studi neurobiologici.

Su seguendo questo protocollo, coerente e riproducibile cervicale emi-contusivo SCI viene prodotto (Figura 5 e 6). L&#39;uso di uno stabilizzatore vertebrale per stabilizzare i processi laterali della stessa vertebra a livello destinato SCI permette tali risultati soddisfacenti. Utilizzando questo metodo, non solo la C5 vertebra bersaglio, ma anche C4 adiacente e C6 sono rigidamente fissate. Il software NYU / Mascis fornisce un read-out con un grafico impostato su un x ed y, e supporta l&#39;utilizzo del nostro metodo di stabilizzazione vertebrale, e attrezzature (Figura 6). Questo metodo di stabilizzazione riduce la variabilità pregiudizio che può derivare dalla spostamento verso il basso del tessuto bersaglio e della colonna vertebrale (Figura 1). A seguito di infortunio, una chiara ematoma bluastro unilaterale centrato tra la C5 e C6 DREZs è visibile (Figura 5E). Questi parametri lesioni sono coerenti da animale ad animal secondo la lettura fornito dal software NYU / Mascis (Figura 6). Come la cervicale emi-contusione produce deficit degli arti anteriori chiari, questo modello è ideale per la valutazione degli arti anteriori capacità funzionali, quali il raggiungimento, governare 13, e oggetto di manipolazione 18-19. Come deficit motori arti posteriori sono meno prominenti, il Basso, Beattie e Bresnahan (BBB) ​​locomotoria scala di punteggio 4 non è adatto per l&#39;uso in questo modello. Il risultato funzionale a seguito di infortunio è più evidente nei deficit zampa estensori omolaterale, in cui il topo presenta una &quot;bastonato&quot; pugno con tutte le cifre flesso 18. Tutti gli animali esposti allo stesso gravità del pregiudizio e del livello del midollo spinale dovrebbe mostrare deficit simili a dell&#39;arto anteriore ipsilaterale illustrato in questo protocollo, su lesioni corretto. Animali feriti impropriamente possono presentare con molto diverse manifestazioni e la durata dei deficit 13,18. Istologicamente, questo modello produce ingenti danni grigia e sostanza bianca all&#39;epicentro pregiudizio e rostrale e caudale al sito di lesione, che porta a una notevole formazione di lesioni e cavità contenuta quasi esclusivamente nella parte lesa del midollo spinale. Un grande, soprattutto astrociti-based forme cicatrice gliale alle frontiere lesione con massiccia morte neuronale 18. <img alt="Figura 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/50149/50149fig1highres.jpg" width="500" /> Figura 1: Illustrazione di flessibilità della colonna vertebrale durante SCI contusivo con diversi metodi di serraggio. Figure A e B spettacolo flessibilità o &quot;resa&quot; della colonna vertebrale quando i processi spinosi sono bloccati dorsale, consentendo effetti impropri e dati incoerenti. L&#39;illustrazione mostrata in A mostra una maggiore flessibilità in caso di impatto (linea rossa tratteggiatae grandi frecce curve) rispetto a quello mostrato in B (frecce curve più piccole), come i morsetti sono più lontano dal sito di laminectomia e lesioni. Figura C mostra stabilizzazione laterale con il nostro dispositivo descritto con il braccio stabilizzante serrato saldamente sotto processo trasversale la vertebra dove verrà eseguita sito di impatto. Non vi è alcuna flessibilità della colonna vertebrale durante questa procedura, come la vertebra di interesse è completamente stabilizzato. <img alt="Figura 2" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/50149/50149fig2highres.jpg" width="500" /> Figura 2: NYU / Mascis urto e contenitore di stabilizzazione personalizzati. Figura A mostra le parti e le caratteristiche del dispositivo di lesioni del midollo spinale NYU / Mascis, con diverse impostazioni di altezza asta per la gravità delle lesioni (riquadro). Figure B e C illustrano il contenitore a forma di U che contiene ilratto, e le braccia di stabilizzazione dentellati che stabilizzano saldamente la colonna vertebrale durante l&#39;intervento chirurgico e lesioni (progettato e prodotto da YP Zhang). <img alt="Figura 3" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/50149/50149fig3highres.jpg" width="500" /> Figura 3: Sistema e microadjuster laterale di montaggio personalizzato sul dispositivo di simulazione NYU / Mascis Figura A dettaglio le diverse componenti del sistema di montaggio su misura per lo stabilizzatore di ratto a forma di U per le lesioni del midollo spinale.. Notare la microadjuster laterale nella figura A, fondamentale per l&#39;allineamento preciso del midollo spinale di ratto per la ferita. Figure B e C forniscono un&#39;ulteriore rappresentazione dello stabilizzatore senza (B) e con il contenitore di ratto ad U (C) rispetto ad altri importanti componenti del dispositivo pregiudizio (sistema di montaggio progettati e prodotti da YP Zhang). <img alt="Figura 4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/50149/50149fig4highres.jpg" width="500" /> Figura 4:. Misure dei singoli componenti il dispositivo di stabilizzazione chirurgica e allegati Ogni componente del sistema di stabilizzazione personalizzato viene evidenziato per mostrare le dimensioni e la scala (A, C, e D). Bracci di stabilizzazione toracica (B) vengono mostrati per visualizzare la potenziale applicazione di questo dispositivo per l&#39;utilizzo in diversi modelli chirurgici spinali. <img alt="Figura 5" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/50149/50149fig5highres.jpg" width="500" /> Figura 5: punti di riferimento chirurgiche e preparazione per emi-contusione lesioni del midollo spinale cervicale. Figure A e B ritraggono i punti di riferimento corretti per una corretta IMPAallineamento ct sul ratto esposto midollo spinale. Il punto di impatto appropriata è direttamente tra le radici C5 e C6 dorsali nervose (rostrale-caudale) e la linea mediana e bordi laterali del midollo spinale (B). Le figure mostrano CE, in ingrandimento maggiore, il processo di esposizione metà desiderata della cervicale midollo spinale per lesioni, attraverso un&#39;attenta laminectomia unilaterale. Inoltre, figure D ed E dimostrare il cavo immediatamente prima e dopo lesioni del midollo spinale contusione. Nota l&#39;emorragia visibile (E) causata dall&#39;impatto (freccia nera). <img alt="Figura 6" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/50149/50149fig6highres.jpg" width="500" /> Figura 6 :. Esempi di accettabile contro letture di dati inaccettabili seguito dell&#39;impatto con la simulazione NYU / Mascis. La parte superiore del grafico (A) e set di dati superiore (C) </strong&gt; illustrano una lettura di un buon impatto, con misure di dati &quot;% error&quot; per velocità d&#39;impatto asta, altezza iniziale, e ora di inizio, come indicato con la freccia rossa e sottolineare. Tutti i valori sono ben all&#39;interno della finestra di errore accettabile. Al contrario, il pannello inferiore mostra i dati ottenuti da un impatto improprio causato dalla stabilizzazione improprio della colonna vertebrale (B) ed errore durante &quot;azzeramento&quot; dell&#39;asta di simulazione e punta sulla superficie del midollo spinale, prima di impostare l&#39;altezza dell&#39;asta di simulazione (C). Nota la notevole errore indicato per l&#39;altezza iniziale e il tempo di caduta di simulazione iniziare, come indicato dalla freccia rossa e sottolineano. Il software fornisce anche un avvertimento è stato rilevato che l&#39;errore di questi parametri (fondo di pannello C).

Stabilizzazione vertebrale è necessario per ridurre al minimo la variabilità, e per la produzione di lesioni del midollo spinale sperimentali coerenti. Utilizzando un dispositivo di stabilizzazione personalizzato in collaborazione con il dispositivo di simulazione NYU / Mascis, abbiamo dimostrato qui l&#39;attrezzatura adeguata e la procedura per la generazione riproducibili cervicali (C5) le lesioni del midollo spinale emi-contusivo in ratti adulti.

A Novel vertebrale metodo di stabilizzazione per la produzione di Contusivi Cord Injury spinale

Clinically-relevant animal cervical spinal cord injury (SCI) models are essential for developing and testing potential therapies; however, producing ...

L'obiettivo generale di questa procedura è generare lesioni del midollo spinale in modo costante, preciso e riproducibile, utilizzando un innovativo stabilizzatore vertebrale compatibile con diversi dispositivi per lesioni del midollo spinale (SCI). Questo risultato si ottiene eseguendo con attenzione la dissezione del tessuto circostante le vertebre cervicali, avendo cura di minimizzare l'emorragia. Il secondo passaggio consiste nel posizionare l'animale nel dispositivo di stabilizzazione e fissare le vertebre mediante bracci di stabilizzazione dotati di superficie zigrinata.Successivamente, eseguire una laminectomia per esporre la regione mirata del midollo spinale. L'ultimo passaggio consiste nel fissare il dispositivo di stabilizzazione a forma di U alle masse NYU e all'impactor, ed eseguire il danno midollare. Alla fine, viene generato un danno contusivo al midollo spinale riproducibile e coerente grazie al nuovo dispositivo di stabilizzazione. Oggi dimostreremo l'uso del nostro unico dispositivo chirurgico di stabilizzazione, utilizzato insieme all'impactor per lesioni del midollo spinale dell'Università di New York, per creare lesioni midollari contusive riproducibili e coerenti.Utilizziamo questo dispositivo di stabilizzazione nel nostro laboratorio per indurre lesioni del midollo spinale, nonché per interventi chirurgici di trapianto e microiniezione e per l'acquisizione di immagini. Iniziare questa procedura pulendo la superficie operatoria con etanolo al 70%. Posizionare una piastra riscaldante nell'area operatoria e accendere la piastra riscaldante.Quindi posizionare i tamponi sterili in garza di cotone e gli strumenti chirurgici sterilizzati in autoclave nell'area operatoria. Dopo aver ricoperto la superficie con un telo chirurgico sterile, utilizzare un sterilizzatore a microsfere per la sterilizzazione degli strumenti tra un intervento e l'altro. Pulire inoltre il stabilizzatore con etanolo al 70% prima e tra un intervento e l'altro.Ora anestetizzare il ratto mediante iniezione intraperitoneale di chetamina e xilazina e confermare la profondità dell'anestesia mediante stimolazione della pinzatura del dito del piede. Successivamente, applicare un unguento protettivo sugli occhi dell'animale per prevenire l'essiccazione della cornea. Dopodiché, rasare la schiena del ratto dalla regione toracica media fino alla testa.Quindi rimuovere il pelo utilizzando un aspiratore dotato di filtro HEPA. Successivamente, applicare Betadine sulla zona rasata come antisettico chirurgico e pulire l'area con salviette in alcol isopropilico al 70%. Somministrare per via sottocutanea da 0,01 a 0,05 milligrammi per chilogrammo di buprenorfina e cinque milligrammi per chilogrammo di carprofene prima dell'intervento chirurgico.La buprenorfina deve quindi essere somministrata ogni otto-dodici ore e il carprofene una volta al giorno per i primi quattro-sette giorni successivi all'intervento chirurgico. Successivamente, posizionare il ratto nell'area chirurgica preriscaldata. Utilizzare una lama di bisturi per eseguire un'incisione mediana di tre-quattro centimetri a livello della cute, dalla base della testa fino alla parte mediale del torace. Quindi identificare la linea mediana della fascia e dei muscoli sottocutanei anteriormente alla ghiandola imberna a livello del collo inferiore.Tagliare il trapezio e altri muscoli lungo la linea mediana per ridurre l'emorragia. Individuare il tessuto adiposo sottostante i muscoli in corrispondenza della linea mediana. Tagliare i muscoli paraspinale con attenzione.Successivamente, separare i lembi muscolari utilizzando un piccolo retraettore per tessuti fino a raggiungere il processo spinoso toracico T2. Quindi, asportare il muscolo collegato al processo spinoso T2 e utilizzare questa struttura come punto di riferimento anatomico. Successivamente, rimuovere l'apice cartilagineo del processo spinoso T2 per migliorare la visibilità delle vertebre cervicali.Separare i muscoli paraspinali lateralmente dai processi spinosi e dalle lamine, tuttavia risparmiare il muscolo che ricopre la lamina di C3 per prevenire emorragie. Successivamente, incidere i muscoli sopra le lamine lateralmente verso le faccette su entrambi i lati della colonna vertebrale. Dopo aver esposto le lamine spinali, posizionare l'animale nel canale a forma di U del stabilizzatore.Individuare la quinta vertebra cervicale contando le apofisi spinose in senso rostrale a partire dal punto di riferimento della seconda vertebra toracica fino alla prima toracica, alla settima cervicale, alla sesta cervicale e infine alla quinta cervicale. In questo procedimento, posizionare i due bracci in acciaio inossidabile del stabilizzatore per sostenere l'animale, posizionando i bordi dentati dei bracci al di sotto delle faccette laterali delle vertebre C5-C6. Dopo aver fissato i bracci con le vertebre in posizione, regolare l'apparato stabilizzatore per assicurarsi che la colonna vertebrale sia livellata e centrata.Infine, bloccare i bracci serrando le viti a testa zigrinata del relativo stabilizzatore. Quindi, recidere i legamenti tra i processi spinali e le lamine a livello di C4-C5 e C5-C6. Per individuare il margine della lamina C5 mediante un micro ron, asportare con una pinzetta metà della lamina destra C5 per provocare la lesione midollare (SCI).Dopo la laminectomia, trasportare l'animale con lo stabilizzatore dal tavolo operatorio al dispositivo di lesione. Fissare l'animale insieme allo stabilizzatore su un supporto collegato al dispositivo di lesione. Allineare con precisione il puntello con la sede bersaglio del midollo spinale utilizzando un micromanipolatore laterale sotto elevata ingrandimento.Individuare le zone di entrata delle radici dorsali C5 e C6 sulla superficie dorsale esposta del midollo spinale senza duratomia. Puntare lo stantuffo al centro delle due DREZ identificate e a metà strada tra la linea mediana e il margine laterale del midollo spinale. Utilizzando un dispositivo impattatore NYU masses con una punta di diametro di 2,5 millimetri, produrre una contusione emisferica C5 mediante un'asta da 10 grammi lasciata cadere da un'altezza di 12,5 millimetri.Verificare visivamente il trauma attraverso l'ematomа sul midollo spinale e controllare i parametri della lesione forniti dal software NYU. Quindi suturare i muscoli e i tessuti molli e chiudere l'incisione cutanea con punti metallici chirurgici. Applicare un unguento antibatterico sulla sede operatoria e somministrare 5,0 millilitri di soluzione salina sterile 0,9% per via sottocutanea all'animale per l'idratazione.Successivamente, posizionare l'animale in un ambiente con temperatura controllata, fornendo cibo umido sul fondo della gabbia e una bottiglia d'acqua con beccuccio lungo per un facile accesso, posizionata sul pavimento della gabbia. Prestare cure adeguate per garantire un recupero sufficiente prima di restituire l'animale alla gabbia di mantenimento. Questa figura illustra un risultato molto buono dell'impatto, con misurazioni dei dati relative all'errore percentuale per impatto, velocità della sbarretta, altezza iniziale e tempo di inizio; tutti i valori rientrano ampiamente entro la finestra di errore accettabile.Al contrario, questo pannello mostra dati prodotti da un impatto improprio causato da un'errata stabilizzazione della colonna vertebrale e da un errore durante la messa a zero della bacchetta dell'impatto sulla superficie del midollo spinale. Prima di impostare l'altezza della bacchetta dell'impatto, questo dispositivo di stabilizzazione immobilizza il midollo spinale. Tuttavia, un grande vantaggio di questo dispositivo è la mobilità che consente nel trasportare l'animale stabilizzato da un tavolo operatorio a una stazione di microiniezione per trapianto, fino al dispositivo di impatto o a una stazione di imaging.La stabilizzazione dei processi vertebrali laterali consente il fissaggio delle specifiche vertebre di interesse, permettendo così lesioni del midollo spinale più riproducibili. Coerenza e riproducibilità sono fattori cruciali nei modelli sperimentali di lesioni del midollo spinale, al fine di minimizzare la variabilità e ottimizzare la chiarificazione degli effetti terapeutici, aspetti tutti importanti per l’applicazione nella traduzione clinica e nella ricerca di una cura per la lesione del midollo spinale.

a-novel-vertebral-stabilization-method-for-producing-contusive-spinal

Research

Ricerca

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Un modo affidabile e ripetibile per produrre una lesione cervicale unilaterale del midollo spinale utilizzando il dispositivo di simulazione Infinite Horizon è descritto. Il metodo si avvale di un telaio progettato e bloccare per stabilizzare la colonna vertebrale. La procedura standardizzata e biomeccanica risultato lesioni parametri lesioni sufficienti e durature.

Un modello contusivo unilaterale di lesioni del midollo spinale cervicale Uso della Impactor Infinite Horizon

Fonte: Elzat, E. Y. Y., et al., Definizione di un modello di lesione del midollo spinale da contusione di topo basato su una tecnica minimamente invasiva. J. Vis. Exp. (2022). Questo video mostra il metodo per indurre una lesione da contusione a livello del midollo spinale T9 in un modello murino, utilizzando una piattaforma coassiale per lesioni del midollo spinale. Viene fatto cadere un peso sul midollo spinale a livello T9 che crea una contusione che provoca immediatamente scolorimento e...

Induzione di una contusione del midollo spinale in un modello murino utilizzando una piattaforma coassiale per lesione del midollo spinale

Fonte: Lakshman, N., et al. Un test della neurosfera per valutare l'attivazione endogena delle cellule staminali neurali in un modello murino di lesione minima del midollo spinale. J. Vis. Exp. (2018). Questo video mostra l'attivazione e la migrazione delle cellule staminali neurali (NSC) in un modello di lesione del midollo spinale di topo. Per esporre il midollo spinale, una vertebra dalla regione toracica della colonna vertebrale viene rimossa da un topo anestetizzato. Una lesione...

 Un modello di lesione minima del midollo spinale per studiare l'attivazione e la migrazione delle cellule staminali neurali

Un modello contusione di gravi lesioni del midollo spinale è descritto. Fasi di pre-operatoria, operatoria e post-operatoria dettagliate sono descritte di ottenere un modello coerente.

Un modello Contusione di gravi lesioni del midollo spinale nei ratti

Lesioni del midollo spinale è una condizione traumatica che provoca grave morbilità e mortalità elevata. In questo lavoro descriviamo in dettaglio un modello contusione di lesioni del midollo spinale nei topi seguita da un trapianto di cellule staminali neurali.

Neural Stem Cell Transplantation in Sperimentale Contusivi Model of Spinal Cord Injury

Introduciamo un modello di lesioni del midollo spinale basato sullo spostamento tissutale che può produrre una lesione contusiva del midollo spinale in topi adulti.

Un modello di lesioni del midollo spinale contusivo basato sullo spostamento tissutale nei topi

Introduciamo un in vivo imaging metodo utilizzando due tinture fluorescenti differenti per rilevare cambiamenti vascolari spinali dinamici che segue una ferita del midollo spinale contusivi in ratti Sprague-Dawley adulti.

In Vivo Duo-colore metodo di Imaging vascolare dinamica dopo la lesione del midollo spinale contusivi

Qui, descriviamo una nuova tecnica veloce che modella la lesione del midollo spinale aperto nei ratti che elimina la laminectomia. L'emisezione laterale viene eseguita durante la visualizzazione attraverso un microscopio. La tecnica è versatile e può essere utilizzata anche nelle regioni cervicale, toracica e lombare del midollo spinale di altri animali.

Una tecnica di emisezione laterale del midollo spinale minimamente invasiva e veloce per modellare le lesioni aperte del midollo spinale nei ratti

Tecniche mini-invasive e un semplice dispositivo di laboratorio migliorano la riproducibilità del modello di lesione midollare riducendo il danno operatorio agli animali da esperimento e consentendo il mantenimento della morfologia anatomica. Il metodo è utile perché i risultati affidabili e la procedura riproducibile facilitano le indagini sui meccanismi di riparazione della malattia.

Stabilire un modello di lesione del midollo spinale per contusione murina basato su una tecnica minimamente invasiva

Qui viene presentato un nuovo dispositivo automatizzato per la contusione da lesione del midollo spinale per topi, in grado di produrre con precisione modelli di contusione da lesione del midollo spinale con vari gradi.

Impattatore automatizzato per il modello di lesione del midollo spinale contusivo nei topi

Il sistema a vite di regolazione sagittale (SAS) è stato ampiamente utilizzato per i traumi spinali toracolombari (TL). Per il sistema SAS sono disponibili anche opzioni percutanee e dispositivi specializzati per la riduzione del trauma. Descriviamo una tecnica per ridurre le fratture da scoppio TL utilizzando un sistema SAS e un dispositivo di riduzione del trauma di nuova introduzione.

Trattamento minimamente invasivo per la frattura da scoppio toracolombare utilizzando viti di allineamento sagittale e un dispositivo di riduzione del trauma

Impara un metodo per generare lesioni spinali contusive riproducibili nei ratti adulti utilizzando uno stabilizzatore vertebrale innovativo. Questa tecnica minimizza la variabilità sperimentale e migliora la consistenza dei modelli di lesione del midollo spinale.

A Novel vertebrale metodo di stabilizzazione per la produzione di Contusivi Cord Injury spinale

Esplora altri video