Preparazione di segmentate microtubuli allo Studio Proposte guidato dal Smontaggio microtubuli Ends

L'obiettivo generale del seguente esperimento è studiare i movimenti delle molecole proteiche e delle perle rivestite di proteine con le estremità dei microtubuli depolimerizzanti. Ciò si ottiene assemblando una camera di flusso riutilizzabile con un vetrino di copertura di dimensioni pulite. Successivamente vengono preparati i semi dei microtubuli attaccati al vetrino coprioggetto e utilizzati per nucleare i microtubuli, che vengono poi stabilizzati temporaneamente con cappucci fotodistruttibili.

Quindi le proteine marcate con GFP o le perle rivestite di proteine vengono introdotte nella camera di flusso e si legano ai microtubuli segmentati. La depolimerizzazione della micro vasca viene quindi attivata rimuovendo i tappi mediante fotoablazione. Le immagini vengono analizzate con CH per determinare se le proteine marcate mostrano un comportamento di tracciamento della punta, che è il movimento con le estremità dei microtubuli depolimerizzanti.