5.5: 설치류 식별 II

1. 꼬리 문신

꼬리 문신은 동물을 다룰 필요없이 쉽게 읽을 수 있습니다.

그림 1. 성인 마우스에 꼬리 문신

1. 제조업체의 지시에 따라 문신 장비를 준비하십시오. 소량의 잉크가 필요합니다. 검은 염료는 알비노 마우스 또는 쥐, 그리고 색소 마우스 또는 쥐에 대 한 녹색 염료에 사용 해야 합니다.
2. 동물을 준비하여 식별합니다.
   참고: 우려나 고통을 최소화하기 위해 꼬리 문신은 동물 주택 지역이 아닌 절차실에서 수행해야 합니다.
   1. 움직임이 최소화되도록 적절하게 문신을 위해 동물을 억제합니다.
   2. 젖을 짜는 쥐는 문신 플랫폼의 볼트 아래에 컵의 입술을 고정하고 꼬리가 노치를 통해 연장되는 플라스틱 노치 컵을 사용하여 억제됩니다.
   3. 성인 마우스는 컵 억제제에 의해 억제 될 수 있으며, 꼬리는 플랫폼 이나 다른 장치를 통해 제자리에 개최되는 컵의 개구부및 플랜지에서 팽팽한 당겨진다.
   4. 면에 기울어진 면봉으로 소량의 희석 티슈 클리너로 꼬리를 청소하십시오. 성인 쥐는 일반적으로 문신을 적용하기 전에 청소해야하는 꼬리에 규모와 파편이 축적되어 있습니다. 꼬리의 비누와 물 스크럽은 먼지와 파편의 대부분을 제거합니다. 진행하기 전에 꼬리를 잘 말리십시오.
   5. 문신 직전에 면에 기울어진 면봉으로 피부에 티슈 오일을 발라주세요. 티슈 오일은 피부를 부드럽게 하고 문신 바늘을 윤활하여 조직 손상을 최소화하는 데 필요합니다. 또한, 오일은 세척 공정에 의해 제거되지 않은 먼지를 용해하고 문신이 없는 피부의 잉크 염색을 방지합니다.
3. 문신을 적용합니다.
   1. 바늘 끝을 안료에 담그고 기계를 꺼내세요.
   2. 발 페달에 의해 활성화 된 총으로 문신 사이트에 바늘의 끝을 가져옵니다.
   3. 한 방향으로 도저히 짧게 스트로크할 수 있습니다. 숫자와 문자는 최소한의 각도와 곡선 (가능한 경우)세그먼트로 구성되도록 같은 방식으로 문신해야합니다.
   4. 영구적 인 안료 증착을위해 바늘로 진피에 깊이 침투하십시오. 활성화 된 바늘의 소리의 변화는 깊이를 분별하는 데 도움이 될 수 있습니다.
   5. 안료의 적절한 증착을 위해 90^o 각도로 바늘로 피부에 접근하십시오.
4. 문신 후 정리 및 관리
   1. 블롯 (닦지 마십시오) 종이 타월과 여분의 안료의 완성 된 문신.
   2. 문신이나 종이 타월에 피가 묻어 있다는 것은 문신이 너무 깊게 만들어졌기 때문에 영구적일 가능성은 낮습니다.
   3. 추가 안료로 문신 캐릭터의 얇은 영역을 강화합니다. 캐릭터는 이미 증착된 안료에 평행하게 증착된 안료로 보강되어 있습니다.
   4. 추가 안료를 추가하려면 바늘 끝을 염료 저장소에 찍어 쥐의 경우 2자마다, 쥐의 경우 한 문자하나씩 담급니다.
   5. 문신을 퇴색하는 이유는 안료의 부적절한 양을 포함, 문신이 너무 얕게 만든, 문신이 너무 깊게 만든, 피부에 바늘의 부적절한 각도, 무딘 또는 후크 바늘이 사용되거나, 문신이 너무 빨리 만들어지는.
   6. 제조 업체의 지시에 따라 각 사용 후 문신 장비를 철저히 청소하십시오.

2. 신생아의 발가락 문신

실험 프로토콜은 신생아의 지평을 일찍 부터 필요로 할 수 있으므로 이러한 새끼를 영구적으로 식별하는 것이 필수적입니다. 발가락 문신의 사용은 귀 태깅 또는 귀 펀칭에 충분히 큰 때까지 동물을 식별 할 수 있습니다.

그림 2. 신생아 마우스를 문신하기위한 적절한 구속 기술. 랜싯에는 팁에 녹색 염료가 있습니다.

1. 미리 거한 새끼를 제지하십시오.
   1. 거즈 패드에 손에 신네이트를 컵. 엄지 손가락과 검지 손가락의 도둑놈 사이에 발을 배치하여 선택한 발가락 또는 발가락을 문신으로 노출시하십시오.
   2. 발가락뒤에 단단한 표면이 있도록 발가락에 발을 가까이 두어 구부러지지 않도록 합니다.
   3. 발을 배치 할 때 다리를 뒤집지 마십시오. 구속된 새끼는 흔들릴 수 있지만 발성은 반드시 들리지 않습니다.
2. 장비를 준비합니다.
   1. 4.5mm 골든로드 동물 랜싯을 선택합니다.
   2. 비다공성 표면에 녹색 문신 페이스트의 작은 자리를 배치; 알루미늄 호일은 잘 작동합니다.
   3. 문신 페이스트에 랜싯의 끝만 찍어.
   4. 소량의 페이스트만 사용하십시오.
3. 문신을 적용합니다.
   1. 식별 코드에 따라 골든로드 랜싯으로 원하는 발가락을 찌르세요.
   2. 피부에 구멍을 뚫고 페이스트를 피부에 주입하고 마크를 남깁니다.
   3. 적절한 침투를 보장하기 위해 같은 지점을 세 번 찌르십시오.
   4. 발가락이 피를 흘리도록 깊이 찌르는 것을 피하십시오. 이것은 희미한 문신을 초래할 수 있습니다.
4. 문신 후 정리 및 관리
   1. 흡수성 와이프/수건으로 그 자리를 부드럽게 얼룩서 여분의 페이스트를 제거합니다.
   2. 발이나 몸에서 여분의 페이스트를 청소하려고 시도하지 마십시오.
   3. 동물을 케이지로 돌려놓습니다.
   4. 수유 새끼가 문신을 할 때 댐을 문신하는 것이 좋습니다. 이것은 문신의 과도한 손질으로 이어질 수있는 새끼의 페이스트에 과반응하는 것을 막을 수 있습니다.
   5. 각 쓰레기에 새 랜싯을 사용하십시오.
   6. 문신은 절차 다음 날에 확인해야합니다. 점이 희미하거나 보이지 않는 경우 문신을 다시 수행합니다. 문신 다음날 점이 보이는 경우 동물의 수명 동안 여전히 볼 수 있어야 합니다.

3. 성인 쥐와 쥐의 발가락 문신

신생아 의 쓰레기가 문신이될 때, 그것은 그녀의 새끼에 붙여 넣기가 그녀에게 외국이 되지 않도록 어머니도 문신을 하는 것이 좋습니다.

1. 동물의 구속.
   1. 플라스틱 콘또는 뒷발에 접근할 수 있는 플렉시글라스 제지제기를 사용하여 동물을 억제합니다.
   2. 구속 장치에서 발을 확장합니다.
   3. 엄지 손가락과 검지 손가락의 도둑 놈 사이에 발을 배치하여 선택한 발가락 또는 발가락을 노출하여 문신을했습니다.
   4. 발가락뒤에 단단한 표면이 있도록 발가락에 발을 가까이 두어 발가락이 구부러지는 것을 방지합니다.
   5. 발을 배치 할 때 다리를 뒤집지 마십시오. 절제된 성인은 발을 철회하려고 할 수 있습니다.
2. 장비를 준비합니다.
   1. 5mm 골든로드 동물 랜싯을 선택합니다.
   2. 비다공성 표면에 녹색 문신 페이스트의 작은 자리를 배치; 알루미늄 호일은 잘 작동합니다.
   3. 문신 페이스트에 랜싯의 끝만 찍어.
   4. 소량의 페이스트만 사용하십시오.
3. 문신을 적용합니다.
   1. 식별 코드에 따라 골든로드 랜싯으로 원하는 발가락을 찌르세요.
   2. 피부에 구멍을 뚫고 페이스트를 피부에 주입하고 마크를 남깁니다.
   3. 적절한 침투를 보장하기 위해 같은 지점을 세 번 찌르십시오.
   4. 발가락이 피를 흘리도록 깊이 찌르는 것을 피하십시오. 이것은 희미한 문신을 초래할 수 있습니다.
4. 문신 후 정리 및 관리
   1. 흡수성 와이프/수건에 부드럽게 그 자리를 비우고 여분의 페이스트를 제거합니다.
   2. 발이나 몸에서 여분의 페이스트를 청소하려고 시도하지 마십시오.
   3. 동물을 케이지로 돌려놓습니다.
   4. 각 동물에 대한 새로운 랜싯을 사용합니다.
   5. 문신은 절차 다음 날에 확인해야합니다. 점이 희미하거나 보이지 않는 경우 문신을 다시 수행합니다. 문신 다음날 점이 보이는 경우 동물의 수명 동안 여전히 볼 수 있어야 합니다.

4. 마이크로 칩핑

RFID 칩의 이식은 동물을 식별하는 데 일반적으로 사용되는 방법입니다.

1. 마이크로칩을 applier에 로드하거나 미리 로드된 주사기를 선택합니다.
2. 어깨 위에 피부를 잡을 수 있도록 플렉시 유리 구속 튜브를 사용하여 동물을 억제합니다.
3. 피부를 텐트로 만들고 주머니를 만듭니다.
4. 바늘을 피부에 놓고, 등뼈와 평행하게 하고, 꼬리쪽으로 향합니다.
5. 마이크로칩을 피하로 배출합니다.
6. 바늘을 철회하고 주사 지점에서 닫은 피부를 꼬집습니다. 이것은 마이크로 칩이 피부에서 바늘을 따르는 것을 방지합니다. 모든 피부 출혈에 대한 hemostasis를 제공하기 위해 압력을 계속 적용합니다.
7. 구속 장치에서 동물을 제거하고 칩을 스캔하여 식별 코드를 확인합니다.

그림 3. 성인 쥐에 마이크로 칩 배치.

5. 마우스에 대한 임시 식별

무독성 염료 및 동물 마커는 마우스의 임시 식별에 사용할 수 있습니다.

1. 모피의 표시에 견갑골 사이의 영역에 액세스할 수 있도록 마우스를 억제합니다.
2. 이 부위의 모피에 마커, 스팟 또는 염료 줄무늬를 놓습니다. 이 지역은 동물이 손질하는 동안 마킹을 제거하는 것을 방지하는 데 사용됩니다.
3. 며칠 이상 구두창 식별자로 사용하는 경우 주기적으로 마킹을 확인합니다.
4. 꼬리는 짧은 기간 동안 사용할 수도 있습니다. 그러나, 동물은 손질 하는 동안 그것에서 마크를 제거할 수 있습니다.

6. 쥐에 대한 임시 식별

1. 염료 또는 마커 응용 영역에 쉽게 접근할 수 있도록 쥐를 억제합니다. 경우에 따라 줄무늬나 점만 있으면 동물을 제지할 필요가 없지만 케이지에서 자유롭게 이동할 수 있습니다.
2. 꼬리를 잡고 식별을 적용하는 동안 팽팽한 유지하여 수동 구속은 일반적으로 수행됩니다.
3. 흡입제 마취제를 사용하여 일시적인 고정은 깨지기 쉬운 동물을 위해 행해질 수 있습니다.
4. 이 메서드를 며칠 이상 구두창 식별자로 사용하는 경우 주기적으로 마킹을 확인합니다.

개별 연구 동물을 식별할 수 있는 능력은 과학적 기록 보관 및 데이터 수집의 필수적인 측면입니다. 동물을 구별하면 의도한 실험 절차에 올바른 피험자가 사용되었는지 확인할 수 있습니다.

과학자들이 개별 실험실 동물을 식별하는 데 사용하는 몇 가지 영구적이고 일시적인 방법이 있습니다. 이 비디오에서는 성인 설치류 꼬리, 신생아 발가락 및 성인 발가락에 문신을 하는 방법에 대해 설명합니다. 다음으로, 성체 쥐에서 일반적으로 수행되는 마이크로칩 배치 기술과 무독성 염료를 사용하는 보편적인 임시 식별 방법에 대해 알아보겠습니다.

이러한 방법에 대한 프로토콜을 살펴보기 전에 이러한 각 기술의 고려 사항, 이점 및 단점을 검토해 보겠습니다. 꼬리 문신은 MRI 영상과 관련된 실험이나 동물이 궤양성 피부염을 포함한 피부 상태에 유전적으로 취약한 실험과 같은 많은 연구 프로토콜에 유용합니다. 꼬리 문신의 또 다른 장점은 동물을 수동으로 제지하지 않고도 쉽게 시각화할 수 있다는 것입니다.

특정 실험 프로토콜은 빠르면 첫날부터 신생아의 유전형 분석을 요구하기 때문에 이러한 새끼를 영구적으로 식별하는 것이 필수적입니다. 발가락 문신을 사용하면 귀에 태그를 붙이거나 귀를 펀칭할 수 있을 만큼 충분히 커질 때까지 그러한 동물을 식별할 수 있습니다. 성인 어미에게 비슷한 발가락 문신을 적용하여 강아지의 새 문신을 과도하게 반응하거나 과도하게 손질하는 것을 방지하는 것이 좋습니다. 이 방법을 사용하면 몇 가지 장점이 있지만 단점은 절차에 기술, 연습, 꾸준한 손 및 특수 장비가 필요하다는 것입니다.

다음으로 고려되고 있는 영구적인 식별 방법은 마이크로칩입니다. 마이크로칩을 이식하는 것은 비교적 쉬운 과정이지만 그 유용성을 제한하는 몇 가지 요인이 있습니다. 첫째, 이 칩은 대략 큰 쌀알 크기이며 이식을 위해 10-12 게이지 바늘이 필요한데, 이는 마우스에게는 너무 커서 성인 쥐로 방법을 제한합니다. 둘째, 마이크로칩은 비싸기 때문에 많은 수의 동물을 식별하는 데 적합하지 않습니다. 마지막으로, MRI와 관련된 실험에는 마이크로칩을 사용할 수 없습니다. 그러나 영구적으로 확인되어야 하는 고유한 유전학을 가진 사육 동물과 같은 귀중한 동물 그룹이 있는 경우 마이크로칩을 사용할 수 있습니다.

마지막으로 논의할 방법은 무독성 마커를 사용한 임시 식별입니다. 무독성 마커는 연구 동물의 털을 착색하기 위해 만들어졌습니다. 이 방법은 염료가 몇 주 동안 계속 보일 수 있지만 몇 시간 또는 며칠 동안만 동물을 식별해야 하는 단기 연구에 이상적입니다. 일부 연구자들은 이러한 마커를 다른 식별 방법과 함께 사용하여 그룹 내의 특정 동물을 쉽게 발견합니다.

배경에 대해 논의했으므로 이제 꼬리 문신부터 시작하여 절차를 배워 보겠습니다. 여기에서는 성체 쥐에 대한 절차를 시연하지만 이유식 쥐와 성체 쥐에도 동일하게 적용 할 수 있습니다.

동물에 대한 불안이나 고통을 최소화하기 위해 꼬리 문신은 동물 수용 구역이 아닌 시술실에서 수행해야 합니다. 문신을 적용하기 전에 꼬리를 구멍에서 팽팽하게 당긴 상태에서 컵 구속기를 사용하여 마우스를 제지하십시오. 컵의 플랜지는 특수 유리 플랫폼을 통해 제자리에 고정됩니다. 다음으로, 면봉에 소량의 희석된 티슈 클리너로 꼬리를 청소합니다. 이 단계는 문신을 방해할 수 있는 스케일과 파편을 제거하는 데 중요합니다. 그런 다음 다른 면봉으로 꼬리 피부에 조직 오일을 바릅니다. 이것은 피부를 부드럽게 하고 문신 바늘에 윤활을 제공하여 조직 손상을 최소화합니다. 또한 오일은 세척 과정에서 제거되지 않은 먼지를 녹이고 문신이 없는 피부에 잉크 얼룩을 방지합니다. 이제 문신을 적용할 준비가 되었습니다.

기계가 꺼진 상태에서 란셋 또는 피하 주사 바늘인 문신 바늘의 끝을 색소에 담그십시오. 그런 다음 풋 페달을 사용하여 총을 활성화하고 꼬리에 문신 도구를 놓고 바늘 끝을 문신 부위로 가져옵니다. 90에서 바늘로 피부에 접근? 각도를 조절하고 진피로 충분히 깊숙이 침투하여 색소가 영구적으로 침착됩니다. 활성화된 바늘의 소리 변화는 깊이를 식별하는 데 도움이 될 수 있습니다. 한 방향으로 짧고 균일한 획을 만들어 숫자와 문자를 형성합니다. 문신을 적용할 때 최소한의 곡선과 각도를 사용하십시오.

색소를 추가하려면 바늘 끝을 염료 저장통에 넣어 생쥐의 경우 1-2자마다, 쥐의 경우 1자마다 넣으십시오. 완성된 문신을 종이 타월로 닦아 과도한 색소를 제거합니다. 문신이나 종이 타월에 피가 묻어 있다는 것은 문신이 너무 깊게 만들어졌음을 나타내므로 영구적이지 않을 것입니다. 바늘을 이미 침착된 안료 위가 아닌 평행하게 배치하여 추가 안료로 얇은 문자를 강화합니다. 문신 장비는 매번 사용 후 철저히 청소하고, 질병 전염을 방지하기 위해 케이지 사이에 새 바늘 또는 멸균된 바늘과 새 잉크를 사용해야 합니다.

다음으로 신생아와 성인에게 발가락 문신을 적용하는 방법을 배웁니다. 여기에서는 마우스에 대한 절차를 시연하지만 쥐에도 동일한 단계를 적용할 수 있습니다.

신생아는 꼬리뼈가 골화되지 않고 꼬리의 길이가 너무 작기 때문에 발가락에 문신이 있습니다. 또한 꼬리가 자라면서 피부가 늘어나고 숫자가 왜곡되거나 희미해져서 읽을 수 없게 될 수 있습니다. 알루미늄 호일과 같은 비다공성 표면에 녹색 문신 페이스트 한 점을 놓는 것으로 시작하십시오. 다음으로, 젖을 뗀 강아지를 거즈 패드를 사용하여 손에 컵을 넣습니다. 엄지손가락과 검지의 구부러진 부분 사이에 발을 놓아 문신을 위해 선택한 발가락을 노출시킵니다. 발을 발가락 가까이로 잡고 선택한 발가락이 구부러지지 않도록 발가락 뒤에 단단한 표면이 오도록 합니다.

이제 4.5mm 란셋 끝을 타투 페이스트에 담그십시오. 그런 다음 미리 결정된 코드에 따라 원하는 발가락을 찌릅니다. 적절한 침투를 위해 같은 지점을 세 번 찌릅니다. 페이스트에 자국이 남을 정도로 피부에 침투하되 발가락에서 피가 날 정도로 깊게 찌르는 것은 피하십시오. 거즈로 새 문신을 부드럽게 닦아서 여분의 문신 페이스트를 제거하고 동물을 우리로 되돌립니다. 다음 새끼를 위해 새 란셋을 사용하십시오. 시술 하루 후 문신이 보이는지 확인하십시오.

수유 강아지에게 문신을 할 때 댐에도 문신을 하는 것이 좋습니다. 이것은 그녀가 과잉 반응하고 강아지의 문신을 과도하게 손질하는 것을 방지할 수 있습니다. 성인에게 발가락 문신을 적용하려면 먼저 알루미늄 호일에 녹색 문신 페이스트의 작은 점을 놓습니다. 그런 다음 뒷발에 접근할 수 있는 플라스틱 원뿔 또는 플렉시 유리 구속기를 사용하여 동물을 구속합니다. 구속 장치에서 발을 뻗고 엄지손가락과 검지 손가락 사이에 발을 위치시켜 문신을 위해 선택한 발가락을 노출시킵니다.

이제 5mm 란셋 끝을 타투 페이스트에 담그십시오. 그리고 이전과 마찬가지로 적절한 삽입을 보장하기 위해 원하는 발가락의 피부를 최소 세 번 찌르고 구멍을 뚫어 문신을 적용하십시오. 다음으로, 문신을 부드럽게 닦아서 여분의 반죽을 제거하고 동물을 우리로 되돌립니다. 신생아와 마찬가지로 시술 하루 후에 문신을 확인하십시오. 문신을 한 다음 날에 자국이 보이면 동물의 평생 동안 계속 볼 수 있어야 합니다. 희미하거나 보이지 않으면 앞에서 설명한 대로 문신을 다시 실행하십시오.

다음으로 설명할 식별 방법은 설치류에 마이크로칩을 이식하는 것이다. 실험실 동물을 라벨링하는 데 일반적으로 사용되는 칩은 무선 주파수 식별(RFID) 칩입니다. 일반적으로 칩에는 바늘이 미리 로드되어 있으며 이를 어플라이어에 넣을 수 있습니다. 칩을 삽입하려면 플렉시 유리 튜브를 사용하여 동물을 구속하고 어깨 너머의 피부를 계속 잡을 수 있는지 확인하십시오. 먼저 피부를 텐트로 덮어 주머니를 만듭니다. 그런 다음 바늘을 피부를 통해 놓고 척추와 평행하게 비스듬하게 꼬리를 향하게 합니다. 마이크로칩을 피하로 배출하고 바늘을 빼냅니다. 칩이 바늘을 따라 피부에서 나오는 것을 방지하기 위해 주입 부위를 닫은 피부를 꼬집습니다. 피부 출혈에 지혈을 제공하기 위해 계속 압력을 가하십시오. 구속 장치에서 동물을 제거하고 제조업체에서 제공한 리더기를 사용하여 칩을 스캔하여 식별 코드를 확인합니다.

마지막으로 식별을 위해 설치류에 임시 염료를 바르는 방법을 알아보겠습니다. 쥐부터 시작하겠습니다. 먼저 견갑골 사이 부위에 접근할 수 있도록 동물을 제지합니다. 신체의 이 부분은 자가 그루밍으로부터 안전합니다. 이 부위의 털에 염료의 반점이나 줄무늬를 놓고 동물을 우리에 다시 넣으십시오.

쥐의 경우 꼬리를 잡고 팽팽하게 잡아 동물을 수동으로 제지하십시오. 이렇게 하면 염료 도포 부위에 쉽게 접근할 수 있으며, 이는 머리, 어깨 또는 엉덩이가 될 수 있습니다. 모피에 염료의 반점이나 줄무늬를 놓습니다. 동물을 제지하지 않고 무독성 염료를 바르는 것이 때때로 가능합니다. 특히 며칠 이상 이 동물을 유일한 식별자로 사용하는 경우 이러한 동물의 표시를 주기적으로 확인하십시오.

지금까지 이러한 다양한 식별 방법의 절차를 검토했으므로 이제 과학자들이 오늘날 다양한 연구 연구에서 이를 어떻게 사용하고 있는지 살펴보겠습니다.

행동 실험에서 설치류를 사용하는 것은 매우 일반적입니다. 여기에서 연구자들은 꼬리 문신을 사용하여 동물을 영구적으로 표시한 다음 인위적으로 구성된 가정용 케이지 환경에서 며칠 동안 관찰했습니다. 수집된 데이터는 수술 후 10일 동안 대조군과 실험 동물 간의 이동 거리와 같은 행동의 차이를 보여주었습니다.

또 다른 행동 실험에서 연구자들은 신생아에게 발가락 문신을 하고 초음파 발성을 녹음하기 위해 특수 마이크가 있는 녹음 상자에 넣었습니다. 이 실험의 목적은 야생형과 Shank2 결핍 마우스(자폐증 모델)에서 12일의 신생아 기간과 성인기에 걸친 호출 속도, 즉 분당 발성 횟수의 차이를 살펴보는 것이었습니다.

마지막으로, 앞서 논의한 바와 같이 무독성 염료를 사용하는 것은 단기 실험을 위해 동물을 표시하는 효율적인 방법입니다. 여기서 과학자들은 혈장 단백질의 일시적인 발현에 관심이 있었습니다. 그래서 그들은 동물에게 임시 마커를 표시하고, 플라스미드 DNA를 정맥 주사하고, 이틀 후에 혈액 샘플을 수집하여 웨스턴 블롯 기술을 사용하여 단백질 발현을 확인했습니다.

당신은 방금 JoVE의 문신, 마이크로칩 배치 및 실험실 쥐와 쥐에 대한 임시 식별 방법에 대한 소개를 보았습니다. 동물 식별은 연구에서 기록 보관의 주요 구성 요소입니다. 따라서 적절한 식별 방법을 선택할 때 많은 요소를 고려해야 합니다. 여기에는 동물에 대한 불편함의 정도, 기술의 용이성, 실험적 요구 사항, 마지막으로 방법과 관련된 비용이 포함됩니다. 언제나 그렇듯이 시청해 주셔서 감사합니다!