Name: Perfusione epatica isolata normotermica suina (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-06-09T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Scopri la perfusione epatica isolata normotermica suina per migliorare la conservazione degli innesti a rischio elevato. Questo modello consente di valutare la vitalità del fegato prima del trapianto.

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<meta charset="utf8"></head><body>Sviluppo e validazione di un modello di perfusione epatica isolata ex situ suina

<ol><li>Dunson, J. R., Bakhtiyar, S. S., Joshi, M., Goss, J. A., Rana, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intent-to-treat+survival+in+liver+transplantation+has+not+improved+in+3+decades+due+to+donor+shortage+relative+to+waitlist+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Intent-to-treat survival in liver transplantation has not improved in 3 decades due to donor shortage relative to waitlist growth.</a> Clinical Transplantation. 35 (10), e14433(2021).</li>
<li>Monbaliu, D., Pirenne, J., Talbot, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+transplantation+using+donation+after+cardiac+death+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Liver transplantation using donation after cardiac death donors.</a> Journal of Hepatology. 56 (2), 474-485 (2012).</li>
<li>Croome, K. P., Taner, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+landscapes+in+DCD+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Transplantation+Reports%22%5BJournal%5D)">The changing landscapes in DCD liver transplantation.</a> Current Transplantation Reports. 7 (3), 194-204 (2020).</li>
<li>Coffey, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+functional+warm+ischemia+time+on+DCD+liver+transplant+recipients%27+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The influence of functional warm ischemia time on DCD liver transplant recipients' outcomes.</a> Clinical Transplantation. 31 (10), (2017).</li>
<li>Meurisse, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcomes+of+liver+transplantations+using+donations+after+circulatory+death%3A+A+single-center+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Outcomes of liver transplantations using donations after circulatory death: A single-center experience.</a> Transplantation Proceedings. 44 (9), 2868-2873 (2012).</li>
<li>Ruck, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+trends+in+utilization+and+outcomes+of+DCD+livers+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Temporal trends in utilization and outcomes of DCD livers in the United States.</a> Transplantation. 106 (3), 543-551 (2022).</li>
<li>Nasralla, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+randomized+trial+of+normothermic+preservation+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A randomized trial of normothermic preservation in liver transplantation.</a> Nature. 557 (7703), 50-56 (2018).</li>
<li>Blondeel, J., Monbaliu, D., Gilbo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+liver+preservation%3A+Are+we+still+missing+pieces+of+the+puzzle%5BTitle%5D)+AND+%22Artificial+Organs%22%5BJournal%5D)">Dynamic liver preservation: Are we still missing pieces of the puzzle.</a> Artificial Organs. 47 (2), 248-259 (2022).</li>
<li>Gilbo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+liver+normothermic+machine+perfusion%3A+Methodological+framework+and+potential+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Direct%22%5BJournal%5D)">Porcine liver normothermic machine perfusion: Methodological framework and potential pitfalls.</a> Transplantation Direct. 8 (1), e1276(2021).</li>
<li>Maione, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+isolated+liver+perfusion+for+the+study+of+ischemia+reperfusion+injury%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Porcine isolated liver perfusion for the study of ischemia reperfusion injury: A systematic review.</a> Transplantation. 102 (7), 1039-1049 (2018).</li>
<li>Gilbo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coagulation+factors+accumulate+during+normothermic+liver+machine+perfusion+regardless+of+donor+type+and+severity+of+ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Coagulation factors accumulate during normothermic liver machine perfusion regardless of donor type and severity of ischemic injury.</a> Transplantation. 106 (3), 510-518 (2021).</li>
<li>Butler, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+extracorporeal+porcine+liver+perfusion+for+72+hr%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Successful extracorporeal porcine liver perfusion for 72 hr.</a> Transplantation. 73 (8), 1212-1218 (2002).</li>
<li>Eshmuminov, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+integrated+perfusion+machine+preserves+injured+human+livers+for+1+week%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">An integrated perfusion machine preserves injured human livers for 1 week.</a> Nature Biotechnology. 38 (2), 189-198 (2020).</li>
<li>Xu, J., Buchwald, J. E., Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+current+machine+perfusion+therapeutics+for+organ+preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Review of current machine perfusion therapeutics for organ preservation.</a> Transplantation. 104 (9), 1792-1803 (2020).</li>
<li>Martins, P. N., Turco, S. D., Gilbo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+therapeutics+during+ex-situ+dynamic+preservation.+a+look+into+the+future%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Organ therapeutics during ex-situ dynamic preservation. a look into the future.</a> European Journal of Transplantation. 1, 63-78 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Pompa a siringa Alaris GH Plus</td><td>BD Care Fusion</td><td>80023 UN 01-G</td><td></td></tr><tr><td>Dispositivo per anestesia</td><td>Dott. Ger</td><td>Tito</td><td></td></tr><tr><td>catetere arterioso Cavafix Certo</td><td>Braun, Melsungen, Germania</td><td>BRAU4152557</td><td></td></tr><tr><td>Analizzatore di gas ematici</td><td>Radiometro</td><td>ABL815</td><td></td></tr><tr><td>Gluconato di calcio 10%</td><td>Braun, Melsungen, Germania</td><td>570/13596667/1214</td><td></td></tr><tr><td>Capnografo</td><td>Dott. Ger</td><td>Scio</td><td></td></tr><tr><td>Salvacellulare</td><td>Medtronic</td><td>AutoLog</td><td></td></tr><tr><td>Pompa centrifuga Biomedicus</td><td>Medtronic</td><td>85315 VERSIONE 3.0</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuga Rotina 420R Hettich</td><td>VWR</td><td>521-1156</td><td></td></tr><tr><td>Circuito di perfusione su misura</td><td>Medtronic</td><td>M323901C</td><td></td></tr><tr><td>Set usa e getta salva celle</td><td>Medtronic</td><td>ATLS24</td><td></td></tr><tr><td>DLP Cannula venosa monostadio, diritta 20F</td><td>Medtronic</td><td>66120</td><td></td></tr><tr><td>Epoprostenolo</td><td>GlaxoSmithKline Belgio, Wavre, Belgio</td><td>Flolan</td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl-Janssen 0,05 mg/mL</td><td>Janssen</td><td>HK-08700</td><td></td></tr><tr><td>Sensore di flusso BioPro TT</td><td>EM-TEC</td><td>12271</td><td></td></tr><tr><td>Formaldeide 4%</td><td>VWR</td><td>VWRK4078.9005</td><td></td></tr><tr><td>Congelatore -80 &deg; C</td><td>Nuovo Brunswick Scientifico</td><td>U570-86</td><td></td></tr><tr><td>Frigorifero</td><td>Liebherr</td><td>TAZZA 3513</td><td></td></tr><tr><td>Geloplasma</td><td>Fresenius-Kabi, Bad Homburg, Germania</td><td>FREEFLEX</td><td></td></tr><tr><td>Radiatore del riscaldatore</td><td>St&ouml; ckert-Shiley, gruppo Sorin</td><td>16-02-1950</td><td></td></tr><tr><td>Eparina 5000 IE/mL</td><td>Leo Pharma, Ballerup, Danimarca</td><td>EparinaLeone</td><td></td></tr><tr><td>Cannula dell'arteria epatica</td><td>Medtronic</td><td>BIO-MEDICUS 12F</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione per la conservazione degli organi IGL-1</td><td>Institut Georges Lopez</td><td>IGL-1/1000/D</td><td></td></tr><tr><td>Analizzatore di gas ematici in linea</td><td>TERUMO</td><td>Calibratore 3MCDI 540/CDI 500</td><td></td></tr><tr><td>Insulina 200 UI Actrapid</td><td>Novo Nordisk, Dagsvaerd, Danimarca</td><td>MEDI-00018</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano 1000 mg/g Vapore per inalazione</td><td>Chanelle Pharma</td><td>Iso-Vet</td><td></td></tr><tr><td>catetere intravenoso BD Insyte-W 20 G</td><td>BD</td><td>381334</td><td></td></tr><tr><td>Serbatoio di azoto liquido</td><td>KGW Isotherm</td><td>Episodio 22</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 250CM M3 USP2/0 non agugliato ligapak</td><td>JNJ medico</td><td>F4503</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 250CM M3.5 USP0 non agugliato ligapak</td><td>JNJ medico</td><td>F4504</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 5X70CM M3.5 USP0 non agugliato</td><td>JNJ medico</td><td>EH6935H</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 6X45CM M3 USP2/0 non agugliato</td><td>JNJ medico</td><td>EH6734H</td><td></td></tr><tr><td>Micro pipette 1000 & micro; L</td><td>Socorex</td><td>82,51,000</td><td></td></tr><tr><td>Monitoraggio</td><td>Siemens</td><td>SC 8000</td><td></td></tr><tr><td>Plasmalyte Viaflo</td><td>Baxter</td><td>Plasmalyte Viaflo</td><td></td></tr><tr><td>Canula della vena porta</td><td>LABORATORI CALMATI</td><td>18F RV-40018</td><td></td></tr><tr><td>Sensore di pressione</td><td>St&ouml; ckert-Shiley, gruppo Sorin</td><td>22-06-2000</td><td></td></tr><tr><td>Servoregolatore di pressione</td><td>Medtronic</td><td>BM 9505-2</td><td></td></tr><tr><td>Prolene 4-0</td><td>JNJ medico</td><td>EH7151H</td><td></td></tr><tr><td>Pompa a rulli</td><td>Cobe Century Stati Uniti d'America</td><td>468048-000 REV C</td><td></td></tr><tr><td>Bicarbonato di sodio 8,4%</td><td>Braun, Melsungen, Germania</td><td>362 2339</td><td></td></tr><tr><td>Taurocolato di sodio</td><td>Sigma Aldrich, Burlington, Stati Uniti</td><td>86339</td><td></td></tr><tr><td>Bisturi chirurgico nr 24</td><td>Swann Morton</td><td>0211</td><td></td></tr><tr><td>Catetere venoso, 3 lumen; 12FR</td><td>FRECCIA</td><td>AK-12123-F</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl Vio 250CM M2 USP3/0 gigapak non agugliato</td><td>JNJ medico</td><td>V1205G</td><td></td></tr><tr><td>Xilazina 2%</td><td>VMD Bestiame farmaceutico</td><td>XYL-M 2%</td><td></td></tr><tr><td>Zinacef Cefuroxima 750 mg compresse rivestite con film</td><td>GlaxoSmithKline Belgio, Wavre, Belgio</td><td>NDC 0173-0353-32</td><td></td></tr><tr><td>Zoletil 100</td><td>Virbac</td><td>Zoletil 100</td><td></td></tr></tbody></table>

perfusione epatica isolata normotermica suina

Porcine Normothermic Isolated Liver Perfusion

Il protocollo di perfusione presentato utilizza l'autoregolazione del flusso sanguigno del fegato per ottenere condizioni emodinamiche stabili fino a 24 ore e simulare la distribuzione fisiologica del flusso sanguigno nella vena porta e nell'arteria epatica. La Figura 1 rappresenta una panoramica schematica del circuito di perfusione. La Figura 2A mostra una distribuzione coerente del flusso sanguigno, con la vena porta e l'arteria epatica che contribuiscono ris...

Perfusione epatica isolata normotermica suina

Porcine models of liver ex situ normothermic machine perfusion (NMP) are increasingly being used in transplant research. Contrary to rodents, porcine ...

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Una tecnica per isolare fibroblasti portale dal fegato di ratto è descritto. I fegati sono perfusi e...

Isolamento dei fibroblasti Portal ratto<em&gt; In situ</em&gt; Fegato perfusione

Lo studio della fisiologia degli organi animali può essere ottenuto eseguendo un sistema sperimentale di perfusione ex vivo. L'aggiunta di un rene suino, come organo omeostatico, al nostro modello di perfusione epatica ex vivo precedentemente sviluppato, può essere un passo fondamentale per ottenere un ambiente fisiologico migliore.

Fasi per l'esperimento esperimento epatico-renale suino autologo ex vivo perfuso

Innesti marginali, come fegati grassi, innesti da donatori di età superiore o fegati prelevati dopo la morte cardiaca (DCD) tollerano stoccaggio statico convenzionale, freddo solo male. Abbiamo sviluppato un nuovo modello di subnormothermic ex vivo perfusione epatica per la conservazione, la valutazione, e la riparazione di fegati marginali prima del trapianto.

Tecnica di Subnormothermic<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Fegato perfusione per la Conservazione, valutazione e riparazione dei marginali fegato innesti

Descriviamo un metodo di ex vivo macchina perfusione di innesti di fegato umano a temperatura subnormothermic (21 ° C).

Umana Funzionale Fegato Conservazione e recupero mediante Subnormothermic macchina di perfusione

C'è una carenza significativa donatore di fegato, e i criteri per i donatori di fegato sono stati ampliati. Perfusione normotermica ex vivo del fegato (NEVLP) è stato sviluppato per valutare e modificare la funzione dell'organo. Questo studio dimostra un modello del ratto di NEVLP e verifica la capacità di pegylated-catalasi, per attenuare la lesione di conservazione del fegato.

Un piccolo modello animale di aspersione epatica normotermica Ex Vivo

Questo protocollo descrive l'uso di uno speciale catetere endovenoso, tubi monouso sterili standardizzati, controllo della temperatura integrato da monitoraggio in tempo reale e un sistema di allarme per la procedura di perfusione della collagenasi in due fasi per migliorare la coerenza nella vitalità, nella resa e nella funzionalità degli epatociti primari isolati di ratto.

Isolamento degli epatociti primari di ratto con controllo della perfusione multiparametrica

In questo protocollo viene descritto un modello di trapianto di fegato ortotopico suino dopo conservazione statica a freddo di organi donatori per 20 ore senza l'uso di un bypass veno-venoso durante l'attecchimento. L'approccio utilizza una tecnica chirurgica semplificata con minimizzazione della fase anepatica e sofisticata gestione del volume e del vasopressore.

Trapianto di fegato suino senza bypass veno-venoso come modello di donatore a criteri estesi

È stato creato un sistema di perfusione epatica normotermica ex vivo (NEVLP) per i fegati di topo. Questo sistema richiede esperienza in microchirurgia, ma consente risultati di perfusione riproducibili. La capacità di utilizzare fegati di topo facilita lo studio dei percorsi molecolari per identificare nuovi additivi perfufulati e consente l'esecuzione di esperimenti incentrati sulla riparazione degli organi.

Perfusione della macchina epatica Normothermic Ex Vivo nel topo

Questo protocollo delinea la metodologia per stabilire un modello suino che utilizza la perfusione meccanica (MP) a temperatura variabile e controllata per la conservazione del fegato del donatore, seguita dal trapianto di fegato ortotopico (OLTx). Mira a promuovere il tasso di successo di OLTx utilizzando la donazione di donatori dopo la morte circolatoria (DCD) del fegato e stabilire un modello stabile.

Conservazione della donazione suina dopo morte circolatoria (DCD) Fegato mediante perfusione e trapianto ortotopico di fegato

Qui, presentiamo un protocollo per un sistema di perfusione normotermico ex vivo open source e modificabile, progettato per superare l'alto costo e la limitata flessibilità delle piattaforme esistenti, consentendo un uso più accessibile, economico e iterativo nella ricerca biomedica preclinica.

Un sistema di perfusione normotermica open-source progettato per i ricercatori

Scopri la perfusione epatica isolata normotermica suina per migliorare la conservazione degli innesti a rischio elevato. Questo modello consente di valutare la vitalità del fegato prima del trapianto.

Perfusione epatica isolata normotermica suina

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