Name: 마우스의 응용은 M 세포에 의해 박테리아 이해를 평가하는 Peyer의 패치 장 루프 분석 출혈도 잡았 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-12-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 59 s
Description: 배우세요 마우스 Peyer 패치 장 루프 분석을 이용하여 M 세포에 의한 박테리아 이화작용을 평가하는 방법을. 이 기술은 점막 면역 반응 메커니즘을 연구하는 데 활용됩니다.

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저자는이 기술을 개발하기위한 모든 EIB 회원 감사드립니다. 이 연구는 우선 지역 &quot;막 트래픽&quot;(호) 및 &quot;감염성 현상 매트릭스&quot;(KH), 젊은 과학자 (SF와 KH) 및 학술 연구 (호에 대한 과학 연구 보조금에 의해 부분적으로 지원되었다 혁신 분야 교육부, 문화, 스포츠, 과학 및 일본의 기술에서 &quot;세포내 물류&quot;(호)에), 그리고 과학 연구.

1. 세균성 세포의 준비 <ol><li> 줄무늬의 글리세롤는 LB에 (예 : GFP 표현 S. Typhimurium)에 형광 박테리아를 꽉찬 100 μg / 암피실린의 ML이 포함된 한천 플레이트. </li><li> 새로운 LB 매체 2 ML에서 하룻밤 LB 한천 배지에서 문화는 하나의 식민지. </li><li> 600 NM에서 1.0의 광학 밀도에 도달할 때까지 새로운 LB 매체와 부화 4.5 ML에 세균성 문화의 0.5 ML을 추가합니다. </li><li> 원심 분리하여 세포를 수확 세균 (3,000 XG, 5 분, 4 ° C). </li><li> 뜨는을 취소하고 멸균 인산 완충 식염수 (PBS)의 5.0 ML로 두 번 씻는다. </li><li> PBS 5 ML과 박테리아 펠렛을 Resuspend하고 inoculum로 약 10 7 콜로니 형성 단위 (CFU)이있는 정지 50 μl를 사용합니다. </li><li> 찬란 분류 박테리아를 사용하는 경우에는 세균성 세포는 표준 프로토콜에 따라 형광 라벨 시약에 의해 분류되었다. </li></ol> 2.nesthesia <ol><li> 5 % (V / V)와 함께 작은 플라스틱 상자 (10 × 10 × 5cm)를 기입하면 증발 isoflurane 공기 (유량 : 200 ML / 분)와 혼합.을 </li><li> 마취 여덟에있는 상자에 열여섯 - 약한 세의 남성 또는 여성 쥐. </li><li> 마취 후 부검 테이블에 마우스를 이동합니다. </li><li> 지속 2퍼센트 (V / V)에 의해 생쥐를 마취하는 것은 증발 isoflurane 공기 (유량 : 200 ML / 분)와 함께 혼합 (그림 1).를 이것은 터미널 절차입니다. </li></ol> 3. 출혈도 잡았 Peyer의 패치 루프 분석 <ol><li> 복부 피부와 다음의 절개 1cm가 anesthetized 마우스의 복부 복막을 잘라 Peyer의 패치를 포함하고있는 작은 창자를 꺼내. </li><li> 혈관을 피하기 위해 간병, 봉제 원사와 대장을 Ligate. 참고 : 대장만이 바인딩 한쪽, 그리고 느슨한 반대편 두십시오. </li><li> 느슨한의에서 출혈도 잡았 Peyer의 패치 루프에 세균 현탁액 또는 주사기로 PBS (제어) 50 μl를 주입대장의 IDE (그림 2). </li><li> 느슨한 측면을 바인딩, 그리고 클립과 마우스의 복부를 닫습니다. </li><li> 1 H 후, 출혈도 잡았 Peyer의 패치 루프를 제거하고 경추 전위에 의한 마우스를 안락사. </li><li> 출혈도 잡았 Peyer의 패치 루프에서 소비세 Peyer의 패치. </li><li> 초과 점막 액체와 세균을 제거 바늘에 연결된 주사기를 이용한 PBS의 1ml에 의해 Peyer의 패치의 혀끝의 측면을 번쩍. Peyer의 패치에게 추가로 두 번 깜박임. </li></ol> 4. 전체 마운트 얼룩과 Peyer의 패치 공촛점 현미경 분석 <ol><li> 1 시간을위한 얼음 BD Cytofix / Cytoperm 솔루션에 Peyer의 패치를 수정. </li><li> 30 분 0.1 % (W / V) 사포닌, 0.2 % (W / V) PBS에 BSA를 포함 차단 버퍼 1 ML과 블록 다음 BD 페름 / 5 분 버퍼를 세척 1ml와 Peyer의 패치 세 번 씻고, 그리고 얼음. </li><li> 200 배 희석이 방지 마우스를 표본으로 GP2 단클론 항체 (5 μg / ML)는 검색에 추가M 세포. </li><li> 4 2 실온에서 시간이나 야간을위한 품어 ° C. </li><li> 차가운 PBS 1 ML로 세 번 씻어 다음 표본에 DyLight549 (20 μg / ML)와 복합 200 배 희석 안티 쥐 IgG 항체를 추가합니다. </li><li> 2 시간을위한 얼음에 샘플을 품어. </li><li> 차가운 PBS 1 ML로 세 번 씻어 다음, F - 굴지을 감지하기 위해 시편 50 배 희석 알렉사 633 복합 Phalloidin를 추가합니다. </li><li> 2 시간을위한 얼음 알을 품다. </li><li> 차가운 PBS 1 ML로 가볍게 씻으십시오. 그런 다음 슬라이드에 원형 커버 유리 3-4 조각을 배치하고, 슬라이드 (그림 3)에서 PBS에서 글리세롤의 30 % 용액에 표본 포함. </li><li> DM - IRE2 공촛점 레이저 스캐닝 현미경이나 DeltaVision 복원 deconvolution 현미경과 표본을 관찰. </li></ol> 5. 대표 결과 : 마우스의 표본 예제는 GFP - S. 균과 Peyer의 패치 루프 분석 출혈도 잡았murium은 DeltaVision 복원 deconvolution 현미경 (그림 4)와 함께 관찰되었다. GFP - S. Typhimurium은 GP2 + M 세포에 의해 transcytosed 있습니다. 마우스 Peyer의 패치 장 루프 분석은 M 세포에 의해 transcytosed 수 있습니다 공생이나 병원성 세균의 종류를 식별할 수 있습니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/3225/3225fig1.jpg"> 그림 1. 증발 isoflurane 조건하에 생쥐의 아나스타샤. 증발 isoflurane는 마취 - 전용 장치 (왼쪽)가 제공되었습니다. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/3225/3225fig2.jpg"> 그림 2. 출혈도 잡았 Peyer의 패치 장 루프 분석의 요약. 형광 박테리아 정지는 대장의 느슨한 측면에 출혈도 잡았 Peyer의 패치 루프에 주사기로 주입했다. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/3225/3225fig3.jpg"> <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/3225/3225fig4.jpg"> 그림 4. GFP - S. Typhimurium과 Peyer의 패치 루프 분석 출혈도 잡았 마우스의 예. M 세포 특정 마커 5보고 GP2는, 안티 - 마우스 GP2 항체 (적색)와 스테인드했습니다. 표본은 DeltaVision 복원 deconvolution의 현미경으로 관찰했다. GFP - 표현 S. Typhimurium은 M 세포의 꼭대기의 플라즈마 막과 subapical 세포질 vesicles (화살촉)에 GP2와 함께 공동화된되었습니다. 탑, 혀끝의 볼 수 있습니다. 하단과 측면, 측면 전망이 있습니다. 스케일 바 : 10 μm의.

<ol><li>Fagarasan, S., Honjo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+IgA+synthesis%3A+regulation+of+front-line+body+defences%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Intestinal IgA synthesis: regulation of front-line body defences.</a> Nat. Rev. Immunol. 3, 63-72 (2003).</li>
<li>Hapfelmeier, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+microbial+colonization+of+germ-free+mice+reveals+the+dynamics+of+IgA+immune+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Reversible microbial colonization of germ-free mice reveals the dynamics of IgA immune responses.</a> Science. 328, 1705-1709 (2010).</li>
<li>Owen, R. L., Jones, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+cell+specialization+within+human+Peyer%27s+patches%3A+an+ultrastructural+study+of+intestinal+lymphoid+follicles%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Epithelial cell specialization within human Peyer's patches: an ultrastructural study of intestinal lymphoid follicles.</a> Gastroenterology. 66, 189-203 (1974).</li>
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</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

<html> 세균 현탁액과 출혈도 잡았 Peyer의 패치의 부화 시간은 M 세포에 박테리아 정관을 준수하기 위해 1 시간을 위해 일반적이다. 4 시간 보육의 경우, 박테리아가 자주 Peyer의 패치의 T 세포 영역에 감지됩니다. 증발 isoflurane 흡입 마취는 마우스가 안정적으로 지킬 수로서, 세균 현탁액과 출혈도 잡았 Peyer의 패치의 배양 시간은 Peyer의 패치에 T - 세포 영역으로 이동 박테리아를 관찰 확장 가능합니다. 본 실험의 중요한 포인트는 대장을 ligating 때 혈관을 긁히지 않게 처리하는 것입니다. GFP - 표현 박테리아를 사용하지 않는 경우에는, 우리는 또한 상업적인 형광 라벨 시약에 의해 찬란 분류 박테리아를 사용할 수 있습니다. 시약은 아마도 당신이 사용하고자하는, 박테리아 M 세포에 표현 분자 첨부 파일을 억제하면 통합 세균을 감지, 해당되는 경우, 특정 주 항체를 사용해야합니다. ontent &quot;&gt; 출혈도 잡았 루프 분석 방법은 이전에 6, 7을 설명...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 (옵션) </th></tr><tr><td> LB 한천 암피실린 - 100 </td><td> 시그마 </td><td> L5667 </td><td></td></tr><tr><td> Cy3 모노 반응 염색약 </td><td> GE 헬스케어 </td><td> PA23001 </td><td></td></tr><tr><td> 알렉사 형석 350 카르복실산, succinimidyl 에스테르 </td><td> Invitrogen </td><td> A10168 </td><td></td></tr><tr><td> 흡입 마취 기구 </td><td> 시나 제작소 </td><td> SN - 487 </td><td></td></tr><tr><td> 고정 및 Permeabilization 용액 </td><td> BD </td><td> 554,722 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 마우스 당단백질이 항독소 </td><td> MBL </td><td>D278 - 3 </td><td> 200 배 희석 (5μg/ml) </td></tr><tr><td> 염소 방지 쥐 IgG, F (AB &#39;) 2 조각 구체적인 </td><td> 잭슨 ImmunoResearch </td><td> 112-505-006 </td><td> 200 배 희석 (20μg/ml) </td></tr><tr><td> 알렉사 형석 633 Phalloidin </td><td> 분자 프로브 </td><td> A22284 </td><td> 50 배 희석 </td></tr><tr><td> 공촛점 레이저 현미경 스캐닝 </td><td> Leica 마이크로 시스템즈 </td><td> DMIRE2 </td><td></td></tr><tr><td> DeltaVision 복구 deconvolution 현미경 </td><td> 응용 정밀 </td><td> DeltaVision 코어 </td><td></td></tr></tbody></table>

마우스의 응용은 m 세포에 의해 박테리아 이해를 평가하는 peyer의 패치 장 루프 분석 출혈도 잡았

Application of a Mouse Ligated Peyer&#x2019;s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

우리의 창자의 안쪽은 공생 박테리아의 거대한 숫자 살고 있습니다. 위장관의 점막 표면은 지속적으로 그들과 때때로 병원균에 노출됩니다. 인내심을 관련 림프 조직 (갈트)는 이러한 미생물 1, 2에 대한 점막 면역 반응의 유도에 중요한 역할을한다. 점막 면역 반응을 시작하려면, 점막 항원이 같은 Peyer의 패치로 구성 림프 모공에 상피 장벽을 가로질러 내장 루멘에서 이송해야합니다. 이 항원 transcytosis는 전문 상피 세포 M 3, 4에 의해 중재됩니다. M 세포가 적극적으로 macromolecules과 미생물을 phagocytose 비정형 상피 세포 있습니다. 돌기 세포 (DCS)와 macrophages, 저하에 대한 lysosomes에 대상 항원과는 달리, M 세포는 주로 내면 항원을 transcytose. M 세포를 통해이 활발한 macromolecular의 transcytosis는 기본 구성 림프 모공에 항원을 제공합니다D는 항원에 특정한 점막 면역 반응을 시작을위한 필수적인 것으로 생각됩니다. 그러나, M 세포하여 항원 이해를 촉진 분자 메커니즘은 대부분 알 수 있습니다. 우리는 이전에 특별히 enterocytes 간의 M 세포의 꼭대기의 플라즈마 막에 표현 당단백질 2 (Gp2)는, 대장균과 살모넬라균 enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium을 포함하여 공생과 enterobacteria 병원성의 하위 집합에 대한 transcytotic 수용체로 역할을보고있다 ), FimH, 내가 세균성 외부 멤브레인 5 pili 유형의 구성 요소를 인식하여. 여기, 우리는 M 세포에 의해 박테리아 이해를 평가하기 위해 마우스 Peyer의 패치 장 루프 분석의 응용 프로그램에 대한 방법을 제시한다. 이 방법은 이전에 6, 7 장의 설명 마우스 루프 분석의 향상된 버전입니다. 개선된 점은 다음과 같습니다 : 1. Isoflurane은 마취제로 사용되었다. 2. 약 1cm 출혈도 잡았 장 루프 includING Peyer의 패치를 설치했습니다. 3. M 세포에 의해 촬영 박테리아는 찬란 형광 라벨 시약이나 녹색 형광 단백질 (GFP) 같은 형광 단백질 overexpressing로 분류되었습니다. 4. Peyer의 패치를 덮고 뿌리 - 관련 상피의 M 세포는 안티 Gp2 항체와 전체 마운트 immunostainig에 의해 발견되었다. 5. M 세포에 의해 형광 박테리아 transcytosis은 공촛점 현미경 분석에 의해 관찰되었다. 마우스 Peyer의 패치 장 루프 분석은 답변을 공급 수 어떤 종류의 공생 또는 M 세포에 의해 transcytosed 병원성 세균 및 M 세포를 통해 점막 면역 체계를 자극하는 방법의 분자 메커니즘을 이해로 우리를 이끌 수 있습니다.

Peyer의 패치를 다루는 전문 뿌리 - 관련 상피의 M 세포는 창자 - 관련 림프 조직에서 점막 immunosurveillance을위한 중요한 역할을한다. 여기 우리는 M 세포에 의해 세균 transcytosis에 대한 평가 방법을 설명<em&gt; 생체내에</em&gt;. 이 방법은 면역 시스템에 M - 세포 기능을 이해하는 방법을 제공합니다.

마우스의 응용은 M 세포에 의해 박테리아 이해를 평가하는 Peyer의 패치 장 루프 분석 출혈도 잡았

우리의 장 내부에는 방대한 수의 공생 박테리아가 서식하고 있습니다. 위장관의 점막 표면은 지속적으로 노출되어 ...

본 실험 절차의 전반적인 목적은 장 점막 면역 체계 내에 위치한 M 세포에 의한 세균 섭취를 조사하는 것입니다. 본 절차의 첫 번째 단계는 마취된 마우스의 장 파이어판(Peyer's patches)을 노출시키고 결찰하는 것입니다. 그 후 결찰된 부위에 형광 세균을 주입합니다.한 시간 후, pyres 패치를 절제합니다. 그 다음 조직 내 세포들을 투과화하고 M 세포 마커인 GP2로 염색합니다. 마지막으로, 공초점 현미경을 사용하여 샘플을 관찰하면 M 세포에 의해 transcytosis되는 박테리아를 시각화할 수 있습니다.M 세포에 의한 박테리아 transcytosis의 분자적 기초에 대한 통찰을 제공하는 것 외에도, 이 방법은 다른 시스템에 적용될 수 있습니다. 예를 들어, 이 프로토콜은 콜레라균과 미생물을 이용하여 염증성 장의 세포 투과성을 분석하는 데 활용될 수 있습니다. 멸균된 유리 스프레더를 사용하여 형광 박테리아를 LB agar 플레이트에 도말하고, 단일 콜로니가 보일 때까지 37 °C에서 배양합니다. 고체 agar에서 단일 콜로니를 채취하여 2 mL의 신선한 LB 배지에 접종합니다.그 다음, 박테리아를 37 °C의 쉐이커에서 하룻밤 동안 배양합니다. 스타터 배양액이 성장하면, 박테리아 500 µL를 4.5 mL의 LB 배지에 옮기고, 이 새로운 배양액을 37 °C에서 3~4시간 동안 또는 600 nm에서의 흡광도(OD₆₀₀)가 1에 도달하여 박테리아 성장이 대수 증식기(log phase)에 진입할 때까지 배양합니다. 이 시점에서, 배양액을 4 °C에서 3000 ×g로 5분 동안 원심분리하여 박테리아를 수확합니다. 원심분리 후 상층액을 제거하고 펠렛을 5 mL의 멸균 PBS로 세척합니다. 세척 단계를 반복한 후, 박테리아를 5 mL의 PBS에 재현탁합니다.마우스를 지속적인 isof fluorine 마취 상태로 둔 후, 멸균 도구를 사용하여 마우스의 복부를 무균적으로 절개합니다. 소장을 노출시켜 PI's patches의 위치를 찾습니다. PI's patches를 찾으면, 멸균 봉합사를 사용하여 패치로부터 한쪽으로 약 5 mm 떨어진 지점에서 장을 결찰합니다.시술 중 혈관이 절단되지 않도록 주의하십시오. 장을 결찰한 후, 주사기를 사용하여 약 10⁷ CFU의 세균 현탁액 50 µL를 장의 느슨한 쪽인 결찰된 pyres patch loop에 주입합니다. 그런 다음 실을 사용하여 장의 반대편을 결찰합니다.클립으로 마우스의 복부를 폐쇄하고, 안락사시키기 전 한 시간 동안 마우스가 마취 상태를 유지하도록 합니다. 파이어스 패치(pyres patch)를 채취하려면 파이어스 패치를 조심스럽게 절제하십시오. 그 다음, 채취한 장 분절에 PBS를 여러 번 강하게 흘려보내 PI 패치의 정단면을 세척하고 과도한 점막액과 박테리아를 제거합니다.PI 패치의 세척이 완료되면, 이를 24웰 플레이트의 웰에 넣고 cyto effects 또는 cyto perm 용액을 첨가합니다. 샘플을 얼음 위에서 1시간 동안 배양합니다. PI 패치가 고정되면, 1 mL의 perm wash buffer에 5분 동안 담급니다.이 세척 단계를 3회 반복합니다. 그런 다음 샘플을 1 mL의 블로킹 버퍼에 넣고 얼음 위에서 30분 동안 배양합니다. 블로킹 단계 이후, anti mouse GP two 단클론 항체를 최종 농도가 5 µg/mL가 되도록 첨가하고, M 세포를 염색하기 위해 샘플을 4 °C에서 하룻밤 동안 배양합니다.다음으로, 이전과 동일하게 샘플을 세척합니다. 접합 항체를 추가하고 샘플을 얼음 위 암소에서 2시간 동안 배양합니다. 샘플 염색이 완료되면, PBS로 샘플을 부드럽게 세척합니다.그 다음, 슬라이드 위에 원형 커버 글라스를 3~4장 놓고 pires 패치를 PBS 내 30% glycerol 용액 200 microliters에 매립합니다. 슬라이드 상의 샘플을 관찰하기 위해 DM IRE two 공초점 레이저 현미경 또는 Delta vision 복원 디콘볼루션 현미경을 사용합니다. 이 이미지에서, 녹색 GFP로 표지된 salmonella typhimurium이 정단 세포막의 적색으로 표시된 GP two에 의해 둘러싸여 있는 것을 확인할 수 있습니다.회전된 이 이미지에서 박테리아가 하단부 정점 세포질 소포 내에 보이는 것을 확인할 수 있습니다. 이 영상을 시청한 후에는 리게이션된 pys 장 Lu 분석법을 사용하여 M 세포에 의한 박테리아의 트랜스사이토시스(transcytosis)를 평가하는 방법을 충분히 이해하게 될 것입니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

이 비디오는 마우스 모델의 장 투과성을 연구하기 위한 회장 루프 모델의 생성을 보여줍니다. 이 방법은 상피 장벽 기능과 그에 따른 면역 반응을 이해하기 위한 라이브 모델을 제공합니다.

마우스 회장 루프 모델: 마우스의 장 투과성을 연구하기 위한 수술 모델

이 비디오에서는 마우스 근위 결장 루프 또는 pcLoop 세그먼트를 생성하는 수술 절차를 설명한 다음 장 상피 투과성을 연구하기 위해 세그먼트에 형광 마커를 내강 내 주입하는 방법을 설명합니다.

Mouse Proximal Colon loop Model의 생성: 내강내 주사 후 혈청 내 형광 마커를 검출하여 근위 결장 루프를 생성하고 장 투과성을 측정하는 수술 절차

Peyer의 패치에있는 셀의 특정 subpopulations (조달청), 창자 관련 림프의 조직의 주요 유도 사이트의 면역 기능을 이해 증가 관심이 있습니다. 여기 흐름 cytometric 분석 및 immunostaining을위한 PP cryosections위한 단일 셀 준비를 PP 준비 병렬 프로토콜을 설명합니다.

림프구와 손쥐 Peyer의 패치에서 수지상 세포를 분리하고 Immunostaining

이 프로토콜은 장 장벽 기능의 생체 외 모델로 절제된 장 조직 제제 또는 "장 주머니"의 사용을 설명합니다. 이 모델은 소화기 질환의 동물 모델에서 특정 장 부위에서 상피 장벽과 점액 겔 층 모두의 무결성을 평가하는 데 사용할 수 있습니다.

예 생체 내 창자 주머 니나는 위장 질환 모델에서 점막 투과성을 평가하는

여기서는 서로 다른 마우스 조직 내에서 IL-22 생성 세포를 시각화하기 위한 형질전환 리포터 마우스 모델을 설명합니다. 이 방법은 마우스에서 다른 사이토카인 또는 비서 단백질의 위치를 추적하는 데 사용할 수 있습니다.

기자 마우스를 사용하여 IL-22 발현 림프구의 시각화

여기에서, 우리는 화학요법 유도한 점막염의 모형을 사용하여 소장 상해 및 보상 과증식의 중요한 종점 그리고 증식 마커를 설치하는 프로토콜을 제시합니다. 우리는 세포 주기 특정 마커를 사용하여 작은 장 무게, 토굴 깊이 및 융모 높이를 엔드포인트로 사용하여 증식 세포의 검출을 입증합니다.

화학요법 유도점막염의 마우스 모형을 사용하여 작은 장 상해 그리고 적응을 평가하기 위하여 중요한 종점 및 증식 마커

인트라비티 현미경 검사를 활용하여, 여기에 제시된 방법은 살아있는 동물에서 장 상피 세포 흘림의 실시간 시각화를 가능하게 합니다. 따라서, 마취마우스의 국소 염색장 점막(acriflavine 및 rhodamineB-dextran)은 공초점 현미경검사를 이용하여 단일 세포 해상도까지 심화된다.

장 내 투과성 및 상피 세포 흘리기 성능을 평가하기 위한 인트라바이탈 현미경 기반 접근법

여기서는 흉부 덕트 림프구를 수집하고 시간 경과 사진을 사용하여 3 시간 동안 쥐 페이어의 패치에서 장 열대 림프구의 이동을 관찰하는 정확한 방법을 설명합니다. 이 기술은 림프구의 역학이 염증 성 조건하에서 어떻게 영향을 받는지 명확히 할 수 있습니다.

쥐 페이어의 패치에서 림프구 역학의 현미경 관찰

Dysregulated 장 상피 장벽 기능 및 면역 반응은 생리적인 모형의 부족 때문에 제대로 조사되지 않는 선동적인 장 질병의 특징입니다. 여기서는 생체 내 점막 투과성 및 백혈구 모집을 연구하기 위해 잘 혈관화되고 외부화된 장 세그먼트를 사용하는 마우스 장 루프 모델을 설명합니다.

표준화된 장 루프 모델을 사용하여 마우스에서 장 투과성 및 호중구 환전 이동의 기능 평가

우리는 장 조작을 통해 생성된 수술 후 장폐색의 쥐 모델을 설명합니다. 위장 통과 기능, 병리학적 변화 및 면역 세포 활성화는 수술 후 24시간 후에 평가되었습니다.

수술 후 장폐색 쥐 모델

본 연구는 전체 마운트 장 조직과 다광자 현미경을 사용하여 분비된 점액을 정량화하여 카르바모일콜린 클로라이드와 같은 자극에 대한 점액 역학의 정밀한 체적 분석 및 시각화를 가능하게 하는 3D 이미징 방법을 제시합니다.

전체 마운트 조직 이미징을 사용한 장 점액의 3차원 정량화

배우세요 마우스 Peyer 패치 장 루프 분석을 이용하여 M 세포에 의한 박테리아 이화작용을 평가하는 방법을. 이 기술은 점막 면역 반응 메커니즘을 연구하는 데 활용됩니다.

마우스의 응용은 M 세포에 의해 박테리아 이해를 평가하는 Peyer의 패치 장 루프 분석 출혈도 잡았

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