げっ歯類での抑うつ症状を扇動、行動の変化と負の健康アウトカムのための予測不可能な慢性的な軽度のストレスプロトコル

次の実験の全体的な目標は、げっ歯類の株を、ランダムに決定された一連の慢性的な予測不可能なストレッサーにさらすことであり、その結果、動物はうつ病症状の重症度が増大して発症すると効果的に補償できなくなります。これは、ストレスを感じるように設計されているが、動物に損傷を与えたり傷つけたりしないように設計された可能性のある刺激のリストの1つに毎日さらされることによって達成されます。動物は、週に5〜6日、8週間にわたって定期的にストレッサーにさらされ、動物は、スクローススプレーテストなどの刺激を課すためのコードステータスと動物の反応を評価することにより、抑うつ症状の発症について監視されます。

その結果、動物の環境に慢性的な無作為化された解決不可能なストレッサーを課すと、動物の適応能力が妨げられ、数週間にわたって抑うつ症状が発症することが示されています。この方法は、慢性的な抑うつ症状が他の組織や臓器系にどのような悪影響を及ぼすかなど、慢性疾患分野の重要な疑問に答えるのに役立ちます。私たちが最初にこの方法を利用するというアイデアを得たのは、進行性心血管疾患と臨床集団における疾患リスクとの間の深い併存関係、および深刻なうつ病性疾患の同時発症について学んだときでした。

この手順を実演するのは、当研究室の博士課程の学生であるSteven Brooks氏とKayla Brannon氏です。軽度のストレスハウスマウスを別々のケージで生産し、マウスを1日あたり1つまたは2つのストレッサーに、各ストレッサーに対して最低3〜4時間さらすために、次のストレッサーのリストを湿った寝具ストレッサーのランダムなスケジュールで実行する必要があります。10〜20オンスのきれいな水を標準的なケージに注いで、寝具を濡らします。

マウスを湿らせたケージに3〜4時間保管します。ケージから寝具を3〜4時間取り出した後、マウスを空のケージを必要とする別のストレッサーに移行するか、新しい寝具のある清潔なケージに入れます。マウスがケージ内を動き回っても所定の位置に留まる頑丈な物体を使用して、寝具フリーケージを約45度に3〜4時間傾けます このストレッサーでは、通常の12時間の明るいサイクル、12時間の暗いサイクルを30分の連続に変更し、合計8時間持続します。

マウスをホームケージから、3時間のストレッサー期間中に取り除いた隣接するマウスのケージに移します。ケージから寝具を取り出し、マウスの場合は約0.25インチの深さまで水を加え、マウスを約4時間放置します。簡単に言えば、水への曝露の終わりに柔らかいタオルでマウスを乾かします。

ランダムに分布した房または自然の捕食者種からの10〜20ミリリットルの尿をケージに追加して、マウスを捕食者、匂い、または音にさらし、マウスを3〜4時間放置します。または、毎日のストレス期間の終わりに、ケージに近接する自然の捕食種ENCからのうなり声や捕食音を3時間再生します。マウスを清潔なケージに入れ、毎日飼育施設に戻します。

週に一度、獣医の治療が必要な傷や痛みの発症について各動物を検査し、コードグルーミングの評価について2人の研究者に訓練を受けさせます。各動物を検査し、0から1までのスケールで毎週のコードスコアを割り当てます。8つの身体領域のそれぞれに、クリーンを意味するゼロまたはダーティを意味する1つのスコアを個々のスコアに割り当てることにより、個々のスコアを追加します。

頭、首、背側被毛、腹側被覆、尾、四肢、後肢、生殖器領域です。綿のパッドまたはタオルで裏打ちされた清潔なケージに動物を置き、寝具が被毛に付着するのを防ぎます。次に、各動物の頭と背側の被毛に10%のスクロース溶液をスプレーし、5分間の総グルーミング行動を記録します。

この期間中の顔のグルーミング活動の遅延と頻度を測定します。潜伏期間は、最初のスプレーから顔のグルーミングの開始までの時間であり、頻度は顔がグルーミングされる回数として測定する必要があります。予測不可能な慢性的な軽度のストレスが8週間続いた後、慢性ストレスを受けたげっ歯類では、ストレスを受けていない対照株と比較して、行動的および生理学的結果の両方に有意な変化が見られました。

マウスは、予測不可能な慢性的な軽度のストレスの後に抑うつのような症状を発症し、コートグルーミングスコアの進行性の低下を示しました。被毛の物理的状態におけるこの顕著な劣化は、グルーミング活動の低下を示唆しており、モチベーションの欠如と並行している可能性があります。最近の証拠は、雄と雌のマウスの間で予測不可能な慢性軽度のストレスに対する反応にかなりの量的相違があることを示唆しています。

具体的には、データは、年齢が一致した雄と同じストレスプロトコルに曝露された雌マウスは、雄よりもプロトコルに対してより深刻な行動反応を発症することを示唆しています。この手順に続いて、慢性的な抑うつ症状の存在が関心のある臓器系の正常な機能にどのように影響するかなどの追加の質問に答えるために、臓器特異的機能に適した他の方法を容易に実行できます。このビデオを見た後、UCMSプロトコルのさまざまな手順と手順を利用して、げっ歯類モデルで成長する抑うつ症状の条件を徐々に作成する方法を十分に理解しているはずです。