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DOI: 10.3791/57489-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
このプロトコルでは、メタ記憶、または齧歯動物でのメモリ認識の可能性を調査するためのメソッドについて説明します。臭気に基づく遅延マッチング-見本パラダイム小説、生態学的に関連した行動テストです役に立つ応答先となる齧歯動物適応的認知のメモリ状態の強さを監視に基づいて範囲を決定するため。
この実験の全体的な目標は、拒否できる記憶テストを被験者に提示することにより、げっ歯類がメタ認知的にどの程度反応するかを判断することです。この方法は、ラットが記憶をどの程度監視しているかを判断するなど、比較心理学の分野における重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、ラットの自然な採餌行動と主要な嗅覚を利用するため、ラットが比較的簡単に習得できることです。
この手法は、行動テストの結果が有効で信頼できるものになるように、慎重に作成されました。例えば、試行間の間隔とサンプルの臭気が抽出される設定サイズとのバランスを取り、最適なメモリ干渉が得られるようにしました。この方法のアイデアは、サルの視覚刺激を使用した同様のパラダイムと、砂で満たされたカップを掘ることによってラットに記憶する匂いを提示するという無関係な実験から生まれました。
テキストプロトコルは、試験装置の組み立て、ラットの試験装置への慣れ、および食物報酬のための砂のカップを掘ることを説明しています。有意な食物嗜好が確立されると、ラットはサンプルへの適合訓練に進むことができます。このテストでは、4つの異なるカップの香りの砂がすでに準備されており、1週間以内に準備されている必要があります。
香りのよい砂は、密閉されたガラス容器に保管してください。各サンプル間テストセッションは、4分間の試行間インターバルを持つ6回の試行で構成されます。動物がこのトレーニングに合格するには、ラットは、2つの連続したテストセッションで少なくとも3回の試行で隠れた報酬を正しく識別する必要があります。
サンプルとの一致テストを設定するには、各香りの砂の半分のカップを4つのカップに注ぎます。次に、ソフトウェアによってランダムに割り当てられた位置に従って、装置のタスクエリアの入り口ドアから等距離にカップを配置します。次に、報酬のフルピースを疑似ランダムに選択された正しい香りのカップに埋めます。
ただし、同じカップを2回以上連続して使用しないでください。また、同じ香りのサンプルカップに報酬の半分を埋めます。報酬をサンドカップの底まで少なくとも半分埋めます。
サンプルの臭気をラットに提示してテストを開始します。ラットをサンプルチャンバーに入れ、介在する遅延チャンバーを通過します。次に、半分の報酬が入ったカップを曲げたヘラを使用してチャンバーに下げます。
ネズミが報酬を食べ始めたらすぐに、カップを取り外してください。ラットが報酬を食べ終えたら、段ボールの部屋の仕切りを遅延チャンバーに持ち上げ、仕切りをMTSタスクエリアに持ち上げます。ラットが選択を行い、報酬がある場合は回収したらすぐに、ラットをチャンバーから取り出し、トランスファーケージに入れます。
ネズミは各カップの匂いを嗅ぐかもしれませんが、ネズミが1つのカップにしか食い込むことを許しません。誤って選択された場合は、すぐに取り外して、カップが別の選択をしないようにします。トランスファーケージに入ったら、4分間のITIを開始し、ラットが次の試験セットアップを見るのを盲目にするために、ケージをシールドします。
休息期間中は、こぼれた可能性のある砂を掃除機で吸い取り、70%イソプロピルアルコールでチャンバーを清掃し、食べ残しの報酬を取り除き、必要に応じてサンドカップを補充します。次に、半額の報酬で次の疑似ランダムに選択されたサンプルカップを準備します。タスクエリアを設定し、次のトライアルを実施します。
セッションが完了したら、ラットをホームケージに戻し、次のラットのテストを開始します。MTS タスクに合格したら、Delayed Match-To-Sample または DMTS テストに進み、遅延基準を確立します。このタスクはMTSと似ていますが、基本的にはラットにサンプルを与えてからラットにテストを実行させるまでの保持間隔を追加します。
ラットの成功率が40〜70%の場合、遅延間隔はラットを強制対選択試験に進むのに十分です。強制試験と選択試験を開始する前に、まず、ラットがタスクルームで減少カップのみを見つける2つの試験を実施します。デクダウンカップには、色も食感も異なる砂がたっぷり入っています。
4分の1サイズの報酬がロードされています。強制トレイルと選択トレイルはDMTSテストに似ていますが、12のテストのうち8つでは、4つのMTSカップとはチャンバーの反対側に衰退カップが用意されています。ラットごとに10回の強制セッションと選択セッションを実施します。
各試行中、ラットが遅延チャンバーに入るときに、ラットが最初に衰退カップに向かって左に曲がったか、右に曲がってMTSテストを受けたかに注意してください。これがパースペクティブメタメモリの選択です。2回のセッションの後、強制試行でのラットの精度を計算します。
ラットの精度が70%を超えるか、40%未満に低下する場合は、強制テストと選択テストを中止し、DMTSテストに戻ります。ラットの精度が2つの連続したDMTSセッションで再び40〜70%になったら、強制対選択のトレイルセッションに戻ります。また、2 回のセッションで辞退の選択肢が 0 に近づくか 100% に近づくかを判断しますこの場合は、テストを一時停止し、辞退カップの報酬サイズを変更することを検討してください。
目標は、10〜40%の選択率の低下です強制対選択テストを通じて、テキストプロトコルに記載されているように、週に一度好みチェックを実行することにより、ラットの好みが同じままであることを確認してください。各試験後には、必ず試験チャンバーがイソプロパノールで洗浄されていることを確認してください。その基準の遅延によっては、2匹または3匹のラットを同時にテストすることが可能であり、徹底的な洗浄が特に重要になります。
被験者のメタ認知的反応を研究するために、正しい強制的な試行の割合を、正しい選択された試験または拒否オプションが存在する試験の割合と比較します。肯定的な結果は、強制試行と比較して、選択した試行で有意に高い精度によって示されます。選択した試行で、強制試行よりもパフォーマンスの精度が大幅に高くない場合、結果は null になります。
ラットにおけるメタメモリーの証拠がこのように仮説的に欠如していることは、サンプルが忘れられた試験では適応性があったはずの衰退試験オプションを使用しなかったことによって示されています。このビデオを見れば、香りのよい砂を使った遅延マッチ・トゥ・サンプル・テストを使用して、ラットのメタ認知反応を試験する方法を十分に理解できるはずです。習得すると、ラットは、適切に実行された場合、ラットの遅延にもよりますが、約45分でサンプル間の一致セッションでテストできます。
この手順を試みる際には、ラットが装置に慣れ、報酬を強く好み、個別に選択および監視された保持間隔が必要であることを覚えておくことが重要です。
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