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Ad alta risoluzione Imaging e analisi dei singoli microtubuli astrali Dynamics in germogliamento ...
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JoVE Journal Biology
High-resolution Imaging and Analysis of Individual Astral Microtubule Dynamics in Budding Yeast

Ad alta risoluzione Imaging e analisi dei singoli microtubuli astrali Dynamics in germogliamento lievito

Full Text
10,015 Views
10:23 min
April 20, 2017

DOI: 10.3791/55610-v

Colby P. Fees1, Cassi Estrem1, Jeffrey K. Moore1

1Department of Cell and Developmental Biology,University of Colorado School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Erba lievito è un modello vantaggioso per lo studio della dinamica dei microtubuli in vivo grazie ai suoi potenti genetica e la semplicità della sua citoscheletro microtubuli. Il seguente protocollo descrive come trasformare le cellule e la cultura di lievito, di acquisire immagini di microscopia confocale, e quantitativamente analizzare dinamica dei microtubuli in cellule di lievito viventi.

L'obiettivo generale di questa procedura è misurare la dinamica dei microtubuli nelle cellule di lievito. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo dei microtubuli, come ad esempio il modo in cui le mutazioni nei tubuli e nei regolatori dei microtubuli regolano la dinamica dei microtubuli in una cellula vivente. Il vantaggio principale di questa tecnica è che le cellule di lievito viventi sono stabilizzate nell'immagine.

Piuttosto, un'alta risoluzione temporale per dieci minuti o una risoluzione temporale bassa per diverse ore. A dimostrare la procedura saranno Colby Fees e Cassi Estrem, due studenti laureati del mio laboratorio. Le cellule di lievito utilizzate in questo esperimento sono state costruite per esprimere costitutivamente la tubulina marcata con GFP.

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