August 9th, 2012
膀胱拡大の外科的段階は、マウスおよびラットモデルでの3-Dの足場を使用して記述されています。膀胱拡大で使用するための生体材料の構成の有効性をテストするには、目を覚ましと麻酔の両方膀胱内圧測定するためのテクニックを紹介しています。
この手順の目的は、サイトメトリーによって機能データを取得することにより、膀胱増強のための生体材料の使用を評価することです。これは、膀胱に作成された欠陥の足場である最初のアネルモシンによって達成されます。手順の2番目のステップは、膀胱瘻チューブを腹部にトンネリングすることです。
3番目のステップは、膀胱瘻造設チューブを増強された膀胱に挿入し、動物の背側に固定することです。最後のステップは、機能的な観点から増強された膀胱を評価するためのサイトメトリーを行うことです。最終的に、結果は、意識的なサイトメトリーを通じて、膀胱の容量とコンプライアンス、排尿圧力、栄養サイクル時間、および排尿後の残留量の変化を示すことができます。
この技術の意味は、膀胱または尿道の先天性および後天性異常の治療にまで及び、膀胱の容量、コンプライアンス、および全体的な機能の障害につながります。なぜなら、膀胱増強に使用される新しい生体材料は機能的に評価する必要があるからです。腹部手術のために動物を準備した後、メスを使用して皮膚を通してより低い正中線切開を行います。
歯付き鉗子を使用して、直腸筋を持ち上げ、微細なメットとバームハサミで筋肉の後面を解剖し、皮膚切開が膀胱を切開創場所を通じて送達する全長にわたって正中線の筋肉の残りの部分をサイズ化します。1日1回、膀胱の後壁を縫合し、次に膀胱の前面壁を縫合します。膀胱の横方向にある追加の縫合糸は、これらの縫合糸を結び付けません。
縫合糸が不法行為で保持されると、膀胱のサイズは約1センチメートル四方の正方形の形状になり、膀胱は膀胱の前壁を縦方向に通り抜け、正中線に沿って膀胱のドームのすぐ下にあります。これらの縫合糸は膀胱組織を通して簡単に引っ張られる可能性があるため、張力がかかりすぎないように注意してください このステップでは、足場の吻合にはループ倍率が好まれます。細いハサミを使用して、絹の足場を膀胱の欠陥のおおよその領域にトリミングします。
足場の片隅から始めて、連続的に走るように膀胱に縫合します。欠損部の周囲に水密シールを作成するためには、外科医が膀胱への足場の張力のない水密吻合を行うことが非常に重要です。これにより、腹腔内漏出が動物の死亡につながる可能性が高いため、膀胱内のすべての尿を確実に封じ込めることができます。
テストとして、30ゲージの皮下注射針を使用して膀胱に水をロードします。漏れが見つかった場合は、追加の中断縫合糸で閉じます。次に、腹壁を閉じる前に、再建した膀胱を腹部に戻します。
直腸筋と皮下組織にブピバカインを注入して局所麻酔を行い、切開部を閉じます。次に、連続ランニング縫合糸を使用して直腸筋を近似し直し、連続ランニング縫合糸で皮膚を閉じます。切開部を洗浄して乾燥させた後、麻酔から目覚めるために動物を暖かく清潔なケージに移します。
始める前に、10センチのPE50チューブの端にアンカーを作成して、膀胱から滑り落ちないようにします。これを行うには、チューブの端を炎にさらしてフレアリングします。次に、チューブが閉塞していないことを確認します。
フレアしていない端に生理食塩水を注入し、流れることを確認します。手術のために動物を準備した後、膀胱を露出させる前に、肩甲骨の間の背側に1センチメートルの切開をします。メトソンバームハサミを使用して、皮膚とその下の筋肉との間に平面を作ります。
次に、はさみの先端を平面に置き、広げて腹側腹部への皮下トンネルを作成します。次に、動物をひっくり返します。膀胱を露出させて腹部に戻します。
背側切開部に戻ったら、皮下トンネルに小さなクランプを留置します。指を使って腹腔内内容物を保護し、クランプの先端を使って腹壁に穴を開けます。次に、フレアチューブの滑らかな端をクランプでつかみ、背側の切開部から引き戻します。
フレアアンカーの端をチューブで腹壁を越えて引っ張らないでください。膀胱のドームに巾着のひもステッチを置きます。縫合糸の緩い端に小さなクランプを残して、誤ってステッチを通して引っ張られないようにします。
また、縫合糸をぴんと張った状態で引っ張らないでください。現在、EU 18ゲージの針で、財布のひも縫合糸の中央にある膀胱壁を管腔内注射するのに十分な長さで刺さっています。次に、細い鉗子を開口部に置き、ゆっくりと広げて穴を広げます。
カテーテルのフレアした端を膀胱の欠損部に静脈内挿入するまで挿入します。巾着の縫合糸をカテーテルの周りでしっかりと引っ張り、結びます。次に、空いている縫合糸を一度カテーテルに巻き付けて、結束します。
次に、チューブを介して膀胱に生理食塩水をゆっくりと注入して膀胱をテストします。尿道からの流れがある場合は、生理食塩水を吸引して膀胱を減圧します。又。漏れが見つかった場合、これは縫合糸で修復されるべきであり、尿漏れは死亡につながる可能性があります。
前に示したように、腹部の切開を閉じます。次に、背側切開を閉じます。背側切開を閉じる手順は、ラットとマウスで異なります。
ラットの場合は、ハサミを使用してカテーテルチューブを皮膚の高さで切断します。次に、22ゲージの鈍い先端針をチューブに挿入します。ランニング縫合糸を使用してチューブの上の皮膚を閉じ、ニードルハブを押し出したままにします。
次に、鈍い針に静脈内ラインキャップを装着し、カテーテルの先端を皮膚に固定します。その後、切開部を清掃し、動物が暖かい環境で回復するのを待ちます。マウスでは、カテーテルを次のように固定し、カテーテルを長く放置し、炎でカテーテルを溶かしてカテーテルの端を閉塞させる必要があります。
チューブの端を巻き、動物の背側の皮下ポーチに入れておきます。チューブの上のスキンを連続的に閉じます。細胞解析の前に、ラットまたはマウスのいずれかの術後回復を少なくとも5〜7日間許可してください。.
サイトメトリーの日に回復した後。マウスの場合、まず麻酔下で背側切開部を開き、コイル状のチューブを皮下ポーチから取り外す必要があります。チューブを取り外した後、この切開部を閉じ、マウスが麻酔から完全に目覚めるのを待ってから、サイトメトリーを行うことから、動物をスケール上に吊り下げられた代謝ケージに入れることから始めます。
次に、ttuを介して圧力トランスデューサーと輸液ポンプに接続された27ゲージの針を使用して、恥骨上カテーテルにアクセスします。生理生理食塩水の注入を開始します。ボイドパターントレースが安定するまで待ちます。
次の10〜20分で、最初に膀胱の圧力が上昇し、これに続いてボイドが続きます。次に、15〜120分間、または手順中に少なくとも3〜4回の排尿サイクルを記録します。カテーテルのねじれやその他の合併症に注意してください。
その後、尿流動態トレースを分析して、ボイド量、コンプライアンス、収縮へのピークボイド圧力、インターバル、排尿サイクルタイム、ボイド後の残留量などのパラメータを導き出すことができます。このビデオを見た後、生体材料を使用して膀胱を増強する方法をよく理解しているはずです。また、意識的な拘束されていないサイトメトリーを使用してげっ歯類の膀胱の機能を評価する方法も知ることができます。
この記事では、マウスおよびラットのモデルを用いた膀胱拡張術の3-Dスキャフォールド使用の外科的段階について説明しています。膀胱拡張のための生体材料の構成の有効性は、覚醒および麻酔下での膀胱計測法によって試験されます。