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5.6: 화합물 투여 I

111,920 Views
15:06 min
August 24, 2015
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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

출처: 케이 스튜어트, RVT, RLATG, CMAR; 발레리 A. 슈뢰더, RVT, RLATG. 노틀담 대학교, IN

많은 연구 프로토콜은 물질을 동물에 주입해야 하므로, 전달 경로와 물질의 양을 정확하게 결정해야 한다. 마우스와 쥐에서 사용할 수있는 관리의 여러 경로가 있습니다. 어떤 경로를 사용하는 경로는 주입될 물질의 여러 요인에 의해 결정됩니다: 용액의 pH, 원하는 투여량에 필요한 부피, 용액의 점도. 물질이 잘못 투여되면 심각한 조직 손상이 발생할 수 있습니다. 이 비디오는 가장 일반적으로 사용되는 사출 경로에 대한 다양한 구속 방법과 기술적 세부 사항을 살펴봅니다.

Procedure

1. 피하 주입

  1. 한 손으로 구속 홀드를 통해 마우스를 수동으로 억제합니다. 일단 잡히면 마우스가 테이블이나 다른 보안 표면에 놓일 수 있습니다. 마우스 본문에 압력을 가하지 않도록 하십시오.
  2. 호흡을 손상시킬 수 있는 마우스의 과도한 무게를 피하기 위해 테이블에 손의 발 뒤꿈치를 놓습니다. 마우스는 또한 상용 장치에서 억제될 수 있다. 쥐의 경우 상용 구속 장치를 사용하는 것이 가장 좋습니다.
  3. 피부를 잡고 위로 당겨 피부 텐트를 만듭니다. 구속 장치를 사용하는 경우 상단의 슬롯을 통해 피부를 파악하려면 집게가 필요할 수 있습니다.
  4. 바늘을 척추에 평행하게 삽입하고 텐트의 피부 접기 의 바닥에 머리에서 멀리 지시합니다. 마우스의 두개골 뼈가 매우 얇기 때문에 두개골에 구멍이 발생할 가능성을 피하기 위해 머리에서 바늘을 직접 합니다. 쥐는 그들의 머리를 양육 하는 경향이 있다, 목 근육에 배치 될 주사를 일으킬 수 있는.
  5. 바늘 벨을 삽입하여 피부에 부드럽게 미끄러지도록 합니다. 바늘은 피부를 잡고 손가락 아래에 삽입됩니다. 생체 유해 물품을 주입할 때 안전성을 향상시키기 위해 피부는 집게로 파악되어 바늘 스틱 부상의 가능성을 제거합니다.
  6. 플런저를 뒤로 당겨 적절한 배치를 확인합니다. 주사기에 공기가 유입되면 바늘 끝이 피부 아래에 위치하지 않고 철회하고 재배치해야 한다는 것을 나타냅니다. 플런저를 다시 당길 때 역압력이 있는 경우, 바늘의 적절한 배치를 나타내며 주사가 진행될 수 있다.
  7. 꾸준한 움직임으로 물질을 천천히 주입하십시오. 주사 용품의 손실을 방지하기 위해, 주입 후 일시 중지, 피부 아래 바늘을 약간 회전, 바늘을 철회하는 동안 주사 부위에서 피부를 꼬집는다.

Figure 1
그림 1. 마우스에서 피하 주사.

2. 복막 주사

  1. 한 손으로 수동 구속 방법은 마우스에서이 주입 기술에 사용됩니다. 마우스가 회전하는 것을 방지하기 위해 목에 충분히 높게 배치되도록 손을 조정합니다.
  2. 엄지손가락과 검지 손가락 사이의 목 덜미에서 느슨한 피부를 잡습니다.
  3. 두 번째, 세 번째, 네 번째 손가락 사이의 뒷면을 따라 느슨한 피부를 고정하거나 세 번째 손가락과 네 번째 손가락 사이에 꼬리를 배치하여 뒷분기를 안정화시하십시오.
  4. 쥐의 IP 주사는 두 사람이 필요하며, 하나는 쥐를 억제하고 다른 하나는 주사를 수행해야합니다.
    1. 목의 양쪽에 있는 검지와 가운데 손가락을 사용하여 어깨 위에 쥐를 잡고 뒤쪽의 손바닥을 잡습니다. 엄지와 세 번째와 네 번째 손가락은 앞뒤로 이동을 방지하기 위해 가슴을 둘러싸고 있어야합니다. 목 의 양쪽에 손가락의 위치는 쥐가 머리를 회전에서 방지 할 수 있습니다.
    2. 쥐를 들어 올려 복부를 노출하도록 설정합니다.
    3. 발과 꼬리를 단단히 잡고 몸에서 멀리 확장하여 뒷분기를 안정화시하십시오.
  5. 마우스 나 쥐를 배치하여 복부를 노출시켜 위쪽으로 향하도록 합니다.
  6. 머리가 약 30° 각도로 아래쪽으로 가리키며 동물을 기울여 창자가 앞으로 떨어질 수 있도록 합니다.
  7. 사출 랜드마크는 다음과 같습니다.
    1. 주입할 영역은 엉덩이 의 상단에 있는 신체를 가로질러 수평으로 확장되는 가상의 선에 의해 원더로 경계됩니다(측면에서 측면까지).
    2. 중간선은 반대 방향으로 자라는 머리카락이 만나는 곳으로 인식되는 내측 테두리입니다. 털이 없는 동물에서, 중간선은 항문에 xiphoid에서 직선으로 확장됩니다.
    3. 측면 테두리는 엉덩이 의 상단에서 남성의 프레추에 라인이며, 엉덩이의 상단에서 여성의 젖꼭지를 따르는 라인입니다.
    4. 이것은 안전한 주입을 위한 삼각형 영역을 제공합니다.
  8. 랜드마크 내 기사 삽입
    1. 위에서 설명한 대로 삼각형에 척추에 수직으로 바늘을 삽입합니다. 바늘을 신체의 평면에 90° 각도로 배치하면 복부의 양쪽을 모두 사용하여 안전한 주사를 할 수 있습니다. 이것은 여러 주사와 특히 중요 하다, 그것은 주사 사이트의 교대를 허용 하 여 조직 외상을 최소화.
    2. 바늘이 90° 각도로 놓으면 복부에 "튀어"들어 깊이를 쉽게 측정할 수 있습니다. 이것은 또한 바늘이 제대로 배치되는 시각적이고 촉각적인 단서입니다.
    3. 주사기를 흡인하여 복막 내의 배치를 보장하고 오줌 방광, 내장 또는 혈관 구조 내에 있지 않습니다.
    4. 음낭에 기사를 투여하지 않도록 남성 마우스에 caudally 주입하지 마십시오. 외상을 방지하기 위해 여성의 젖꼭지에 주입하지 마십시오.

Figure 2
그림 2. 마우스에서 복막 주사에 대 한 랜드 마크.

3. 근육 내 주입

  1. 쥐와 쥐에 대 한이 기술에 대 한 구속 두 사람 또는 구속 튜브의 사용을 필요. 여기에 설명된 것은 제지 장치를 이용한 1인칭 방법이다.
    1. 동물을 구속 장치에 배치합니다.
    2. 동물이 튜브에 들어가면 꼬리를 잡고 동물을 뒷다리로 튜브 밖으로 놓습니다.
    3. 대퇴골의 두개골 부분에서 측면의 피부를 잡고 다리를 확장하고 비틀림을 방지합니다.
    4. 동물의 머리를 가리키고 테이블에 서 거나 주사가 수행되는 동안 장치의 안정화를 허용하기 위해 기술자의 몸을 가리키는 테이블에 누워 있도록 구속 장치를 배치합니다.
    5. 주사 랜드 마크는 다음과 같습니다 : 마우스와 쥐 다리는 뒷사지에서 가장 큰 근육 질량을 포함하는 둔부 근육 (caudal 허벅지 근육)으로 작습니다. 뒷사지에서 두 번째로 큰 근육 질량은 위장혈증 (종아리 근육)입니다. 주사는 다리의 소달 양상에서 만들어집니다.
      1. 대퇴골에 둔부 근육 질량 후방을 찾습니다. 뼈는 만져질 수 있고 큰 근육은 쉽게 느낄 수 있습니다.
      2. 후방 측면에서 다리의 중간선은 호크의 지점에서 꼬리까지 실행됩니다. 머리카락은 종종 측면 및 내부 표면에서 반대 방향으로 성장하기 때문에 함께 오는 능선이 있습니다.
      3. 주사는 중간선 에서 허벅지의 측면 측면을 향해 이루어집니다. 이것은 다리의 내측 표면에 있는 신경 그리고 혈관을 손상의 가능성을 감소시킵니다.
      4. 위장혈증으로 주사는 후방 양상에서 수행되며 측면 사페누스 정맥의 위치를 신중하게 고려합니다.
    6. 랜드마크 내 기사 삽입
      1. 위에서 설명한 바와 같이 중공판에서 대퇴골에 바늘을 수직으로 삽입하고, 둔부 근육의 경우 최대 깊이 5mm, 위트렌혈증의 경우 최대 3mm까지 삽입한다.
      2. 근육에 대한 외상을 피하기 위해 조직의 바늘의 불필요한 움직임을 방지해야합니다. 주사기는 주사를 수행하기 위해 손의 재배치를 필요로하지 않는 방식으로 개최되어야한다.
      3. 주사기를 흡인하여 혈관이 아닌 근육 내의 배치를 보장합니다.
      4. 안정적이고 유동적인 움직임에 재료를 주입합니다. 근육의 느린 확장을 허용 하기 위해 신속 하 게 주입 하지 마십시오. 신속한 주사는 조직 외상을 일으킬 것입니다.

Figure 3
그림 3. 쥐의 둔부 근육에 근육 주사.

4. 꼬리 정맥을 이용한 정맥 주사

  1. 동물의 구속은 동물이 마취또는 깨어 있는지 여부에 따라 달라집니다.
    1. 무모 또는 누드 동물을 제외하고 의식이 있는 쥐 또는 쥐에 원통형 구속 튜브를 사용하십시오. 털이 없는 동물의 지성 특성으로 인해 피부가 단단한 플라스틱을 고수하는 경향이 있기 때문에 아크릴 제지기에서 재배치하고 제거하기가 어렵습니다. 따라서 유연한 플라스틱 원뿔이 사용됩니다.
    2. 다른 사출 장치에는 라이트 플랫폼, 가열 플랫폼 및 마우스가 꼬리의 장력으로 엄격하게 원뿔에 보관되는 단단한 플라스틱 콘이 있습니다.
    3. 마취 된 마우스는 구속이 필요하지 않을 수 있습니다.
    4. 몸 전체 또는 꼬리를 따뜻하게하여 꼬리 혈관의 혈관 확장을 보장합니다.
      1. 중간 또는 순환 물 담요에 설정 전기 난방 패드로 몸 전체를 따뜻하게.
      2. 동물을 열원에 싸서 구속 장치에 놓습니다.
      3. 동물을 면밀히 관찰하고 혈관이 팽창하는 즉시 열원에서 제거하십시오. 케이지로 향하는 열램프를 사용하여 전신 온난화를 달성할 수도 있습니다. 열 램프를 사용할 때 동물을 과열하기 쉽기 때문에 동물을 면밀히 관찰해야합니다.
      4. 전신 온난화가 가능하지 않을 때, 가열 된 수건, 온수 병의 따뜻한 압축을 사용하여 꼬리를 가열하거나 꼬리를 따뜻한 물에 잠급니다. 뜨거운 물 병, 따뜻한 수건 및 따뜻한 물에 온도 조절이 없기 때문에 꼬리를 태우지 않도록주의해야합니다. 열원은 처음에 과열되는 것이 일반적입니다. 이 열원은 또한 빨리 냉각합니다.
    5. 조직 오일의 사용은 혈관의 시각화를 향상시키는 또 다른 방법입니다.
      1. 면에 기울어진 어플리케이터를 티슈 오일에 담그고, 안정화를 위해 잡혀 있는 꼬리 부분으로부터 오일을 잘 발라주세요. 조직 오일은 혈관이 더 명확하게 정의된 것처럼 보이게 합니다.
      2. 증발로 피부의 온난화와 혈관 확장을 생성하는 제형에 화학 물질을 포함하는 비독성 오일이 시판되고 있다. 이 오일은 적용되고, 몇 분 후, 혈관이 볼 때, 여분의 오일은 면공으로 닦아.
      3. 모든 오일은 꼬리를 잡기 가 더 어렵게 만들 수 있습니다.
      4. 오일을 사용하는 경우 혈관의 시각화 시 즉시 주입해야 합니다.
    6. 사출 랜드마크는 다음과 같습니다.
      1. 측면 꼬리 정맥은 꼬리 의 측면에 있습니다. 또한 주사 목적에 적합하지 않은 꼬리의 등및 복부 중간선을 따라 달리는 혈관이 있습니다.
      2. 억제제의 동물은 측면 용기가 주입의 용이성을 위해 직면할 수 있도록 회전할 수 있습니다. 또는 꼬리를 돌리면 혈관을 주입에 더 적합한 위치로 가져올 수 있습니다.
      3. 선박은 매우 피상적입니다. 꼬리 의 바닥에 도달할 때 그들은 더 피상적이됩니다.
    7. 꼬리 정맥에 기사를 주입하려면 기술이 필요합니다. 혈관에 대한 외상을 피하기 위해 바늘의 불필요한 움직임을 방지해야합니다. 주사기는 주사를 수행하기 위해 손의 재배치를 필요로하지 않는 방식으로 개최됩니다.
      1. 용기가 보이고 장력 하에서 유지되도록 꼬리를 배치합니다. 꼬리에 과도한 장력을 적용하지 마십시오, 또는 혈관을 스트레칭 하고 혈류가 감소 할 수 있습니다.
      2. 가능한 한 멀리 멀리 혈관 위에 직접 바늘을 배치합니다.
      3. 약간의 압력을 가하고 바늘을 척추와 평행하게 꼬리에 밀어 넣습니다. 바늘이 혈관을 변속하기 때문에 바늘을 아래로 얽매이지 마십시오. 바늘은 루멘으로 적어도 2mm 진행되기 때문에 용기에서 볼 수 있어야합니다.
      4. 선박의 파열을 피하기 위해 천천히 유체 운동에 재료를 주입하십시오.
      5. 주사 중 꼬리에 특별한주의를 기울이는. 용기에 제대로 삽입하면 용기로 흐르는 주입 물질이 저항없이 느껴질 수 있습니다. 혈액이 주입 물질에 의해 밀려나기 때문에 혈관은 희미해져야 합니다.
      6. 바늘이 용기에 없는 경우 주입 시 강한 저항이 있을 것입니다. 힘으로 주입하는 경우, 재료는 피하 공간을 채우고 꼬리는 풍선 것입니다. 정맥 주사하도록 설계된 물질이 주변 조직에 인과성일 수 있기 때문에 즉시 중지하십시오. 바늘을 철회하고 꼬리에 더 까다롭게 다른 주사를 시도하십시오.
      7. 성공적인 주사 후, 바늘을 철회하고 케이지에 동물을 반환하기 전에 좋은 hemostasis을 보장하기 위해 주사 부위에 압력을 적용합니다.

Figure 4
그림 4. 마우스에서 꼬리 정맥 주입.

화합물 투여는 종종 동물 연구의 필수적인 구성 요소이며, 화합물이 정확하고 인도적인 방식으로 전달되도록 많은 요인을 평가해야합니다. 두 가지 주요 관리 경로는 소화관을 통해 장내, 그리고 비경외 외부 소화관. 주요 차이점은, 화합물이 장내 경로를 통해 주어지면 혈류에 들어가기 전에 간 대사를 겪는다. 반면, 정맥 또는 근육과 같은 모든 비경구 경로를 통해 물질은 이 첫 번째 간을 건너 뛰고 일반적으로 더 높은 생체 이용률을 초래합니다.

복합 관리에 대한 시리즈의 첫 번째 비디오에서는 일반적으로 투여 경로선택에 영향을 미치는 요인을 논의하는 것으로 시작합니다. 그리고 우리는 가장 일반적인 비경구 주사 방법을 검토할 거 야, SC 또는 SubQ로 축약 피 하 포함, 복막 또는 IP, 근육 또는 IM, 그리고 정 맥 AKA IV.

화합물 관리 절차의 어떤 모형을 미리 알리기 전에 염두에 두어야 할 몇 가지 를 검토해서 시작해 봅시다. 첫 번째 단계는 주입할 용액 또는 현탁액을 준비하는 것이며, 물질 제제에 대한 첫 번째 근본적인 고려사항은 불임이다. 동물에 병원균을 도입하는 것을 방지하기 위해, 주입 물질뿐만 아니라 바늘과 주사기를 사용하는 것이 멸균되는 것이 중요하다.

두 번째 고려 사항은 생리적 호환성입니다. 투여 용액은, 장내 또는 부모적으로 투여하든, 화합물이 제대로 흡수되고 조직 손상을 방지하기 위해 적절한 pH로 생리적으로 완충되어야 한다. 세 번째 요인은 주사 기사의 점도이며, 이는 바늘 선택에 중요한 역할을합니다. 보통, 20~30게이지 바늘은 마우스와 쥐에 대한 비경부 투여 절차에 사용된다. 이 바늘의 허브는 일반적으로 식별의 용이성을 위해 색으로 코딩됩니다.

용액은 이러한 바늘 중 적어도 하나를 통과 하기에 충분 한 유동성이 있어야 합니다. 솔루션이 하나 이상을 통과할 수 있다면 일반적으로 선택은 가능한 가장 작은 게이지입니다. 다음 요인은 주사기 선택에 영향을 주는 관리 볼륨입니다. 바늘과 마찬가지로 정확한 졸업을 통해 정확한 투약에 필요한 가장 작은 주사기를 선택해야 합니다. 바늘 게이지 및 투여 량은 투여되는 동물의 경로, 종, 크기 및 나이에 따라 달라집니다. 이 비디오에서 설명하는 경로와 관련된 값을 검토하려면 아래 표 1을 참조하십시오. 최종 적인 고려 사항은 투여 경로마다 크게 달라지며 가장 적합한 방법을 선택하는 데 역할을 할 수 있는 흡수율입니다.

지금, 일상적으로 사용 된 주입 방법의 독특한 특성에 대해 이야기 하자.

SC 또는 SubQ 주입은 피부를 들어 올려 생성 된 가상 공간에 피부 층과 근육 사이에 물질을 배치합니다. 이를 통해 더 큰 부피를 안전하게 주입할 수 있지만 흡수율은 다른 경로보다 느리기 때문에 더 지속적인 효과를 제공합니다. IP 투여 하는 동안, 화합물복 막 구멍에 직접 주입. 이것은 대량의 솔루션을 제공하는 데 사용되는 또 다른 일반적인 방법입니다. IP 주사는 비경구 투여로 간주되지만 흡수 메커니즘은 실제로 구강 투여와 더 유사합니다.

IM 주사는 둔부 또는 위장 혈증 근육에 직접 화합물을 제공합니다. IM을 주입하는 물질은 근육 조직 내의 혈관의 풍부한 수로 인해 빠르게 흡수되며, 이는 경우에 따라 바람직한 경로로 만들 수 있습니다. 근육에 부적절 하거나 반복 된 주입 마비 또는 근육 괴사 결과 신경 손상을 일으킬 수 있습니다. 마지막으로, 동물의 꼬리 정맥에 IV 주입은 물질이 순환 계통에 직접 도입됨에 따라 가장 효과적인 투여 경로입니다. 화합물꼬리 측면에 있는 측면 의 caudal 꼬리 정맥 중 하나에 주입 되어야 합니다. 꼬리의 복부 미드라인을 따라 달리는 용기가 있는데, 이는 주입 목적으로적합하지 않습니다.

이제 우리는 배경을 논의했습니다, SC 주사로 시작, 절차를 배울 수 있습니다. 마우스의 경우 꼬리로 동물을 선택하고 와이어 바 뚜껑과 같은 다른 안전한 표면에 놓습니다. 그런 다음, 수동으로 목 주위에 피부를 들어 올려 텐트를 형성하여 동물을 억제합니다. 다음으로, 뒤쪽 발이 표면에 놓여있는 테이블에 동물을 설정하고 호흡을 손상시킬 수있는 동물의 과도한 무게를 피하기 위해 테이블에 손의 발 뒤꿈치를 놓습니다.

주입하려면 주입할 용액으로 주사기를 집어 들고 바늘을 척추와 평행하게 유도하고 머리에서 멀리 가서 두개골에 구멍이 뚫릴 가능성을 피하십시오. 그런 다음, 위쪽으로 향하는 경사로 바늘을 삽입하여 피부에 부드럽게 미끄러지게 합니다. 플런저를 뒤로 당겨 적절한 바늘 배치를 확인합니다. 플런저를 다시 당길 때 역압이 있으면 바늘이 올바른 위치에 있습니다. 공기가 플런저에 유입되면 바늘을 재배치해야합니다.

바늘이 제대로 배치되어 있는지 확인한 후, 꾸준한 움직임으로 천천히 주입하십시오. 주사 후 일시 중지 하 고 주사 기사의 손실을 방지 하기 위해 피부 아래 약간 바늘을 회전. 그런 다음 주사 부위에서 피부를 꼬집어 바늘을 철회합니다. 이 같은 방법은 쥐를 짜는 데 사용할 수 있습니다.

성인 쥐의 경우 먼저 동물을 장치를 사용하여 억제되어야하며,이 컬렉션의 "취급 및 구속의 기본"비디오에서 논의되는 절차. 이어서, 마우스에서 수행되는 것과 동일한 방식으로 SC 주입을 수행할 수 있다.

다음으로, 우리는 IP 주입을 수행하는 방법을 배울 것입니다. 마우스에서 양손 구속 기술을 사용하여 동물을 수동으로 억제하고 다시 "취급 및 구속의 기본" 비디오에 설명합니다. 지배적이지 않은 손이 목에 충분히 높이 위치하여 동물이 회전하는 것을 방지하도록 하십시오. 세 번째 손가락과 네 번째 손가락 사이에 꼬리를 배치하거나 나머지 손가락과 엄지 손가락의 베이스 사이에 피부를 단단히 고정하여 뒷분기를 안정화합니다.

다음으로, 동물을 배치하여 복부를 노출시합니다. 동물이 30° 각도로 아래쪽을 가리키며 동물을 기울여 내장이 앞으로 떨어질 수 있도록 합니다. 주입 랜드 마크는 다음과 같이 설명 할 수 있습니다 : 몸전체에 수평으로 확장 가상 라인을 그립니다, 엉덩이의 상단에, 측면에서 측면에. 그런 다음 반대 방향으로 자라는 머리카락이 만나는 선을 따라 내측 테두리 또는 중간선을 그립니다. 마지막으로, 남성의 프레추에 엉덩이 상단에서 여성의 젖꼭지를 따르는 측면 테두리를 상상해보십시오. 이를 통해 안전한 IP 주입을 위한 삼각형 영역이 제공됩니다.

우리가 논의 할 다음 방법은 IM 주입입니다. 쥐와 쥐 둘 다에 대 한이 기술에 구속 두 사람 또는 구속 튜브의 사용을 필요. 여기서는 제지 장치를 사용하는 1인 방법을 설명합니다.

먼저 동물을 튜브에 놓고 뒷다리를 꺼내 꼬리를 당겨 동물을 배치합니다. 다음으로, 대퇴골의 두개골 부분에서 측면의 피부를 잡고 다리를 확장하고 비틀림을 방지합니다. 이어서, 구속 장치를 배치하여 사출 부위의 시각화를 허용한다.

둔부 랜드 마크를 식별하려면 대퇴골에 둔부 근육 질량 후방을 찾습니다. 뼈는 만져질 수 있고 큰 근육은 쉽게 느낄 수 있습니다. 호크 의 지점에서 꼬리까지 이어지는 미드라인을 유의하십시오. 측면과 내부 표면의 머리카락이 서로 다른 방향으로 자라는 능선을 종종 볼 수 있습니다. 일반적으로, 주사는 중간 선 에서 측면 측면에 대 한 이루어집니다. 위장혈증은 종아리 근육이며이 근육에 주사는 또한 후방 측면에서 가장 잘 수행됩니다.

둔부 근육의 경우, 위치한 랜드마크에서 바늘을 최대 깊이5mm에 삽입하십시오. 근육 손상을 방지하기 위해 주사 중에 주사기를 재배치하지 마십시오. 다음으로, 배치가 혈관이 아닌 근육 내에 있는지 확인하기 위해 흡인. 그리고 마지막으로, 신속하고 꾸준한 방식으로 재료를 주입, 빠른 주사는 조직 외상을 일으킬 것이기 때문에. 삽입의 것과 동일한 경로에 따라 수직 방식으로 바늘을 제거합니다. 위장 근육의 경우 바늘을 최대 깊이 3mm로 삽입하고 둔부 근육과 동일한 방식으로 주사를 수행하십시오.

마지막으로, 설치류의 꼬리 정맥에서 IV 주입을 수행하는 방법을 알아 봅시다. 마우스와 쥐 모두에게 동일한 방법이 적용됩니다.

원통형 구속 튜브에 동물을 놓고 약 2-5 분 동안 MEDIUM로 설정된 전기 가열 패드를 사용하여 동물의 몸 전체를 따뜻하게하십시오. 혈관이 팽창 될 때까지 동물을 따뜻하게 계속, 그것은 눈에 띄게 더 큽니다. 측면 의 caudal 꼬리 정맥은 꼬리의 측면에 있습니다. 복부 중질에 있는 동맥은 주입 목적을 위해 적합하지 않습니다. 구속 장치를 회전시키고 꼬리를 배치하여 측면 꼬리 정맥이 위를 향하고 장력 하에서 유지됩니다. 과도한 장력을 적용하지 마십시오 또는 혈관을 스트레칭 할 수 있으며 혈류가 감소 할 수 있습니다.

바늘 벨-업을 가능한 한 혈관 위에 직접 놓고 약간의 압력을 가하여 바늘을 척추와 평행하게 꼬리에 밀어 넣습니다. 천천히 유체 모션으로 재료를 주입하고 혈액이 주입 물질에 의해 밀려나면서 혈관이 희미해지는 것을 알 수 있습니다. 바늘이 용기에 제대로 배치되지 않으면 주입 할 때 강한 저항이있을 것이며, 힘으로 주입하면 재료가 피하 공간을 채우고 꼬리가 풍선됩니다. 정맥 주사하도록 설계된 물질로 즉시 중지 - 주변 조직에 인과성 수 있습니다. 바늘을 철회하고 꼬리에 더 미친 듯이 또 다른 주사를 시도합니다. 성공적인 주사 후, 바늘을 철회하고 케이지에 동물을 반환하기 전에 좋은 hemostasis을 보장하기 위해 주사 부위에 압력을 적용합니다.

이제 일반적인 주입 방법에 익숙해졌으므로 약물 전달 이외의 이러한 투여 경로의 일부 응용 프로그램을 살펴보겠습니다.

몇몇 실험에서, 마우스는 감염을 공부하기 위하여 특정 병원체로 주입됩니다. 여기에서, 연구원은 병변을 일으키는 원인이 되는 항생 저항하는 박테리아를 소개하기 위하여 피하 경로를 이용하고, 이 병변의 크기는 병원체의 독성을 위한 판독으로 봉사했습니다. 다양한 과학자들은 전신 전달 에 따라 줄기 세포의 분포와 생존을 연구하는 데 관심이 있습니다. 이 연구에서, 연구원은 다발성 경화증 동물 모형에 있는 유전으로 태그된 신경 줄기 세포의 꼬리 정맥 주입을 수행하고 척수 및 두뇌 지구에 주입된 세포의 분포를 찾아냈습니다.

또 다른 실험에서, 연구원은 근육 이영양증의 동물 모형에 근육으로 근육으로 형광꼬리를 붙인 myoblasts를 주입했습니다. 그 후, 생물 발광은 줄기 세포의 성공적인 이식을 분석하기 위해 수행되었다. 마지막으로, 주사는 또한 동물 모델을 생성하는 데 사용할 수 있습니다. 이 과학자들은 강력한 간 독소인 디메틸니트로사민(Dimethylnitrosamine)의 관류 주사를 퍼포닝하여 수컷 위스타 쥐에서 간 섬유증의 동물 모델을 생성했으며, 이는 간 질환의 발병을 연구하는 데 사용되었습니다.

당신은 단지 일반적으로 고용 된 비경구 주사를 논의 하는 화합물 관리에 JoVE의 첫 번째 할부를 보았다. 최적의 전달 경로는 주입된 용액의 pH, 부피 및 점도를 포함한 여러 요인을 기반으로 합니다. 그리고 각 기술은 실험적 요구와 관련하여 고려해야 할 장점과 단점을 가지고 있습니다. 언제나처럼, 시청주셔서 감사합니다!

Transcript

화합물 투여는 종종 동물 연구의 필수 구성 요소이며, 화합물이 정확하고 인도적인 방식으로 전달되도록 하기 위해 많은 요소를 평가해야 합니다. 두 가지 주요 투여 경로는 소화관을 통한 경장과 소화관 외부의 비경구입니다. 가장 큰 차이점은 화합물이 경장 경로를 통해 투여되면 혈류에 들어가기 전에 간 대사를 겪는다는 것입니다. 반면, 정맥 주사 또는 근육 주사와 같은 비경구 경로를 통해 이 물질은 간을 통한 이 첫 번째 통과를 건너뛰어 일반적으로 더 높은 생체 이용률을 초래합니다.

복합 투여에 관한 시리즈의 첫 번째 비디오에서는 일반적으로 투여 경로 선택에 영향을 미치는 요인에 대해 논의하는 것으로 시작하겠습니다. 그런 다음 SC 또는 SubQ로 약칭되는 피하 주사, 복강내 또는 IP, 근육 내 또는 IM, 정맥 주사(일명 IV)를 포함한 가장 일반적인 비경구 주사 방법을 검토합니다.

모든 유형의 화합물 투여 절차를 수행하기 전에 염두에 두어야 할 몇 가지 사항을 검토하는 것으로 시작하겠습니다. 첫 번째 단계는 주입할 용액 또는 현탁액을 준비하는 것이며, 물질 준비에 대한 첫 번째 기본 고려 사항은 무균입니다. 동물에게 병원균이 유입되는 것을 방지하려면 주사 재료와 사용할 바늘 및 주사기가 멸균 상태여야 합니다.

두 번째 고려 사항은 생리적 호환성입니다. 투여 용액은 경장 투여든 비경구 투여든 화합물이 적절하게 흡수되고 조직 손상을 방지할 수 있도록 적절한 pH로 생리학적으로 완충되어야 합니다. 세 번째 요인은 주사 물품의 점도이며, 이는 바늘 선택에 중요한 역할을 합니다. 일반적으로 20-30 게이지 바늘은 마우스와 쥐의 비경구 투여 절차에 사용됩니다. 이러한 바늘의 허브는 일반적으로 쉽게 식별할 수 있도록 색상으로 구분되어 있습니다.

용액은 이러한 바늘 중 하나 이상을 통과할 수 있는 충분한 유동성을 가져야 합니다. 솔루션이 둘 이상을 통과할 수 있는 경우 일반적으로 가능한 가장 작은 게이지를 선택하는 것이 좋습니다. 다음 요인은 주사기 선택에 영향을 미치는 투여량입니다. 바늘과 마찬가지로, 올바른 눈금으로 정확한 투여에 필요한 가능한 가장 작은 주사기를 선택해야 합니다. 바늘 게이지와 투여량도 경로와 투여되는 동물의 종, 크기 및 연령에 따라 달라집니다. 아래 표 1을 참조하여 이 비디오에서 논의된 경로와 관련된 값을 검토합니다. 마지막으로 고려해야 할 중요한 사항은 흡수율이며, 이는 각 투여 경로에 따라 크게 다르며 가장 적합한 방법을 선택하는 데 중요한 역할을 할 수 있습니다.

그럼, 일상적으로 채용되고 있는 주입 방법의 특징에 대해 이야기해 보죠.

SC 또는 SubQ Injection은 피부를 들어 올려 만든 가상 공간에서 피부층과 근육 사이의 물질을 배치합니다. 이를 통해 더 많은 양을 안전하게 주입할 수 있지만 흡수 속도가 다른 경로보다 느리기 때문에 보다 지속적인 효과를 제공합니다. IP 투여 중에 화합물은 복막강에 직접 주입됩니다. 이것은 많은 양의 솔루션을 제공하는 데 사용되는 또 다른 일반적인 방법입니다. IP 주사는 비경구 투여로 간주되지만 흡수 메커니즘은 실제로 경구 투여와 더 유사합니다.

IM 주사는 화합물을 둔근 또는 비복근에 직접 전달합니다. 주입된 물질인 IM은 근육 조직 내에 혈관이 풍부하기 때문에 빠르게 흡수되기 때문에 경우에 따라 선호되는 경로가 될 수 있습니다. 근육에 부적절하거나 반복적인 주입은 신경 손상을 일으켜 마비나 근육 괴사를 유발할 수 있습니다. 마지막으로, 동물의 꼬리 정맥에 IV 주사를 놓는 것은 물질이 순환계로 직접 도입되기 때문에 가장 효과적인 투여 경로입니다. 이 화합물은 꼬리 측면에 위치한 측면 꼬리 꼬리 정맥 중 하나에 주입되어야 합니다. 꼬리의 복부 정중선을 따라 달리는 혈관이 있는데, 이는 주입 목적에 적합하지 않습니다.

지금까지 배경에 대해 이야기했으니, SC 주사부터 시작해 시술을 배워 갑시다. 쥐의 경우 동물의 꼬리를 잡고 철사 뚜껑과 같은 다른 안전한 표면에 놓으십시오. 그런 다음 목 주위의 피부를 들어 올려 텐트를 형성하여 동물을 수동으로 제지하십시오. 다음으로, 뒷발을 표면에 대고 동물을 테이블 위에 올려 놓고 손뒤꿈치를 테이블 위에 올려 놓아 호흡을 방해할 수 있는 동물에게 과도한 무게를 주지 않도록 합니다.

주사하려면 주사할 용액이 든 주사기를 집어 들고 바늘을 척추와 평행하게 하고 머리에서 멀어지게 하여 두개골에 구멍이 날 가능성을 피하십시오. 그런 다음 베벨이 위를 향하도록 바늘을 삽입하여 피부 속으로 부드럽게 미끄러지도록 합니다. 플런저를 뒤로 당겨 바늘이 제대로 배치되었는지 확인하십시오. 플런저를 뒤로 당길 때 배압이 있으면 바늘이 올바른 위치에 있는 것입니다. 플런저로 공기가 유입되면 바늘의 위치를 변경해야 합니다.

바늘의 위치가 올바른지 확인한 후 일정한 동작으로 천천히 주입합니다. 주입 후 잠시 멈추고 주사 물품의 손실을 방지하기 위해 바늘을 피부 아래에서 약간 회전시킵니다. 그런 다음 주사 부위의 피부를 잡고 바늘을 빼냅니다. 이와 동일한 방법을 젖을 뗀 쥐에도 사용할 수 있습니다.

성인 쥐의 경우 먼저 장치를 사용하여 동물을 제지해야 하며, 이 절차는 이 컬렉션의 "취급 및 구속의 기초" 비디오에서 설명합니다. 그런 다음 마우스에서 수행 한 것과 동일한 방식으로 SC 주입을 수행 할 수 있습니다.

다음으로 IP 주입을 수행하는 방법을 배웁니다. 생쥐의 경우 양손 구속 기술을 사용하여 동물을 수동으로 제지하며, 이는 "취급 및 구속의 기초" 비디오에 다시 설명되어 있습니다. 주로 사용하지 않는 손이 동물이 회전하는 것을 방지할 수 있을 만큼 목에 충분히 높게 위치하도록 합니다. 세 번째 손가락과 네 번째 손가락 사이에 꼬리를 끼우거나 나머지 손가락과 엄지 손가락 밑 부분 사이에 피부를 단단히 고정하여 뒷다리를 안정시킵니다.

다음으로, 동물의 복부가 드러나도록 위치를 잡는다. 머리가 아래를 향하도록 동물을 30으로 기울입니까? 장이 앞으로 떨어질 수 있도록 각도. 주입 랜드마크는 다음과 같이 설명할 수 있습니다: 몸을 가로질러, 엉덩이 상단, 옆구리에서 옆구리까지 수평으로 확장되는 가상의 선을 그립니다. 그런 다음 반대 방향으로 자라는 머리카락이 만나는 선을 따라 내측 경계 또는 정중선을 그립니다. 마지막으로, 수컷의 경우 엉덩이 위에서 포피까지, 암컷의 경우 젖꼭지를 따르는 선인 측면 경계를 상상해 보십시오. 이는 안전한 IP 주입을 위한 삼각형 영역을 제공합니다.

다음으로 논의할 방법은 IM 주입입니다. 생쥐와 쥐 모두에 대해 이 기술을 억제하려면 두 사람 또는 구속 튜브를 사용해야 합니다. 여기에서는 구속 장치를 사용하는 1인 방법에 대해 설명합니다.

먼저 동물을 튜브에 넣고 뒷다리를 내민 상태에서 꼬리를 당겨 동물의 위치를 잡습니다. 다음으로, 대퇴골의 두개골 부분에서 옆구리의 피부를 잡고 다리를 펴고 억압이 구부러지는 것을 방지합니다. 그런 다음 주입 부위를 시각화할 수 있도록 구속 장치를 배치합니다.

둔근 랜드마크를 식별하려면 대퇴골 뒤쪽에 있는 둔근 질량을 찾습니다. 뼈를 촉진할 수 있고 큰 근육을 쉽게 느낄 수 있습니다. 호크의 지점에서 꼬리까지 이어지는 정중선에 주목하십시오. 측면 표면과 내부 표면의 머리카락이 함께 모이는 능선이 반대 방향으로 자라는 것을 자주 볼 수 있습니다. 일반적으로 주사는 정중선에서 측면으로 이루어집니다. 비복근은 종아리 근육이며 이 근육에 주입하는 것도 후방에서 가장 잘 수행됩니다.

둔근의 경우 위치한 경계표에서 바늘을 최대 약 5mm 깊이까지 삽입합니다. 근육 손상을 방지하기 위해 주사 중 주사기의 위치를 변경하지 마십시오. 다음으로, 배치가 혈관이 아닌 근육 내에 있는지 확인하기 위해 흡인합니다. 그리고 마지막으로, 빠른 주입은 조직 외상을 유발할 수 있으므로 느리고 꾸준한 방식으로 재료를 주입하십시오. 삽입과 동일한 경로를 따라 수직으로 바늘을 제거합니다. 비복근의 경우 바늘을 최대 3mm 깊이까지 삽입하고 둔근과 동일한 방식으로 주입을 수행합니다.

마지막으로 설치류의 꼬리 정맥에 IV 주사를 수행하는 방법을 알아 보겠습니다. 동일한 방법이 마우스와 쥐 모두에 적용됩니다.

동물을 원통형 구속 튜브에 넣고 MEDIUM으로 설정된 전기 가열 패드를 사용하여 약 2-5분 동안 동물의 몸 전체를 따뜻하게 합니다. 혈관이 눈에 띄게 커질 때까지 동물을 계속 따뜻하게 하십시오. 측면 꼬리 꼬리 정맥은 꼬리의 측면에 있다는 것을 기억하십시오. 복부 정중선에 있는 동맥은 주사 목적에 적합하지 않습니다. 구속 장치를 회전하고 측면 꼬리 정맥이 위를 향하고 장력을 받도록 꼬리를 배치합니다. 과도한 장력을 가하지 마십시오. 그렇지 않으면 혈관이 늘어나 혈류가 감소할 수 있습니다.

주삿바늘을 가능한 한 말단부로 혈관 바로 위에 놓고 약간의 압력을 가하여 바늘을 척추와 평행한 꼬리로 밀어 넣습니다. 느리고 유동적인 동작으로 재료를 주입하고 주입 재료에 의해 혈액이 밀려나면서 혈관이 희어지는 것을 확인하십시오. 바늘이 혈관에 제대로 위치하지 않으면 주입 할 때 강한 저항이 있고, 힘으로 주입하면 재료가 피하 공간을 채우고 꼬리가 부풀어 오릅니다. 정맥 주사하도록 설계된 물질이 주변 조직에 부식성을 유발할 수 있으므로 즉시 중지하십시오. 바늘을 빼고 꼬리에 더 두개골적으로 다른 주사를 시도하십시오. 성공적인 주입 후 바늘을 빼내고 주사 부위에 압력을 가하여 동물을 케이지로 되돌리기 전에 좋은 지혈을 보장합니다.

이제 일반적인 주사 방법에 익숙해졌으므로 약물 전달 이외의 이러한 투여 경로의 몇 가지 응용 프로그램을 살펴보겠습니다.

여러 실험에서 감염을 연구하기 위해 쥐에게 특정 병원체를 주입합니다. 여기서 연구진은 피하 경로를 사용하여 병변을 유발하는 항생제 내성 박테리아를 도입했으며, 이러한 병변의 크기는 병원체의 독성을 판독하는 역할을 했습니다. 다양한 과학자들이 전신 전달 후 줄기세포의 분포와 생존을 연구하는 데 관심이 있습니다. 이 연구에서 연구자들은 다발성 경화증 동물 모델에서 유전적으로 태그가 지정된 신경 줄기 세포의 꼬리 정맥 주입을 수행하고 주입된 세포의 척수 및 뇌 부위에 대한 분포를 찾았습니다.

또 다른 실험에서 연구자들은 근이영양증의 동물 모델에 형광 태그가 붙은 근아세포를 근육 주사로 주입했습니다. 그 후, 줄기세포의 성공적인 이식을 분석하기 위해 생물발광을 수행했습니다. 마지막으로, 주사를 사용하여 동물 모델을 생성할 수도 있습니다. 이 과학자들은 수컷 Wistar 쥐에서 강력한 간 독소인 디메틸니트로사민을 복강내 주사하여 간 섬유증의 동물 모델을 생성한 다음 간 질환의 발달을 연구하는 데 사용했습니다.

일반적으로 사용되는 비경구 주사에 대해 논의하는 화합물 투여에 대한 JoVE의 첫 번째 기사를 시청하셨습니다. 최적의 전달 경로는 주입된 용액의 pH, 부피 및 점도를 포함한 여러 요인을 기반으로 한다는 점을 기억하십시오. 그리고 각 기술에는 장점과 단점이 있으며, 이는 실험적 요구 사항과 관련하여 고려되어야 합니다. 언제나 그렇듯이 시청해 주셔서 감사합니다!

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