Name: Registrazione simultanea di elettroretinografia e Potenziali evocati visivi nei ratti anestetizzati (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 30 s
Description: Impara a registrare simultaneamente elettroretinografia e potenziali evocati visivi in ratti anestetizzati. Questo metodo consente di valutare la funzione retinica e corticale per studiare gli effetti dell'invecchiamento sulle vie visive.

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Il finanziamento per questo progetto è stato fornito dal National Health and Medical Research Council (NHMRC) 1046203 (BVB, AJV) e dal Melbourne Neuroscience Institute Fellowship (CTN).

<ol><li>Nguyen, C. T. O., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Weymouth, A. E., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+electroretinography%3A+methods+for+extraction+and+interpretation+of+rod+and+cone+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Rodent electroretinography: methods for extraction and interpretation of rod and cone responses.</a> Prog Retin Eye Res. 27, 1-44 (2008).</li>
<li>Tsai, T. I., Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+acute+intraocular+pressure+challenge+on+rat+retinal+and+cortical+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of acute intraocular pressure challenge on rat retinal and cortical function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55, 1067-1077 (2014).</li>
<li>Cowey, A., Franzini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+retinal+origin+of+uncrossed+optic+nerve+fibres+in+rats+and+their+role+in+visual+discrimination%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The retinal origin of uncrossed optic nerve fibres in rats and their role in visual discrimination.</a> Exp Brain Res. 35, 443-455 (1979).</li>
<li>Weinstein, G. W., Odom, J. V., Cavender, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visually+evoked+potentials+and+electroretinography+in+neurologic+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Clin%22%5BJournal%5D)">Visually evoked potentials and electroretinography in neurologic evaluation.</a> Neurol Clin. 9, 225-242 (1991).</li>
<li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+evoked+potentials+standard+%282004%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Visual evoked potentials standard (2004).</a> Doc Ophthalmol. 108, 115-123 (2004).</li>
<li>Ridder, W. H., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Causes+of+cataract+development+in+anesthetized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Causes of cataract development in anesthetized mice.</a> Exp Eye Res. 75, 365-370 (2002).</li>
<li>Nixon, P. J., Bui, B. V., Armitage, J. A., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contribution+of+cone+responses+to+rat+electroretinograms%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Experiment+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The contribution of cone responses to rat electroretinograms.</a> Clin Experiment Ophthalmol. 29, 193-196 (2001).</li>
<li>Bui, B. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+the+electroretinogram+to+understand+how+intraocular+pressure+elevation+affects+the+rat+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Using the electroretinogram to understand how intraocular pressure elevation affects the rat retina.</a> J Ophthalmol. 2013, 262467(2013).</li>
<li>Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+measure+of+the+electrical+activity+of+human+rod+photoreceptors+using+electroretinography%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A quantitative measure of the electrical activity of human rod photoreceptors using electroretinography.</a> Vis Neurosci. 5, 379-387 (1990).</li>
<li>Birch, D. G., Hood, D. C., Locke, K. G., Hoffman, D. R., Tzekov, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+electroretinogram+measures+of+phototransduction+in+cone+and+rod+photoreceptors+-+Normal+aging%2C+progression+with+disease%2C+and+test-retest+variability%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Quantitative electroretinogram measures of phototransduction in cone and rod photoreceptors - Normal aging, progression with disease, and test-retest variability.</a> Arch Ophthalmol. 120, 1045-1051 (2002).</li>
<li>Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+receptoral+responses+in+pigmented+and+albino+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Development of receptoral responses in pigmented and albino guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Doc Ophthalmol. 99, 151-170 (1999).</li>
<li>Robson, J. G., Saszik, S. M., Ahmed, J., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rod+and+cone+contributions+to+the+a-wave+of+the+electroretinogram+of+the+macaque%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rod and cone contributions to the a-wave of the electroretinogram of the macaque.</a> J Physiol. 547, 509-530 (2003).</li>
<li>Severns, M. L., Johnson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+care+and+fitting+of+Naka-Rushton+functions+to+electroretinographic+intensity-response+data%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The care and fitting of Naka-Rushton functions to electroretinographic intensity-response data.</a> Doc Ophthalmol. 85, 135-150 (1993).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origin+of+electroretinogram+amplitude+growth+during+light+adaptation+in+pigmented+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Origin of electroretinogram amplitude growth during light adaptation in pigmented rats.</a> Vis Neurosci. 23, 155-167 (2006).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> J Physiol. 555, 153-173 (2004).</li>
<li>Tremblay, F., Laroche, R. G., Debecker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Electroretinographic+Diagnosis+of+the+Incomplete+Form+of+Congenital+Stationary+Night+Blindness%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">The Electroretinographic Diagnosis of the Incomplete Form of Congenital Stationary Night Blindness.</a> Vision Res. 35, 2383-2393 (1995).</li>
<li>Bayer, A. U., Keller, O. N., Ferrari, F., Maag, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+glaucoma+with+neurodegenerative+diseases+with+apoptotic+cell+death%3A+Alzheimer%27s+disease+and+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Association of glaucoma with neurodegenerative diseases with apoptotic cell death: Alzheimer's disease and Parkinson's disease.</a> Am J Ophthalmol. 133, 135-137 (2002).</li>
<li>Wostyn, P., Audenaert, K., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+abnormal+high+trans-lamina+cribrosa+pressure+difference%3A+A+missing+link+between+Alzheimer%27s+disease+and+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Neurology+and+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">An abnormal high trans-lamina cribrosa pressure difference: A missing link between Alzheimer's disease and glaucoma.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 110, 753-754 (2008).</li>
<li>Yucel, Y. H., Zhang, Q. A., Weinreb, R. N., Kaufman, P. L., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+retinal+ganglion+cell+loss+on+magno-%2C+parvo-%2C+koniocellular+pathways+in+the+lateral+geniculate+nucleus+and+visual+cortex+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of retinal ganglion cell loss on magno-, parvo-, koniocellular pathways in the lateral geniculate nucleus and visual cortex in glaucoma.</a> Prog Retin Eye Res. 22, 465-481 (2003).</li>
<li>Gupta, N., Yucel, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+changes+can+we+expect+in+the+brain+of+glaucoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Survey+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">What changes can we expect in the brain of glaucoma patients.</a> Survey of Ophthalmology. 52, 122-126 (2007).</li>
<li>Kong, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+aging+and+diet+restriction+on+retinal+function+during+and+after+acute+intraocular+pressure+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Impact of aging and diet restriction on retinal function during and after acute intraocular pressure injury.</a> Neurobiol Aging. 33, 1115-1125 (2012).</li>
<li>Bui, B. V., Sinclair, A. J., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electroretinograms+of+albino+and+pigmented+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Aust+N+Z+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Electroretinograms of albino and pigmented guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Aust N Z J Ophthalmol. 26, Suppl 1 98-100 (1998).</li>
<li>Jobling, A. I., Wan, R., Gentle, A., Bui, B. V., McBrien, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+and+choroidal+TGF-beta+in+the+tree+shrew+model+of+myopia%3A+isoform+expression%2C+activation+and+effects+on+function%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Retinal and choroidal TGF-beta in the tree shrew model of myopia: isoform expression, activation and effects on function.</a> Exp Eye Res. 88, 458-466 (2009).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+the+dark-adapted+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Dissecting the dark-adapted electroretinogram.</a> Doc Ophthalmol. 95, 187-215 (1998).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rod-driven+a-wave+of+the+dark-adapted+mammalian+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">The rod-driven a-wave of the dark-adapted mammalian electroretinogram.</a> Prog Retin Eye Res. 39, 1-22 (2014).</li>
<li>Hudnell, H. K., Boyes, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+comparability+of+rat+and+human+visual-evoked+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">The comparability of rat and human visual-evoked potentials.</a> Neurosci Biobehav Rev. 15, 159-164 (1991).</li>
<li>Charng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conscious+wireless+electroretinogram+and+visual+evoked+potentials+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Conscious wireless electroretinogram and visual evoked potentials in rats.</a> PLoS One. 8, e74172(2013).</li>
<li>Hetzler, B. E., Berger, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ketamine-Induced+Modification+of+Photic+Evoked-Potentials+in+the+Superior+Colliculus+of+Hooded+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Ketamine-Induced Modification of Photic Evoked-Potentials in the Superior Colliculus of Hooded Rats.</a> Neuropharmacology. 23, 473-476 (1984).</li>
</ol>

Gli autori non hanno divulgazioni rilevanti per questo lavoro.

L&#39;ERG e VEP sono misure oggettive della funzione visiva dalla retina e la corteccia, rispettivamente. Il vantaggio di registrazione simultanea è che una visione più completa di tutto il percorso visivo è prestata. In particolare, le informazioni complementari da loro valutazione concomitante potrebbe fornire una più chiara delimitazione del sito di lesioni in via visiva (per esempio, per i disturbi con sovrapposizione ERG ancora distinto VEP manifestazioni 18, quando neuropatia ottica può coesist...

Misura della elettroretinogramma (ERG) e potenziali evocati visivi (PEV) fornire valutazioni quantitative utili dell&#39;integrità della via visiva. L&#39;ERG misura le risposte elettriche della retina alla stimolazione luminosa, mentre il VEP misura corrispondente integrità funzionale delle vie visive dalla retina alla corteccia visiva primaria seguendo lo stesso evento luce. Questo manoscritto descrive un protocollo per la registrazione e analisi delle risposte ERG e PEV in un modello di laboratorio comunemente usato, il ratto. Il ERG fornisce un indice della integrità funzionale di un certo numero di classi principali di cellule retiniche quantificando risposta elettrica lordo del retina un lampo di luce. Una serie coordinata di flussi ionici iniziata da insorgenza luce e offset, producono cambiamenti rilevabili in tensione che può essere misurato con elettrodi di superficie posizionati al di fuori dell&#39;occhio. La forma d&#39;onda risultante rappresenta la combinazione di un séRies di componenti ben definiti, che differiscono in ampiezza, i tempi e la frequenza. Una importante ricerca ha dimostrato che questi componenti sono relativamente ben conservati tra i molti retine vertebrati e che i componenti possono essere separati l&#39;uno dall&#39;altro. Selezionando giudiziosamente lo stimolo (stimolo flash, sfondo, intervallo interstimulus) le condizioni e la scelta di caratteristiche specifiche della forma d&#39;onda composita di analizzare si può essere sicuri di tornare una misura di un gruppo specifico di cellule retiniche 1,2. Queste caratteristiche sono alla base del programma di utilità e quindi le applicazioni diffuse della ERG come una misura non invasiva della funzione della retina. Questo manoscritto si concentra sulla metodologia per misurare l&#39;ERG e analizzando le sue caratteristiche per restituire informazioni su alcune delle principali classi di cellule nella retina, vale a dire fotorecettori (il componente PIII), cellule bipolari (il componente PII) e le cellule gangliari della retina (il positivo risposta soglia scotopica o PSTR). <p class= &quot;Jove_content&quot;&gt; Il VEP offre un saggio della risposta corticale alla luce; prima proveniente dalla retina e successivamente comunicato seriale tramite il nervo ottico, tratto ottico, talamo (genicolato laterale nucleo, LGN) e la radiazione ottica all&#39;area V1 della corteccia 3. Nei roditori, la maggioranza (90 - 95%) di fibre del nervo ottico da ciascun occhio decussate 4 e innervano controlaterale cervello medio. A differenza della ERG, è ancora possibile attribuire diversi componenti del VEP a classi cellulari specifici, 5 cambia così ovunque lungo il percorso visivo potrebbe influenzare la forma d&#39;onda VEP. Tuttavia, il VEP è una misura utile non invasiva di prestazioni visive e dell&#39;integrità via visiva. Il VEP, quando utilizzato in combinazione con l&#39;ERG, può fornire una valutazione più completa del sistema visivo (cioè, retina / via visiva). ERG e PEV registrazioni possono essere condotte isolatamente o in combinazione, a seconda del applicazione. La metodologia descritta in questo documento permette la valutazione contemporanea di elettrofisiologia evocati visivi della retina e corticale da entrambi gli occhi e entrambi gli emisferi nei ratti anestetizzati. Questo è un modo utile per valutare in modo più completo la funzione della retina e gli effetti a monte che i cambiamenti nella funzione retinica possono avere sulla funzione corticale evocati visivi.

<table><tbody><tr><td>Clip a coccodrillo</td><td>marca generica</td><td>HM3022</td><td>Clip da 26 mm in acciaio inox per il collegamento di elettrodi a vite VEP ai cavi</td></tr><tr><td>Bioamplificatore</td><td>ADInstruments</td><td>ML 135</td><td>Per amplificare i segnali ERG e VEP</td></tr><tr><td>Carbossimetilcellulosa sodica 1,0%</td><td>Allergan</td><td>CAS 0009000-11-7</td><td>Fluido viscoso per migliorare la qualità del segnale dell'elettrodo ERG attivo</td></tr><tr><td>Carprofene 0,5%</td><td>Pfizer Animal Health Group</td><td>CAS 53716-49-7</td><td>Nome commerciale: Rimadyl iniettabile (50 mg/ml). Per l'analgesia post-operatoria, diluito allo 0,5% (5 mg/ml) in soluzione fisiologica normale</td></tr><tr><td>Cloresadina 0,5%</td><td>Orion Laboratories</td><td>27411, 80085</td><td>Per la disinfezione degli strumenti chirurgici</td></tr><tr><td>Bagno d'acqua circolante</td><td>Lauda-K&ouml; nigshoffen</td><td>MGW Lauda</td><td>Per il mantenimento della temperatura corporea dell'animale anestetizzato durante l'intervento chirurgico e le registrazioni elettrofisiologiche</td></tr><tr><td>Amalgama dentale</td><td>DeguDent GmbH</td><td>64020024</td><td>Per incastrare il gruppo elettrodo-cranio per renderlo più robusto</td></tr><tr><td>Fresa dentale</td><td>Storz Instruments, Bausch e Lomb</td><td>#E0824A</td><td>Una testa di perforazione in miniatura di ~ 0,7 mm di diametro per praticare un piccolo foro nel cranio su ogni emisfero per impiantare viti VEP</td></tr><tr><td>Trapano</td><td>Bosch</td><td>Dremel serie 300</td><td>Un trapano automatico per la trapanazione</td></tr><tr><td>Elettrodo di piombo</td><td>Erba Telefattore&nbsp;</td><td>F-E2-30</td><td>Cavi in platino per il collegamento di elettrodi a filo d'argento all'amplificatore</td></tr><tr><td>Gabbia di Faraday</td><td>su misura</td><td></td><td>Garantisce la prova della luce per mantenere l'adattamento al buio. Racchiude la configurazione Ganzfeld per migliorare il rapporto segnale/rumore</td></tr><tr><td>Tamponi di garza</td><td>Multigate Medical Products Pty Ltd</td><td>57-100B</td><td>Per asciugare l'incisione chirurgica e la superficie esposta del cranio durante l'intervento chirurgico</td></tr><tr><td>Sfera di integrazione Ganzfeld</td><td>Photometric Solutions International</td><td></td><td>Stimolatore di luce progettato su misura: diametro 36 mm, apertura 13 cm</td></tr><tr><td>Velcro</td><td>VELCRO Australia Pty Ltd</td><td>VELCRO Marca Riutilizzabile Avvolgimento</td><td>Chiusura a strappo per fissare gli elettrodi e l'animale sulla piattaforma di registrazione</td></tr><tr><td>Isoflurano 99,9%</td><td>Abbott Australasia Pty Ltd</td><td>CAS 26675-46-7</td><td>Nome proprietario: Isoflo(TM) Anestetico per inalazione. Anestetico per inalazione di grado farmaceutico miscelato con ossigeno gassoso per chirurgia implantare elettrodi VEP</td></tr><tr><td>Ketamina&nbsp;</td><td>Troy Laboratories</td><td>Ilium Ketamil</td><td>Nome proprietario: Ketamil Injection, Marca: Ilium. Anestetico di grado farmaceutico per la registrazione elettrofisiologica</td></tr><tr><td>Luxeon LED</td><td>Phillips Lighting Co.</td><td></td><td>Per la stimolazione luminosa venti LED da 5 W e uno da 1 W.</td></tr><tr><td>Micromanipolatore</td><td>Harvard Apparatus</td><td>BS4 50-2625</td><td>Mantiene l'elettrodo attivo ERG durante le registrazioni</td></tr><tr><td>Elettrodo ad ago</td><td>Erba Telefattore&nbsp;</td><td>F-E2-30</td><td>Inserito per via sottocutanea nella coda per fungere da elettrodo di terra sia per l'ERG che per il VEP</td></tr><tr><td>Fenilefrina 2,5% minimi.</td><td>Bausch and Lomb</td><td>CAS 61-76-7</td><td>Instillato con Tropicamide per ottenere la massima dilatazione per la registrazione ERG</td></tr><tr><td>Iodio povidone 10%</td><td>Sanofi-Aventis</td><td>CAS 25655-41-8</td><td>Nome proprietario: Betadine, Antisettico per preparare la pelle rasata per l'intervento chirurgico 10%, 500 ml</td></tr><tr><td>Sistema di acquisizione dati Powerlab</td><td>ADInstruments</td><td>ML 785</td><td>Controlla i LED</td></tr><tr><td>Proxymetacaina 0,5%</td><td>Alcon Laboratories& nbsp;</td><td>CAS 5875-06-9</td><td>Per l'anestesia corneale durante le registrazioni ERG</td></tr><tr><td>Soluzione salina</td><td>Gelflex</td><td></td><td>Non iniettabile, per elettrodi a filo d'argento galvanica</td></tr><tr><td>Scope Software</td><td>ADInstruments</td><td>versione 3.7.6</td><td>Attiva simultaneamente lo stimolo tramite il sistema Powerlab e raccoglie i dati</td></tr><tr><td>Argento (filo rotondo sottile)</td><td>A& E metallo</td><td>0,3 mm</td><td>Utilizzato per realizzare elettrodi ERG attivi e inattivi e l'elettrodo VEP inattivo</td></tr><tr><td>Viti a spirale in acciaio inossidabile&nbsp;</td><td>MicroFasterners</td><td></td><td>0,7 mm di diametro dello stelo e 3 mm di lunghezza da impiantare sulla corteccia visiva primaria e fungere da elettrodi VEP attivi</td></tr><tr><td>Telaio stereotassico</td><td>David Kopf</td><td>Modello 900</td><td>Uno strumento stereotassico per piccoli animali per localizzare le cortecce visive primarie secondo Paxinos & L'atlante del cervello di ratto di Watson del 2007 coordina</td></tr><tr><td>la lama chirurgica</td><td>Swann-Morton Ltd.</td><td>0206</td><td>Per incidere l'area della pelle che si sovrappone alla corteccia visiva primaria per impiantare gli elettrodi VEP</td></tr><tr><td>Sutura</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd</td><td></td><td>3-0 sutura intrecciata di seta non assorbibile, per la retrazione della pelle durante l'intervento chirurgico di impianto di elettrodi VEP</td></tr><tr><td>Unguento per gli occhi alla tobramicina 0,3%</td> <td>Alcon Laboratories</td><td>CAS 32986-56-4</td><td>Nome proprietario: Tobrex. Unguento antibiotico profilattico applicato intorno alla ferita cutanea dopo l'intervento chirurgico</td></tr><tr><td>Tropicamide 0,5%</td> <td>Alcon Laboratories&nbsp;</td><td>CAS 1508-75-4</td><td>Nome commerciale: 0,5% Mydriacyl eye drop, instillato per ottenere la midriasi per la registrazione ERG</td></tr><tr><td>Xilazina</td><td>Troy</td><td>Laboratories Ilio Xilazil-100</td><td>Anestetico di grado farmaceutico per la registrazione elettrofisiologica</td></tr><tr><td>Punta per pipette</td><td>Eppendorf Pty Ltd</td><td>0030 073.169</td><td>Eppendorf epTIPS 100 - 5.000 ml, per elettrodi su misura</td></tr><tr><td>Microsoft Office Excel</td><td>Microsoft</td><td>versione 2010</td><td>foglio di calcolo software per l'analisi dei dati</td></tr><tr><td>Lethabarb Eutanazia Iniezione</td><td>Virbac (Australia) Pty Ltd</td><td>LETHA450</td><td>325 mg/ml pentobarbital sodico per eutanasia rapida</td></tr></tbody></table>

registrazione simultanea di elettroretinografia e potenziali evocati visivi nei ratti anestetizzati

Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats

L'elettroretinogramma (ERG) e il potenziale evocato visivo (VEP) sono comunemente usati per valutare l'integrità del percorso visivo. L'ERG misura le risposte elettriche della retina alla stimolazione luminosa, mentre il VEP misura la corrispondente integrità funzionale delle vie visive dalla retina alla corteccia visiva primaria a seguito dello stesso evento luminoso. La forma d'onda ERG può essere suddivisa in componenti che riflettono le risposte di diverse classi di cellule retiniche, neuronali e gliali. I componenti precoci della forma d'onda VEP rappresentano l'integrità del nervo ottico e dei centri corticali superiori. Queste registrazioni possono essere condotte in isolamento o insieme, a seconda dell'applicazione. La metodologia descritta in questo articolo consente la valutazione simultanea dell'elettrofisiologia degli evocati visivi retinici e corticali da entrambi gli occhi e da entrambi gli emisferi. Questo è un modo utile per valutare in modo più completo la funzione retinica e gli effetti a monte che i cambiamenti nella funzione retinica possono avere sulla funzione corticale evocata visivamente.

L&#39;ERG un onda (&gt; -1.38 log cd.sm -2), b-onde (&gt; - 4,99 log cd.sm -2) STR (&lt;- 4,99 log cd.sm -2) e le PEV (&gt; - 0,52 cd.sm log -2) sono state registrate contemporaneamente (Figura 1 e 3). Al molto dim lampeggia, un STR positivo (PSTR) è visto a circa 110 msec dopo il flash, e STR ​​negativo (nSTR) in circa 220 msec (Figure 1 e 2). Un ERG con un grande b-wave, picchi tra 50 a 100 msec dopo l&#39;in...

Questo protocollo descrive la misurazione simultanea dell'elettroretinogramma e dei potenziali evocati visivi in ratti anestetizzati.

Registrazione simultanea di elettroretinografia e Potenziali evocati visivi nei ratti anestetizzati

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the ...

L'obiettivo generale di questa procedura è misurare simultaneamente l'elettroretinogramma e il potenziale evocato visivo in un ratto. Questo metodo può contribuire a rispondere a domande fondamentali nel campo delle neuroscienze della via ottica, ad esempio se l'invecchiamento o determinate malattie influenzino specifici componenti del percorso visivo.Il principale vantaggio di questa tecnica è che consente una valutazione completa della funzione retinica e del suo impatto diretto sulla funzione corticale evocata visiva. Per iniziare questa procedura, preparare in anticipo gli elettrodi inattivi per ERG su misura tagliando un tratto di filo d'argento lungo 70 millimetri e formando un anello di otto millimetri di diametro per circondare l'occhio del ratto. Preparare un cerchio uniforme e regolare le dimensioni dell'anello modellandolo su una punta di pipetta da un millimetro.Questo è importante perché un anello troppo piccolo potrebbe aumentare involontariamente la pressione intra-articolare, mentre un anello di dimensioni eccessive può aumentare la variabilità dei segnali. Successivamente, preparare l'elettrodo inattivo personalizzato per VEP tagliando un tratto di argento lungo 70 millimetri e formando un'ellisse di otto millimetri di diametro per agganciarlo agli incisivi del ratto.Quindi, preparare in anticipo gli elettrodi attivi personalizzati per l'ERG tagliando un tratto di filo d'argento lungo 30 millimetri e formando un piccolo anello dal diametro di circa uno-due millimetri, che verrà utilizzato per contattare delicatamente la cornea del ratto minimizzando le abrasioni corneali. Successivamente, fissare saldamente gli elettrodi ai cavi degli elettrodi intrecciando il filo d'argento con il filo interno esposto. Isolare la parte metallica esposta in eccesso con del nastro adesivo per ridurre gli artefatti fotovoltaici.Per gli elettrodi attivi ERG, si possono applicare ulteriori strati di nastro adesivo isolante per ottenere un rivestimento più spesso e rigido, in modo che l'elettrodo sia più facile da tenere con un micromanipolatore. Su ciascun elettrodo inattivo ERG, applicare un piccolo pezzo di velcro sul nastro adesivo per consentire un fissaggio stabile alla cinghia cervicale del roditore. Successivamente, per ciascun elettrodo attivo VEP, collegare una pinza a coccodrillo al filo interno del cavo dell'elettrodo.Immediatamente prima delle registrazioni, elettrodepositare con cloruro le superfici esposte dei fili d'argento per migliorare la conduzione del segnale. A tale scopo, collegare il catodo al terminale negativo della batteria e immergere l'altra estremità nella soluzione salina. Successivamente, immergere la punta di argento sul filo dell'anodo nella soluzione salina normale e collegare l'altra estremità di questo filo elettrodo al terminale positivo di una batteria da nove volt.Disconnetterli dopo 20 secondi e la punta in argento del filo dell'elettrodo dovrebbe risultare uniformemente ricoperta di bianco. Ripetere la procedura di clorurazione per tutti gli elettrodi ERG e VEP in argento. In questo procedimento, disinfettare l'area rasata di un animale anestetizzato con iodopovidone al 10% per tre volte.Eseguire un'incisione sagittale lungo la linea mediana della testa con un bisturi ed escindere un cerchio di tessuto dermico del diametro di 20 millimetri per esporre l'osso cranico. Successivamente, rimuovere il periostio sottostante raschiando ed asciugando con garza, al fine di esporre le suture craniche coronale e sagittale. Praticare due fori attraverso il cranio in entrambi gli emisferi.Avvitare le viti in acciaio inossidabile nelle due forature preesistenti fino a una profondità di un millimetro per garantire un'ancoraggio solido. Successivamente, preparare l'area chirurgica per l'amalgama dentale asciugando l'osso cranico con garza e retrudendo la cute con due suture. In seguito, applicare l'amalgama dentale sull'osso cranico esposto per fissare saldamente gli elettrodi a vite, assicurando che circa 1,5 millimetri delle viti rimangano esposti per la registrazione.Successivamente, rimuovere i punti di trazione. Per le registrazioni scotopiche, tutte le procedure vengono eseguite in una stanza buia. A scopo illustrativo, il posizionamento dell'elettrodo viene effettuato qui sotto illuminazione normale dell'ambiente.L'animale è stato tenuto al buio per 12 ore ed anestetizzato con chetamina e xilazina. Dopo la dilatazione della pupilla e l'anestesia topica, posizionare l'elettrodo VEP inattivo dietro i denti incisivi inferiori. Successivamente, posizionare l'animale sulla piattaforma ERG di fronte alla cupola Ganzfeld situata all'interno della gabbia di Faraday.Fissare l'animale alla piattaforma con una striscia di velcro posizionata saldamente ma non troppo stretta sulla nuca. Successivamente, posizionare gli elettrodi inattivi per l'ERG circondando in modo non invasivo l'anello sclerale intorno all'equatore degli occhi, approssimativamente a tre metri dietro il limbo.Stabilizzare posizionando l'elettrodo sul nastro adesivo a strappo intorno alla nuca. Ripetere la procedura per l'occhio controlaterale. A questo punto, fissare le elettrodi attive per il VEP collegando le clip a coccodrillo alle viti in acciaio inossidabile precedentemente impiantate sul cranio.Prima del posizionamento dell'elettrodo attivo per l'ERG, applicare una piccola goccia di sodio carbossimetilcellulosa al 1% sull'elettrodo per migliorare la qualità del segnale. Posizionare gli elettrodi attivi per l'ERG in modo che tocchino leggermente la superficie corneale centrale, utilizzando un micromanipolatore fissato al braccio stereotassico appositamente costruito. Assicurarsi che la sodio carbossimetilcellulosa entri in contatto esclusivamente con la cornea e non con la sclera, rimuovendo con delicatezza il liquido in eccesso.Inserire quindi da due a cinque millimetri dell'ago in acciaio inossidabile dell'elettrodo a massa sottocutaneamente nella coda. Avvicinare la piattaforma al contenitore Ganzfeld e assicurarsi che gli occhi dell'animale siano allineati con l'apertura del contenitore per consentire un'illuminazione uniforme di entrambe le retine. Successivamente, chiudere la gabbia di Faraday per ridurre il rumore di fondo.Utilizzando il protocollo sopra descritto, è possibile registrare una serie di forme d'onda dell'ERG in risposta a una gamma di stimoli, con il lampo più debole mostrato in basso e il più intenso in alto. A livelli di luce molto deboli, è possibile registrare le risposte soglia scotopiche. Aumentando l'intensità dello stimolo, le forme d'onda diventano dominate dall'onda B e successivamente emerge l'onda A di polarità negativa, nei stimoli più intensi.La funzione dei fotorecettori a bastoncino può essere valutata utilizzando un P3 per modellare l'onda A. Questa figura mostra che l'ampiezza del P2 aumenta con l'aumentare dell'energia dello stimolo. La funzione delle cellule bipolari a bastoncino può essere valutata modellando le teorie della risposta all'intensità del P2 del bastoncino con una funzione di Naka-Rushton.La funzione delle cellule gangliari retiniche viene analizzata a basse energie luminose e quantificata in base all'ampiezza e al tempo di picco del pSTR. La funzione delle cellule bipolari dei coni viene stimolata mediante un paradigma di stimolazione a doppio lampo e quantificata in base all'ampiezza e al tempo di picco del P2 dei coni. L'analisi dell'ampiezza del potenziale evocato visivo (VEP) si basa sull'ampiezza picco-a-trough e trough-a-picco, che fornisce il tempo di risposta di queste componenti.L'ampiezza delle forme d'onda del VEP aumenta all'aumentare dell'energia dello stimolo. Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere eseguita in circa 30-45 minuti, escluso il tempo necessario per preparare l'elettrodo, posizionarlo e per l'adakadattamento. Nel tentativo di eseguire questa procedura, è particolarmente importante prestare attenzione alla precisione con cui si posizionano gli elettrodi e dedicare un tempo sufficiente all'adakadattamento.Dopo aver eseguito questa procedura, è possibile effettuare altre procedure come modifiche della malattia o terapie per rispondere a domande specifiche. Dopo aver visto questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione di come preparare e posizionare gli elettrodi, nonché di come registrare ed analizzare le forme d'onda dell'ERG e del VEP.

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Questo video dimostra la preparazione di un modello di ratto per studiare la salute della retina e l'integrità del percorso visivo. Il potenziale evocato visivo e il riferimento per l'elettroretinografia e gli elettrodi attivi sono collegati al ratto, seguiti dall'allineamento della piattaforma con il ratto davanti alla ciotola di Ganzfeld per un'illuminazione uniforme della retina e dalla chiusura della gabbia di Faraday per evitare interferenze esterne.

Preparazione di un modello di ratto per valutare l'integrità del percorso visivo utilizzando una configurazione di elettrofisiologia

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Registrazione dei potenziali evocati visivi tramite gli elettrodi del cranio in un modello di ratto

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Registrazioni elettroencefalografiche concomitanti e di potenziale di campo locale in un ratto anestetizzato

Questo video dimostra come registrare l'elettroretinogramma (ERG) e il potenziale evocato visivo (VEP) in un ratto cosciente. Il ratto, con elettrodi impiantati chirurgicamente, viene prima adattato al buio. Dopo aver applicato le gocce dilatanti, l'animale viene posto in un sistema di ritenuta e posizionato in una ciotola di Ganzfeld. I segnali ERG e VEP vengono quindi registrati.

Registrazione dell'elettroretinogramma e del potenziale evocato visivo in un ratto

Questo video mostra la registrazione di un elettroretinogramma ad accoppiamento diretto (DC-ERG) su un epitelio pigmentato retinico (RPE) di topo anestetizzato adattato al buio. Dopo aver applicato le gocce dilatanti, l'animale viene posto in una configurazione di registrazione e l'elettrodo capillare riempito con un tampone salino viene posizionato sulla cornea. Dopo aver stabilito la linea di base, viene registrato il DC-ERG.

Registrazione dell'elettroretinogramma ad accoppiamento diretto dell'epitelio pigmentato retinico in un topo

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Utilizzando il Elettroretinogramma per valutare la funzione in roditori Retina e gli effetti protettivi del Remote Limb ischemico precondizionamento

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Registrazione potenziale evocato visivo in un modello murino di sperimentale del nervo ottico demielinizzazione

Mostriamo le procedure di impianto e di registrazione chirurgiche per misurare i segnali elettrofisiologici visivi dall'occhio (elettroretinogramma) e il cervello (visivo potenziale evocato) nei ratti coscienti, che è più simile alla condizione umana in cui le registrazioni sono effettuate senza anestesia confonde.

L&#39;impianto e la registrazione di Wireless Elettroretinogramma e potenziale visivo evocato ratto conscio

Questo protocollo descrive un metodo semplice per la registrazione simultanea di co-localizzato l'elettroencefalografia (EEG) e multi-laminare locale campo potenziale in un ratto anestetizzato. Un foro della bava nel cranio per l'inserimento di un microelettrodo è indicato per produrre distorsione trascurabile del segnale EEG.

Registrazione simultanea di co-localizzato elettroencefalografia e potenziali di campo locale nel roditore

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Registrazione elettroretinogramma per neonati e bambini in anestesia per ottenere un adattamento oscuro ottimale e standard internazionali

L'obiettivo di questo protocollo è quello di caratterizzare un nuovo modello di neurodegenerazione glaucomatosa basato sulla cauterizzazione termica a 360° del plesso vascolare limbare, inducendo ipertensione oculare subacuta.

Cauterizzazione a cerchio completo del plesso vascolare limbare per il glaucoma indotto chirurgicamente nei roditori

Impara a registrare simultaneamente elettroretinografia e potenziali evocati visivi in ratti anestetizzati. Questo metodo consente di valutare la funzione retinica e corticale per studiare gli effetti dell'invecchiamento sulle vie visive.

Registrazione simultanea di elettroretinografia e Potenziali evocati visivi nei ratti anestetizzati

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