농축 배양: 선택 및 차동 매체에서 호기성 및 혐기성 미생물 배양

1. 준비

1. 시작하기 전에 손을 철저히 씻고 적절한 크기의 장갑을 착용하십시오.
2. 5% 나트륨 하이포염(표백제)으로 작업 표면을 살균하고 철저히 건조시다.
3. 작업 하는 동안 벤치 상단을 만지지 않도록 빈 120 mL Erlenmeyer 플라스크에 접종 루프를 배치합니다.

2. 성장 미디어 및 문화

1. 냉장고에서 매니톨 소금 한천(MSA), 에오신 메틸렌 블루 한천(EMB), 8개의 트립틱 두유 한천(TSA)을 냉장고에서 4접시를 모으세요(상업적으로 구입할 수 있음).
2. 청소된 작업 영역에 접시를 놓습니다.
3. 다음 국물 문화를 수집 : 에셀리치아 대장균, 황색 포도상구균, 황색 포도상 구균 표피증, 프로테우스 저속한. 주의: 이 것들은 에어로빅 유기체이기 때문에, 관의 모자는 약간 느슨해야 합니다.
4. 모든 문화를 청소된 작업 표면에 테스트 튜브 랙에 배치합니다.

3. 문화와 배양 의 양도

1. 스탠드 또는 모든 재료가 닿는 벤치에 앉아 있습니다.
2. 무균 기술을 사용하여 박테리아를 접시에 옮기려면 먼저 주황색이 빛질 때까지 루프를 불태우고 공중에서 식힙니다.
3. 루프가 식는 동안, 대장균의국물 문화를 취한 다음 새끼 손가락을 사용하여 캡을 엽니다.
4. 튜브의 개구부를 빠르게 화염으로 만드십시오. 이렇게 하면 오염이 방지됩니다.
5. 루프를 튜브에 담그고 유기체를 EMB 플레이트의 첫 번째 사분면에 줄입니다.
6. 첫 번째 줄무늬가 수행된 후 루프를 불태우고 첫 번째 줄무늬를 한 두 번만 통과하는 두 번째 줄무늬를 수행합니다. 이렇게 하면 단일 식민지 격리가 허용되고 오염이 있는지 확인할 수 있습니다.
7. 판의 네 사분면이 모두 줄무늬가 될 때까지 이것을 반복합니다.
8. 이제, 최종 생성물이 하나의 MSA 플레이트, 1개의 EMB 플레이트 및 유기체 당 2개의 별도 TSA 플레이트가 되도록 동일한 줄무늬 도금 방식으로 4개의 유기체의 나머지 각각을 전송합니다.
9. 모든 유기체가 옮겨지면 루프를 마지막으로 화염에 태우고 버리게 됩니다.
10. 각 유기체와 TSA 플레이트 1개를 가스 패킷에 넣은 다음 가스 봉지를 흔들어 플레이트와 함께 챔버에 넣습니다. 단단히 밀봉하십시오.
11. 모든 플레이트를 하룻밤 사이에 37°C에서 배양합니다.
12. 5% 표백제로 작업 표면을 마지막으로 살균합니다.

4. 결과 읽기 및 기록

1. 인큐베이터에서 플레이트를 제거하고 깨끗한 실험실 벤치에 놓습니다.
2. 실험실 노트북의 각 플레이트의 유기체의 성장에 유의하십시오. 특히 다음 사항에 대한 자세한 내용은 다음과 같은 사항을 자세히 설명합니다.
   1. 각 플레이트의 식민지 의 숫자와 크기 (존재하는 경우) 각 도금 변형에 대해
   2. MSA 플레이트에서 자라는 식민지를 둘러싼 한천의 출현
   3. EMB 플레이트에서 자라는 식민지의 출현
   4. 외부성장과 가스 패키지 내부의 TSA 플레이트 간의 성장 차이