Morpholino 매개 유전자 편집: 단세포 동굴물고기 알에서 번역 차단 모르폴리노 올리고뉴클레오티드를 사용한 유전자 녹다운 기술

주사 당일에는 유리 피펫을 사용하여 단세포 난자를 주입 플레이트로 옮기고 주입 플레이트의 최대 5 줄을 한 줄에 30-40 개의 난자로 채웁니다. 소량의 물고기 시스템 물로 계란을 촉촉하게 유지하십시오. 모르폴리노를 얼음 위에서 해동하고, 긴 마이크로로더 피펫 팁을 사용하거나 끝에 2-4마이크로리터 볼루스를 추가하여 달걀 당 400피코그램의 모르폴리노가 주입되도록 주입 용액을 준비합니다.

모든 바늘이 로드되면 집게를 사용하여 주사 바늘 끝에서 초과 길이를 자르고 첫 번째 바늘을 피코리터 마이크로 인젝터에 연결된 마이크로 매니퓰레이터에 장착합니다. 그런 다음 주사 접시를 해부 현미경 아래에 놓고 마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 바늘로 각 난자를 관통시킨 후 1나노리터의 모르폴리노 주사 용액을 노른자에 직접 주입합니다.