Name: Solubilità dei composti idrofobici in soluzione acquosa utilizzando combinazioni di autoassemblanti peptidi e aminoacidi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-09-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 8 s
Description: Scopri come aumentare la solubilità di composti idrofobici in soluzione acquosa utilizzando peptidi autoassemblanti e aminoacidi. Questo metodo elimina i co-solventi tossici per applicazioni cliniche.

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Questo lavoro è supportato da istituti di ricerca di salute canadese, sovvenzioni di funzionamento 42546 MOP e MOP-119514.

1. preparazione delle soluzioni dell'amminoacido <ol><li>preparare ed etichetta due provette di centrifuga a fondo conico da 50 mL per ogni amminoacido (uno ciascuno per entrambi &#34; basso &#34; e &#34; alta &#34; concentrazioni).</li>
	<li>Preparare un pallone da 2 L grande contenente acqua purificata (18,2 MΩ·cm a 25 ° C).</li>
	<li>Calcolare la quantità di ciascun amminoacido (in grammi) per raggiungere la concentrazione desiderata e pesare la quantità appropriata di amminoacido in loro tubi di centrifuga rispettivi 50 mL utilizzando una spatola. 
	Nota: Per la &#34; alta &#34; concentrazione dei due amminoacidi caricati negativamente, PBS viene utilizzato al posto dell'acqua. Non potremmo aumentare le loro concentrazioni a causa della loro solubilità in acqua bassa e utilizzando PBS invece di acqua aiuta a mantenere il pH basso. Inoltre, i calcoli di concentrazione sono stati ottenuti utilizzando un volume finale di 40 mL per ogni soluzione di aminoacidi. Tutte le concentrazioni di aminoacidi sono descritti nella tabella 3. Assicuratevi di risciacquare la spatola tra gli aminoacidi per evitare la contaminazione. Si consiglia un risciacquo con acqua, quindi asciugare con etanolo al 70%.</li>
	<li>Aggiungere 40 mL di acqua purificata (o PBS) in ogni provetta 50 mL utilizzando una pipetta sierologica. Coprire le provette e vortexare o agitare vigorosamente fino a completa dissoluzione. Acqua bagno sonicazione (temperatura ambiente, 130 W, 40 kHz) può essere utilizzato anche per aiutare nel processo di solubilità. 
	Nota: Le seguenti soluzioni di aminoacidi sono sensibili alla luce e dovrebbe essere coperto con carta stagnola: triptofano, fenilalanina e tirosina (che consistono di strutture simili a anello aromatiche) e la cisteina (reattiva - gruppo SH).</li>
</ol> 2. Preparazione delle soluzioni SAP-AA <ol><li>preparare 20 mL fiale di scintillazione per l'auto-assemblaggio peptidi. Per un determinato peptide autoassemblanti, preparare un flaconcino per soluzione preparata dell'amminoacido (ogni combinazione sarà effettuato in un flaconcino separato).</li>
	<li>Utilizzando una bilancia analitica ad alte prestazioni (con risoluzione fino a 0,1 mg o meno), pesano circa 1 ± 0,2 mg di peptide nella parte inferiore di ogni flacone. Tappo dopo aver soppesato e registrare il peso esatto del peptide sul Cap.</li>
	<li>Dispensare il volume appropriato di soluzione dell'aminoacido (preparato nella sezione 1) in ogni flaconcino contenente il peptide, al fine di raggiungere la concentrazione desiderata di auto-assemblaggio del peptide (0,1 mg/mL per i peptidi lunghi con una lunghezza di 16 aminoacidi, o 0,2 mg/mL per più brevi peptidi con una lunghezza di 8 aminoacidi).</li>
	<li>Sonicate per 10 min in un sonicatore di vasca del acqua (130 W, 40 kHz) a temperatura ambiente, garantendo le soluzioni all'interno di flaconcini sono completamente immersi nel bagno d'acqua.</li>
</ol> 3. Preparazione del farmaco-DMSO o droga-etanolo Stock soluzioni <ol><li>Combine 1 mg di farmaco (in questo caso, la curcumina con 100% DMSO) e un altro 1 mg con etanolo al 100% per creare due soluzioni stock. 
	Nota: Abbiamo aggiunto 200 µ l di DMSO e 400 µ l etanolo a fare scorte di DMSO-curcumina ed etanolo-curcumina che erano 5 mg/mL e 2,5 mg/mL, rispettivamente, a causa della diversa solubilità in ogni solvente; Tuttavia, è importante notare che la concentrazione di stock dovrebbe essere regolata secondo la droga idrofobica di interesse. Fattori quali la solubilità di droga e concentrazione biologica efficace sono importanti nel determinare questo valore. Inoltre, tenete a mente che il brodo sarà diluito 100 volte e 50 in formulazioni di DMSO ed etanolo, rispettivamente, quando combinato con le soluzioni SAP-AA (Vedi sezione 4). Può essere preferito per preparare un volume maggiore di magazzino in base al numero di formulazioni richiesto &#8211; in questo caso, potrebbe essere utilizzato più di 1 mg di farmaco. Lo stock possa essere conservato a-20 ° C; scongelare il ghiaccio e agitare prima dell'uso.</li>
	<li>Vortex fiale per 15 s per sciogliere completamente il farmaco.</li>
</ol> 4. Preparazione delle formulazioni di droga <ol><li>preparare chiaro, microcentrifuga da 1,5 mL per ogni formulazione. Assicurarsi di etichettare provette con la modalità auto-assemblanti peptidi, aminoacidi (e concentrazione) e co-solvente.</li>
	<li>Aggiungere 10 µ l di droga-DMSO stock, o magazzino di droga-etanolo 20 µ l per microcentrifuga appropriato.</li>
	Le provette microcentrifuga di <li>aggiungere 990 µ l di soluzioni acide di SAP-AA per l'appropriato contenenti droga-DMSO stock e 980 µ l a quelli contenenti Stock in droga-etanolo. Questo produce formulazioni di farmaci 1 mL con 1% di DMSO o 2% di etanolo. 
	Nota: La concentrazione finale di tutte le formulazioni della curcumina era 0,5 mg/mL secondo il protocollo. Ancora una volta, questo può variare quando utilizzando altri composti idrofobici e/o cominciando con una diversa concentrazione di stock (Vedi punto 3.1)</li> <li>Vortex vigorosamente per 30 s e permettono formulazioni a riposare per 30 min.</li></ol>
 5. test di solubilità <ol><li>dopo il periodo di riposo, vortexare vigorosamente nuovamente per 30 s.</li>
	<li>Centrifugare le formulazioni a 14.220 x g per 1 min.</li>
	<li>Analizzare il fondo delle provette microcentrifuga per precipitazione (di visualizzazione).</li>
</ol>

<ol><li>Holmes, T. C., de Lacalle, S., Su, X., Liu, G., Rich, A., Zhang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extensive+neurite+outgrowth+and+active+synapse+formation+on+self-assembling+peptide+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Extensive neurite outgrowth and active synapse formation on self-assembling peptide scaffolds.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 97 (12), 6728-6733 (2000).</li>
<li>Davis, M. E., Motion, J. P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injectable+self-assembling+peptide+nanofibers+create+intramyocardial+microenvironments+for+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Injectable self-assembling peptide nanofibers create intramyocardial microenvironments for endothelial cells.</a> Circulation. 111 (4), 442-450 (2005).</li>
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<li>Zhang, S., Holmes, T., Lockshin, C., Rich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+assembly+of+a+self-complementary+oligopeptide+to+form+a+stable+macroscopic+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Spontaneous assembly of a self-complementary oligopeptide to form a stable macroscopic membrane.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 90 (8), 3334-3338 (1993).</li>
<li>Bowerman, C. J., Nilsson, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-assembly+of+amphipathic+%CE%B2-sheet+peptides%3A+insights+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Biopolymers%22%5BJournal%5D)">Self-assembly of amphipathic β-sheet peptides: insights and applications.</a> Biopolymers. 98 (3), 169-184 (2012).</li>
<li>Amidon, G., Lennernäs, H., Shah, V., Crison, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+theoretical+basis+for+a+biopharmaceutic+drug+classification%3A+the+correlation+of+in+vitro+drug+product+dissolution+and+in+vivo+bioavailability%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm.+Res%22%5BJournal%5D)">A theoretical basis for a biopharmaceutic drug classification: the correlation of in vitro drug product dissolution and in vivo bioavailability.</a> Pharm. Res. 12 (3), 413-420 (1995).</li>
<li>Shi, Y., Porter, W., Merdan, T., Li, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+intravenous+delivery+of+poorly+water-soluble+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin.+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Recent advances in intravenous delivery of poorly water-soluble compounds.</a> Expert Opin. Drug Deliv. 6 (12), 1261-1282 (2009).</li>
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<li>Wu, Y., Sadatmousavi, P., Wang, R., Lu, S., Yuan, Y., Chen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-assembling+peptide-based+nanoparticles+enhance+anticancer+effect+of+ellipticine+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Nanomed%22%5BJournal%5D)">Self-assembling peptide-based nanoparticles enhance anticancer effect of ellipticine in vitro and in vivo.</a> Int. J. Nanomed. 7, 3221-3233 (2012).</li>
<li>Fung, S. Y., Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/adfm.200800860/abstract">Self-Assembling Peptide as a Potential Carrier for Hydrophobic Anticancer Drug Ellipticine: Complexation, Release and In Vitro Delivery.</a> Adv. Funct. Mater. 19 (1), 74-83 (2009).</li>
<li>Fung, S. -Y., Oyaizu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+of+nanoscale+combinations+of+self-assembling+peptides+and+amino+acids+of+the+Src+tyrosine+kinase+inhibitor+in+acute+lung+injury+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The potential of nanoscale combinations of self-assembling peptides and amino acids of the Src tyrosine kinase inhibitor in acute lung injury therapy.</a> Biomaterials. 32 (16), 4000-4008 (2011).</li>
<li>Pacheco, S., Kanou, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formulation+of+hydrophobic+therapeutics+with+self-assembling+peptide+and+amino+acid%3A+A+new+platform+for+intravenous+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Control.+Release%22%5BJournal%5D)">Formulation of hydrophobic therapeutics with self-assembling peptide and amino acid: A new platform for intravenous drug delivery.</a> J. Control. Release. 239, 211-222 (2016).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Nella procedura di formulazione, ci sono varie fasi critiche e punti da considerare nella risoluzione dei problemi. Innanzitutto, come stiamo lavorando con i vari componenti e concentrazioni, più passaggi di vortice in tutto il protocollo assicurano che tutte le concentrazioni sono uniforme e corretta. Alcune delle soluzioni dell'amminoacido ad alta concentrazione, idrofobo, ancora non può essere completamente sciolta dopo Vortex, e in questo caso, può essere scosso vigorosamente a mano per facilitare il processo. Allo s...

SAPs sono una classe di biomateriali che sono stati studiati estesamente come impalcature 3D in medicina rigenerativa1,2,3,4. Più recentemente, tuttavia, essi sono stati sfruttati come veicoli per la consegna di terapeutica a causa di loro proprietà biologiche uniche5,6,7,8. SAPs naturalmente assemblare in nanostrutture stabile9, fornendo così un mezzo di incapsulamento di droga e di protezione. SAPs sono amphipathic, composto da un modello specifico di ripetizioni dell'aminoacido idrofobico e idrofilico, guida loro auto-assemblaggio9,10 e permettendo loro di servire da mezzo tra idrofobico e idrofilico ambienti. Di conseguenza, per la consegna clinica di farmaci idrofobici – che hanno estremamente bassa biodisponibilità e l'assorbimento nel corpo a causa della mancanza di solubilità in ambienti acquosi11,12 -SAPs sono promettenti come una consegna veicolo. Inoltre, i loro pattern di sequenza implica anche che SAPs può essere razionalmente progettato e realizzato per ottimizzare la compatibilità con qualsiasi dato farmaco o composti (cioè, basato su gruppi funzionali) e agevolare ulteriormente la solubilità.
SAPs sono stati applicati come veicoli di consegna di farmaco efficace in molti in vitro e in vivo le impostazioni13,14,15,16. Hanno anche mostrato biocompatibilità e grande sicurezza. Tuttavia, a causa della bassa osmolarità dei preparativi di SAP-droga, non possono essere utilizzati per iniezioni endovenose come in contesti clinici13. Considerando questo fermo, abbiamo recentemente sviluppato una strategia che combina SAPs con soluzioni di aminoacidi al fine di ridurre l'uso di co-solventi tossici e aumentare l'osmolarità di formulazione e pertanto, rilevanza clinica. Ci ha scelto di usare gli aminoacidi sono gli elementi costitutivi di SAPs, sono già clinicamente accettata, e in combinazione con SAPs, aumentano la solubilità del farmaco idrofobo mentre riducendo la quantità di SAP ha richiesto17,18.
Noi abbiamo esaminato combinazioni di SAP-AA come una piattaforma generalizzata per solubilità farmaco idrofobo e successiva consegna creando una pipeline di screening multifase e applicarlo all'inibitore Src, PP2, come un composto idrofobo di modello. In questo processo, abbiamo esaminato l'effetto di sostituire i componenti della formulazione – in ultima analisi, prove 6 diversi SAPs, tutti i 20 amminoacidi a 2 differenti concentrazioni (bassa e alta; basso basate sulle concentrazioni in applicazioni cliniche esistenti e di alta le concentrazioni erano 2x, 3x o 5x la concentrazione clinica basata sulla solubilità massima di ciascun amminoacido in acqua) e 2 diversi co-solventi – e combinazioni selezionate che solubilizzato PP2 per ulteriori analisi. Questa formulazione di droga ha dimostrato di essere efficace come un veicolo di consegna di droga in coltura delle cellule, come pure in vivo modelli utilizzando le amministrazioni intratracheale sia per via endovenosa. Allo stesso modo, il nostro lavoro ha toccato la versatilità delle combinazioni di SAP-AA in multiplo solubilizzante, strutturalmente diversi composti idrofobici in ambienti acquosi; in particolare, i farmaci rottlerina e curcumina18. Questo manoscritto delinea la formulazione ed analisi delle solubilità di curcumina come un esempio del passaggio primario nella nostra pipeline di screening SAP-AA. Questo protocollo fornisce un modo semplice e riproducibile per schermo per le combinazioni ottimale SAP-AA, che si dissolvono qualsiasi dato composto idrofobo.

<table><tbody><tr><td>EAK16-I</td><td>CanPeptide Inc.</td>Sequenza <td>peptidica personalizzata</td><td>: AEAKAEAKAEAKAEAK, acetilazione N-terminale e amidazione C-terminale, puro al >95% mediante HPLC</td></tr><tr><td>EAK16-II</td><td>CanPeptide Inc.</td>Sequenza <td>peptidica personalizzata</td><td>: AEAEAKAKAEAEAKAK, acetilazione N-terminale e amidazione C-terminale, puro al >95% mediante HPLC</td></tr><tr><td>EAK16-IV</td><td>CanPeptide Inc.</td>Sequenza <td>peptidica personalizzata</td><td>: AEAEAEAEAKAKAKAK, acetilazione N-terminale e ammidazione C-terminale, puro al >95% mediante HPLC</td></tr><tr><td>EFK8-II</td><td>CanPeptide Inc.</td>Sequenza <td>peptidica personalizzata</td><td>: FEFEFKFK, acetilazione N-terminale e amidazione C-terminale, puro al >95% mediante HPLC</td></tr><tr><td>A6KE</td><td>CanPeptide Inc.</td>Sequenza <td>peptidica personalizzata</td><td>: AAAAAAKE, acetilazione N-terminale e amidazione C-terminale, puro al >95% da HPLC</td></tr><tr><td>P6KE</td><td>CanPeptide Inc.</td>Sequenza <td>peptidica personalizzata</td><td>: PPPPPPPKE, acetilazione N-terminale e ammidazione C-terminale, puro al >95% mediante HPLC</td></tr><tr><td>Alanina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7469-100G</td><td>L-Alanina</td></tr><tr><td>Isoleucina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I7403-100G</td><td>L-Isoleucina</td></tr><tr><td>Leucina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L8912-100G</td><td>L-Leucina</td></tr><tr><td>Metionina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M5308-100G</td><td>L-metionina</td></tr><tr><td>prolina</td><td>Sigma-aldrich</td><td>P5607-100G</td><td>L-prolina</td></tr><tr><td>valina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>V0513-100G</td><td>L-valina</td></tr><tr><td>fenilalanina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5482-100G</td><td>L-fenilalanina</td></tr><tr><td>triptofano</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8941-100G</td><td>L-triptofano</td></tr><tr><td>tirosina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8566-100G</td><td>L-tirosina</td></tr><tr><td>Glycine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8790-100G</td><td>L-Glycine</td></tr><tr><td>Asparagin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A4159-100G</td><td>L-Asparagina</td></tr><tr><td>Glutammina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8540-100G</td><td>L-Glutammina</td></tr><tr><td>Serina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7219-100G</td><td>L-Serina</td></tr><tr><td>Treonina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8441-100G</td><td>L-Treonina</td></tr><tr><td>Istidina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H6034-100G</td><td>L-Istidina</td></tr><tr><td>Lisina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L5501-100G</td><td>L-Lisina</td></tr><tr><td>Arginina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A8094-100G</td><td>L-Arginina</td></tr><tr><td>Acido aspartico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7219-100G</td><td>Acido L-aspartico</td></tr><tr><td>Acido glutammico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8415-100G</td><td>Acido</td></tr> <tr><td>L-glutammicoCisteina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C7352-100G</td><td>L-Cisteina</td></tr><tr><td>Dimetil Solfossido</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4540-500ML</td><td>DMSO</td></tr><tr><td>Etanolo</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>277649-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Curcumina</td> anidra <td>Sigma-Aldrich</td><td>08511-10MG</td><td>Farmaco idrofobo, curcumina</td></tr><tr><td>Rottlerin</td><td>EMD Millipore</td><td>557370-10MG</td><td>Farmaco idrofobo, rottlerin</td></tr><tr><td>PP2</td><td>Enzo&nbsp;</td><td>BML-EI297-0001</td><td>Farmaco idrofobo,</td></tr><tr><td>fiale a scintillazione</td> PP2 <td>VWR</td><td>2650-66022-081</td><td>Vetro borosilicato, con tappo a vite, 20 mL. Fiale per pesare il peptide.</td></tr><tr><td>Provette per centrifugazione coniche Falcon 50 mL</td><td>VWR</td><td>352070</td><td>Polipropilene, sterile, 50 mL. Per soluzioni di amminoacidi.</td></tr></tbody></table>

solubilità dei composti idrofobici in soluzione acquosa utilizzando combinazioni di autoassemblanti peptidi e aminoacidi

Solubility of Hydrophobic Compounds in Aqueous Solution Using Combinations of Self-assembling Peptide and Amino Acid

I peptidi autoassemblanti (SAPs) sono promettenti veicoli per la consegna di idrofobo terapeutica per applicazioni cliniche; loro proprietà amphipathic permettono loro di sciogliere composti idrofobici in ambiente acquoso del corpo umano. Tuttavia, autoassemblanti soluzioni del peptide hanno sangue scarsa compatibilità (ad es., bassa osmolarità), ostacolando la loro applicazione clinica attraverso le amministrazioni per via endovenosa. Recentemente abbiamo sviluppato una piattaforma generalizzata per la somministrazione di farmaci idrofobici, che combina SAPs con soluzioni dell'amminoacido (SAP-AA) per aumentare la solubilità del farmaco e aumentare osmolarità di formulazione per raggiungere i requisiti per usi clinici. Questa strategia di formulazione è stata testata nell'ambito di tre composti idrofobici strutturalmente diversi – PP2, rottlerina e curcumina – al fine di dimostrare la sua versatilità. Inoltre, abbiamo esaminato gli effetti di sostituire i componenti di formulazione analizzando 6 diversi succhi, 20 aminoacidi naturalmente esistenti alle alte e basse concentrazioni e due diverse co-solventi dimetil solfossido (DMSO) ed etanolo. La nostra strategia si è dimostrata efficace nell'ottimizzazione di componenti per un dato farmaco idrofobo e funzione terapeutica dell'inibitore formulato, PP2, è stata osservata sia in vitro che in vivo. Questo manoscritto delinea il nostro metodo di formulazione generalizzata attraverso combinazioni di SAP-AA composti idrofobici e l'analisi di solubilità come un primo passo verso l'uso potenziale di queste formulazioni negli studi più funzionale. Includiamo risultati di solubilità rappresentativi per la formulazione della curcumina composto, idrofobo e discutere di come la nostra metodologia funge da piattaforma per futuri studi biologici e modelli di malattia.

Il farmaco idrofobo, curcumina, abbiamo realizzato formulazioni utilizzando tutti i 20 naturalmente esistenti aminoacidi a basse concentrazioni, in combinazione con un solo SAP, EAK16-II, come una prova-de-principio. Abbiamo testato anche formulazioni usando DMSO e etanolo come co-solventi. In totale, questo prodotto 40 formulazioni della curcumina, ciascuna contenente diversi componenti. È importante notare che, nei nostri studi precedenti utilizzando l'inibitore di Src, PP2, abbiamo inc...

Questo protocollo descrive un mezzo clinicamente applicabile di dissoluzione composti idrofobici in ambiente acquoso, utilizzando combinazioni di autoassemblanti soluzioni peptidi e aminoacidi. Il nostro metodo risolve una limitazione importante di terapeutica idrofobica, che mancano mezzi sicuri, efficienti metodi di solubilità e consegna nelle regolazioni cliniche.

Solubilità dei composti idrofobici in soluzione acquosa utilizzando combinazioni di autoassemblanti peptidi e aminoacidi

Self-assembling peptides (SAPs) are promising vehicles for the delivery of hydrophobic therapeutics for clinical applications; their amphipathic ...

L'obiettivo generale di questo metodo è aumentare la solubilità di composti idrofobi in soluzione acquosa per un potenziale utilizzo in ambito clinico. Questo metodo affronta una limitazione fondamentale nel campo medico, ovvero l'insufficiente impiego di composti idrofobi in ambito clinico a causa della loro scarsa solubilità in sistemi acquosi come il sangue. Il principale vantaggio di questa tecnica è che i composti idrofobi possono essere sciolti in soluzioni acquose senza un uso significativo di co-solventi tossici.Per prima cosa, etichettare due provette coniche da centrifuga da 50 litri per ciascun amminoacido. Preparare un grande matraccio da due litri contenente acqua purificata. Dopo aver calcolato la quantità di ciascun amminoacido necessaria per le concentrazioni desiderate, pesare le quantità appropriate di amminoacidi nelle rispettive provette coniche utilizzando una spatola.Utilizzando una pipetta sierologica, aggiungere 40 millilitri di acqua purificata in ogni provetta da centrifuga. Dopo aver chiuso le provette, agitare i campioni sul vortex fino a completa dissoluzione. Utilizzando una bilancia analitica ad alta precisione, pesare circa un milligrammo più o meno

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Un manuale semplice e generale metodo di sintesi peptoid con attrezzature di base e dei reagenti disponibili in commercio è delineato, consentendo peptoids per essere facilmente sintetizzati nella maggior parte dei laboratori. La sintesi, purificazione e caratterizzazione di un 36mer peptoid anfifilici è descritto, così come la sua auto-assemblaggio in altamente ordinato nanosheets.

Sintesi in fase solida Submonomer dei Polimeri Peptoid e il loro self-assembly in altamente ordinato nanosheets

Questo documento descrive la formazione di strutture a base di peptidi altamente ordinati dal processo spontaneo di auto-assemblaggio. Il metodo utilizza peptidi disponibili sul mercato e le apparecchiature di laboratorio comune. Questa tecnica può essere applicata a una grande varietà di peptidi e può portare alla scoperta di nuovi assemblaggi a base di peptidi.

Formazione di strutture biomolecolari ordinate dalla Self-assemblaggio di piccoli peptidi

La sintesi delle poliammine-basato del peptide anfifili (PPA) è una sfida significativa per la presenza di multiple azoti ammina, che richiede l'uso giudizioso di proteggere i gruppi per mascherare queste funzionalità reattive. In questo articolo, descriviamo un metodo facile per la preparazione di questi nuova classe di molecole autoassemblanti.

Facile protocollo per la sintesi di auto-assemblaggio basato su poliammina Peptide anfifili (PPA) e biomateriali correlate

Un protocollo per la sintesi di un 1,2-dithiolane modificato peptide e la caratterizzazione delle strutture supramolecolari derivanti dal peptide self-assembly.

Sintesi e caratterizzazione di 1,2-Dithiolane per volta peptidi autoassemblanti

Questo protocollo descrive un metodo efficiente per sintetizzare una Nanoemulsione di un coniugato acido oleico acids-platinum(II) stabilizzato con un tripeptide di lisina-tirosina-fenilalanina (KYF). Le forme di Nanoemulsione in condizioni blande sintetiche tramite auto-assemblaggio del KYF e il coniugato.

Nanoemulsione Tripeptide-stabilizzato di acido oleico

Viene presentato un protocollo per la sintesi di oligomeri peptoidi codificati in informazioni e per l'autoassemblaggio di questi peptoidi diretti in sequenza in scale molecolari utilizzando ammine e aldeidi come coppie dinamiche di reazione covalenti e Lewis acida rara terra triflates in metallo come reagenti multiruolo.

Sintesi dei Peptoidi a informazione e del loro autoassemblaggio covalente dinamico diretto in sequenza

Reportiamo un protocollo per la produzione di una membrana lipidica ibrida all'interfaccia acqua/aria doping il bistrato lipidico con molecole di rame (II) 2,9,16,23-tetra-tert-butil-29H,31H-ftatocianina (CuPc). La membrana lipidica ibrida risultante ha una struttura sandwich lipidica/ CuPc / lipidica. Questo protocollo può anche essere applicato alla formazione di altri nanomateriali funzionali.

Auto-assemblaggio di membrane lipidiche ibride drogate con molecole organiche idrofobiche presso l'interfaccia acqua/aria

Questo articolo fornisce protocolli per la progettazione e l'auto-assemblaggio di nanostrutture da oligomeri di acido nucleico peptidico modificati gamma in miscele di solventi organici.

Auto-assemblaggio di acidi nucleici peptidici modificati gamma in nanostrutture complesse in miscele di solventi organici

Questo protocollo presenta tre metodi di preparazione rapidi e semplici che utilizzano le condizioni ambientali per innescare l'autoassemblaggio di peptidi in idrogel. Inoltre, viene descritta la caratterizzazione degli idrogel peptidici, dimostrando che gli idrogel peptidici meccanicamente stabili possono essere formati in queste semplici condizioni.

Preparazione di idrogel peptidi autoassemblati meccanicamente stabili

Determinazione di svuotamento gastrico con un non-invasiva...

La valutazione di svuotamento gastrico in non-obesi topi diabetici utilizzando un [<sup&gt; 13</sup&gt; C]-ottanoico Breath Test Acid

Scopri come aumentare la solubilità di composti idrofobici in soluzione acquosa utilizzando peptidi autoassemblanti e aminoacidi. Questo metodo elimina i co-solventi tossici per applicazioni cliniche.

Solubilità dei composti idrofobici in soluzione acquosa utilizzando combinazioni di autoassemblanti peptidi e aminoacidi

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