January 21st, 2011
エレクトロスピニング技術は、組織工学やその他のアプリケーションのためのナノ繊維足場の様々を作成することができます。ここでは、所望の形態と配置に繊維を得るためにエレクトロソリューションと装置のパラメータを最適化する手順を説明します。一般的な問題とトラブルシューティングのテクニックも紹介されています。
この実験は、in vitroおよびin vivoで細胞支持体の細胞外構造のためのナノファイバー足場のエレクトロスピニングを示しています。まず、目的のナノファイバーの種類に適したポリマー溶媒とコレクターの形状を選択します。このプロセスの最も重要なステップは、それを超えると繊維を形成できる臨界絡み合い濃度を決定することです。
次に、繊維の直径、密度、および配向を生成するようにシステムを調整します。所望の電子顕微鏡法は、紡糸可能な繊維の種類を示しています。これらのエレクトロスピニングナノファイバースキャフォールドは、成熟を促進し、成長を改善し、in vitroで細胞の移動を指示することが示されています。
一般的に、この方法に不慣れな人は、エレクトロスピニングが厄介なプロセスになる可能性があるため、苦労するでしょう。この方法の視覚的なデモンストレーションは、電気紡糸の経験がないと装置の最適化手順を理解するのが難しいため、非常に重要です。エレクトロスピニング用のポリマーと溶剤を選択するときは、最終的な用途を念頭に置いて、生分解性、熱可塑性、架橋性などの特性を考慮してください。
次に、選択内容に基づいて必要な適切な個人用保護具を決定します。次に、ガラス、プラスチック、金属、シリコンウェーハなど、ナノファイバーを回収する基板を選定します。次に、コレクターの形状を選択します。
ランダムに整列した繊維は、固定プレートに集められます。整列したファイバーは、急速に回転するホイール、ドラム、ロッド、または平行プレートに集めることができますが、コレクターが導電性であり、隣接する物体を接地せずに接地できるように絶縁されたままであることを確認してください。回転コレクターの場合、ホイールはその車軸から分離する必要があります。
臨界絡み合い濃度を近似するためには、これらからいくつかの候補ポリマー濃度を経験的に調製し、流れる濃度を選択します。溶液は粘性のある液体であるべきですが、ゲルではありません。次に、エレクトロスピニング装置をセットアップします。
シリンジは、コレクターから20センチメートルの距離に置いて、選択した溶液をシリンジポンプに負荷をかけ始め、先端から拭いた溶液のビーズがすぐに交換されるようにポンプ速度を設定する必要があります。コレクターを接地し、高容量をクリップしますtageワイヤーを導体プレートに。電圧を上げながらホイールを回転させ始める前に、電源がゼロに設定されていることを確認してください、ゆっくりと針の先端で溶液のビートを見て、流れを観察してください。
電圧を調整し続けて、長く安定したストリームを取得します。安定した流れが得られない場合は、まずポリマー溶液の濃度を調整してください。ストリームが見づらい場合は、暗いマットの背景を使用し、ビューアとストリームの間に単方向の光源を配置します。
時々、ポリマー溶液はシリンジの先端からまっすぐに滴り落ち、ホイールに引力を持たずに滴り落ちます。この場合、導体プレートが針先に接触していること、およびコレクタがアースに接触していることを確認してください。シリンジ先端のポリマー溶液の滴がホイールの方向に傾いているが、流れを形成していない場合は、電圧を上げます。
距離と電圧を変化させて調整を行い、安定した流れが見えるまで待ちます。シリンジの先端に大きなポリマーの塊が形成されたら、非導電性スティックに取り付けられたペーパータオルで塊を拭き取ります。振動または揺れるストリームを修正するには、電圧を下げるか、シリンジの先端とホイールの間の距離を広げます。
流れが揺れ続ける場合は、高濃度のポリマーを使用するか、蒸発が遅い少量の溶媒を溶液に加えます。目に見える。高い回転速度に設定されたホイールと観察可能な接触をする定常的な流れは、短く不連続な流れの長さと安定性を改善するために、最高品質の均一性と位置合わせをもたらします。ポリマー溶液を増やします。
蒸発速度の遅い溶剤を追加するか、電圧を調整します。静止したプレートにランダムな繊維を集めると、繊維が空中でシートや糸を形成し始めることがあります。これは、電圧の設定が高すぎることを示しています。
繊維にビーズが発見された場合は、ポリマー溶液を増やし、導体プレートが針と連続的に接触していること、および接地されたワイヤーブラシがホイールと連続的に接触していることを確認します。さらに、安定した流れを達成しようとする必要があります。スピットストリームは、多くの場合、ビーズ繊維の形成を示します。
繊維がリボン状に形成されたり、一緒ににじみ出たりする場合は、高濃度のポリマーまたは蒸発率の高い溶剤を使用して、波状またはカーラーキューを形成する繊維を修正します。ホイール速度を上げるか、針先をコレクターから遠ざけます。また、導体プレートとコレクタが振動していないことを確認してください。
時々、希望のものを一時停止しますが、その場合は単に急速に蒸発する溶媒を使用してください。ただし、細孔が望ましくない場合は、主要な溶媒よりも揮発性の低い少量のcos溶媒を追加してみてください。コレクターが低RPMで移動しているとき、または静止しているときに、アライメントの品質は悪くなります。
ホイールの速度を上げてアライメントを上げます。エレクトロス紡績ナノファイバーは、様々な細胞種の培養や研究に有効です。例えば、初代ラットニューロンのβチューブリンおよび核対比染色dpiについて染色することができます。
重要なことに、繊維は、サルマルミンなどの染料が紡糸溶液に含まれる場合にも視覚化できます その開発後。この技術により、生体材料および細胞生物学の分野の研究者は、細胞とさまざまなナノトポグラフィーの特徴や形状との間の相互作用を探求することができました。高電圧での作業は非常に危険である可能性があり、この手順を実行している間、オペレーターを装置から隔離するための予防措置を常に講じる必要があることを忘れないでください。
この記事では、組織工学で使用されるナノ繊維構造を作るための電紡錘技術について詳しく説明しています。望ましい繊維の形態と配列を実現するための溶液パラメータと装置セットアップの最適化を概説しています。