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DOI: 10.3791/60961-v
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L'obiettivo di questo protocollo è quello di analizzare la divisione cellulare nel tessuto intatto mediante microscopia cellulare viva e fissa utilizzando spermatociti meioticiti della Drosophila. Il protocollo dimostra come isolare i testicoli interi e intatti dalle larve di Drosophila e dalle prime pupe, e come elaborarli e montarli per la microscopia.
Questo protocollo può essere utilizzato per analizzare i meccanismi di divisione cellulare nel contesto di tessuti viventi e intatti utilizzando la microscopia a fluorescenza. Il vantaggio principale di questa tecnica è che gli ambienti fisiologici nativi delle cellule sono preservati, consentendo al contempo l'imaging dal vivo per lunghi corsi di tempo. La parte più importante di questa tecnica è assicurarsi che i tester non siano danneggiati durante la dissezione o il montaggio.
Questa è un'abilità che si acquisisce con un po 'di tempo e pratica. La dimostrazione visiva di questo metodo è fondamentale, perché mostra come identificare e isolare i tester e come montarli per l'imaging senza danneggiare il tessuto. Prepara animali, strumenti e media come descritto nel manoscritto.
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