Name: 깨어 쥐의 구강 내 Tastant 관리하는 동안 빠른 스캔 순환 전압 전류 법으로 빠른 도파민 역학 시험 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-08-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 44 s
Description: 학습하세요 빠른 스캔 순환 전압 전류법(FSCV)을 이용하여 깨어 있는 쥐의 구강 내 미각 자극에 대한 도파민 역학을 측정하는 방법을. 이 기법은 보상 처리 및 동기 부여의 신경화학적 기전을 연구하는 데 활용됩니다.

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이 간행물에 보고된 연구는 NSF 대학원 연구 펠로우십(RJW)과 미국 국립보건원(National Institutes of Health) 및 FDA 담배 제품 센터(CTP)의 약물 남용 연구소(P50DA036151 National Institute on Drug Abuse)의 지원을 받았습니다. 이 내용은 전적으로 저자의 책임이며 반드시 미국 국립보건원(National Institutes of Health)의 공식 견해를 나타내는 것은 아닙니다.

<ol><li>Roitman, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+operates+as+a+subsecond+modulator+of+food+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Dopamine operates as a subsecond modulator of food seeking.</a> J Neurosci. 24 (6), 1265-1271 (2004).</li>
<li>Aragona, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+specificity+in+the+real-time+development+of+phasic+dopamine+transmission+patterns+during+acquisition+of+a+cue-cocaine+association+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Regional specificity in the real-time development of phasic dopamine transmission patterns during acquisition of a cue-cocaine association in rats.</a> European Journal of Neuroscience. 30 (10), 1889-1899 (2009).</li>
<li>Wheeler, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cocaine+cues+drive+opposing+context-dependent+shifts+in+reward+processing+and+emotional+state%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Cocaine cues drive opposing context-dependent shifts in reward processing and emotional state.</a> Biol Psychiatry. 69 (11), 1067-1074 (2011).</li>
<li>Wickham, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+studying+phasic+dopamine+signaling+in+brain+reward+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Biosci+%28Elite+Ed%29%22%5BJournal%5D)">Advances in studying phasic dopamine signaling in brain reward mechanisms.</a> Front Biosci (Elite Ed). 5, 982-999 (2013).</li>
<li>Roitman, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+chemical+responses+in+the+nucleus+accumbens+differentiate+rewarding+and+aversive+stimuli%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Real-time chemical responses in the nucleus accumbens differentiate rewarding and aversive stimuli).</a> Nature Neuroscience. 11 (12), 1376-1377 (2008).</li>
<li>Cheer, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phasic+dopamine+release+evoked+by+abused+substances+requires+cannabinoid+receptor+activation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Phasic dopamine release evoked by abused substances requires cannabinoid receptor activation.</a> J Neurosci. 27 (4), 791-795 (2007).</li>
<li>Owesson-White, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+encoding+of+cocaine-seeking+behavior+is+coincident+with+phasic+dopamine+release+in+the+accumbens+core+and+shell%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Neural encoding of cocaine-seeking behavior is coincident with phasic dopamine release in the accumbens core and shell.</a> Eur J Neurosci. 30 (6), 1117-1127 (2009).</li>
<li>Phillips, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subsecond+dopamine+release+promotes+cocaine+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Subsecond dopamine release promotes cocaine seeking.</a> Nature. 422 (6932), 614-618 (2003).</li>
<li>Chen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Levels+of+mint+and+wintergreen+flavorants%3A+smokeless+tobacco+products+vs.+confectionery+products%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Levels of mint and wintergreen flavorants: smokeless tobacco products vs. confectionery products.</a> Food Chem Toxicol. 48 (2), 755-763 (2010).</li>
<li>Manning, K. C., Kelly, K. J., Comello, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flavoured+cigarettes%2C+sensation+seeking+and+adolescents%27+perceptions+of+cigarette+brands%5BTitle%5D)+AND+%22Tob+Control%22%5BJournal%5D)">Flavoured cigarettes, sensation seeking and adolescents' perceptions of cigarette brands.</a> Tob Control. 18 (6), 459-465 (2009).</li>
<li>Rainey, C. L., Conder, P. A., Goodpaster, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+characterization+of+dissolvable+tobacco+products+promoted+to+reduce+harm%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agric+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Chemical characterization of dissolvable tobacco products promoted to reduce harm.</a> J Agric Food Chem. 59 (6), 2745-2751 (2011).</li>
<li>Phillips, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+measurements+of+phasic+changes+in+extracellular+dopamine+concentration+in+freely+moving+rats+by+fast-scan+cyclic+voltammetry%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Real-time measurements of phasic changes in extracellular dopamine concentration in freely moving rats by fast-scan cyclic voltammetry.</a> Methods Mol Med. 79, 443-464 (2003).</li>
<li>Robinson, D. L., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRobinson%2C+DL+%22Rapid+Dopamine+Release+in+Freely+Moving+Rats.+Electrochemical+Methods+for+Neuroscience%22">Rapid Dopamine Release in Freely Moving Rats. Electrochemical Methods for Neuroscience</a>. , CRC Press. Boca Raton, FL. (2007).</li>
<li>Montague, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+gain+control+of+dopamine+delivery+in+freely+moving+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Dynamic gain control of dopamine delivery in freely moving animals.</a> J Neurosci. 24 (7), 1754-1759 (2004).</li>
<li>Heien, M. L., Johnson, M. A., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolving+neurotransmitters+detected+by+fast-scan+cyclic+voltammetry%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Resolving neurotransmitters detected by fast-scan cyclic voltammetry.</a> Anal Chem. 76 (19), 5697-5704 (2004).</li>
<li>Keithley, R. B., Heien, M. L., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multivariate+concentration+determination+using+principal+component+regression+with+residual+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Analyt+Chem%22%5BJournal%5D)">Multivariate concentration determination using principal component regression with residual analysis.</a> Trends Analyt Chem. 28 (9), 1127-1136 (2009).</li>
<li>Keithley, R. B., Carelli, R. M., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rank+estimation+and+the+multivariate+analysis+of+in+vivo+fast-scan+cyclic+voltammetric+data%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Rank estimation and the multivariate analysis of in vivo fast-scan cyclic voltammetric data.</a> Anal Chem. 82 (13), 5541-5551 (2010).</li>
<li>Rising, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Healthy+Young+Adults%3A+description+and+use+of+an+innovative+health+insurance+program%5BTitle%5D)+AND+%22J+Adolesc+Health%22%5BJournal%5D)">Healthy Young Adults: description and use of an innovative health insurance program.</a> J Adolesc Health. 41 (4), 350-356 (2007).</li>
<li>Day, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+learning+mediates+dynamic+shifts+in+dopamine+signaling+in+the+nucleus+accumbens%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Associative learning mediates dynamic shifts in dopamine signaling in the nucleus accumbens.</a> Nature Neuroscience. 10 (8), 1020-1028 (2007).</li>
<li>Park, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catecholamines+in+the+bed+nucleus+of+the+stria+terminalis+reciprocally+respond+to+reward+and+aversion%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Catecholamines in the bed nucleus of the stria terminalis reciprocally respond to reward and aversion.</a> Biol Psychiatry. 71 (4), 327-334 (2012).</li>
<li>Wheeler, R. A., Carelli, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neuroscience+of+pleasure.+Focus+on+%27Ventral+pallidum+firing+codes+hedonic+reward%3A+when+a+bad+taste+turns+good%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">The neuroscience of pleasure. Focus on 'Ventral pallidum firing codes hedonic reward: when a bad taste turns good.</a> J Neurophysiol. 96 (5), 2175-2176 (2006).</li>
<li>Bunin, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Release+and+uptake+rates+of+5-hydroxytryptamine+in+the+dorsal+raphe+and+substantia+nigra+reticulata+of+the+rat+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Release and uptake rates of 5-hydroxytryptamine in the dorsal raphe and substantia nigra reticulata of the rat brain.</a> J Neurochem. 70 (3), 1077-1087 (1998).</li>
<li>Zimmerman, J. B., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+electrochemical+measurements+of+oxygen+and+dopamine+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Simultaneous electrochemical measurements of oxygen and dopamine in vivo.</a> Anal Chem. 63 (1), 24-28 (1991).</li>
<li>Levy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+procedure+for+evaluating+the+reinforcing+properties+of+tastants+in+laboratory+rats%3A+operant+intraoral+self-administration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A novel procedure for evaluating the reinforcing properties of tastants in laboratory rats: operant intraoral self-administration.</a> J Vis Exp. (84), e50956(2014).</li>
</ol>

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FSCV과 함께 구강 tastant 배달 구강 향미를 &quot;실시간&quot;다 응답의 분석을 허용한다. 성공적인 DA 측정에 필요한 프로토콜의 세 가지 중요한 단계가 있습니다. 첫째, 구강 카테터의 적절한 주입은 향미의 전달을 위해 중요하다. 카테터는 제 1 대구치 뒤에 삽입하고 제자리에 쐐기되는 것을 보장하는 것은 개통을 잃지 카테터를 방지하고 동물에 의해 실수로 삭제되는 것을 방지 할 수 있습니다. 복구 후 처음 며칠 동안 카테터를 플러싱하는 제 2 또는 3 일 동안 동물에게 주어진 소프트 음식 수술 후는 카테터를 방해 할 수 있기 때문에, 또한 중요하다. 둘째, 전극의 품질이 자유롭게 움직이는 랫트에서 신호 대 잡음비를 증가시키기 위해 중요하다. 어떤 경우에는, 시각적으로 표시 전극은 높은 품질과 여전히 잡음 신호를 제공 할 수 있습니다 좋은 조건이 될 수 있습니다. 이 문제를 해결하는 한 가지 방법은 D에서 기준 기록을하는 것입니다orsal의 선조체 (DURA 아래 4mm). 전극 너무 많은 소음이 발생하는 경우,...

Erratum: Examination of Rapid Dopamine Dynamics with Fast Scan Cyclic Voltammetry During Intra-oral Tastant Administration in Awake Rats

Phasic DA release는 보상 지향 행동을 중재하는 데 중요한 역할을 합니다[1-3]. 그러나 1차 보상이 위상적 DA 방출을 어떻게 변화시키는지 분리하고 연구하는 것은 종종 위상적 DA 방출을 변경할 수 있는 동시 발생 행동 또는 인지 프로세스(예: 보상을 획득하기 위한 의사 결정 과정 또는 보상 지향 운동 행동)로 인해 복잡합니다. 현재 연구에서는 구강 내 캐뉼러를 통한 타스탄트 전달과 결합된 생체 내 고속 스캔 순환 전압전류법(FSCV)을 사용하여 타스탄트에 대한 위상 DA 반응을 분리합니다. 이 기술은 선택과 행동을 우회하고 쥐의 입천장에 타스탄트를 직접 주입하는 동안 세포 외 DA 방출을 검사할 수 있습니다.
FSCV는 시간 및 공간 분해능이 높은 전기화학 기술로, 초 미만의 스케일(10Hz 분해능)로 개별 국소 영역(약 100μm)에서 DA 방출을 측정할 수 있습니다. 구강 내 전달과 FSCV의 조합은 기존의 미세 투석 방법으로는 검사할 수 없는 타탄트에 대한 빠른 '실시간' DA 반응을 관찰할 수 있는 이점을 제공합니다. 또한, 보상 또는 보상 관련 신호에 대한 응답으로 위상 DA 방출은 20-100nM 사이의 농도에서 발생하며, 이는 FSCV에 대한 10-20nM 검출 임계값보다 높습니다[4]. FSCV의 높은 공간 해상도는 또한 측좌핵(NAc)과 같은 작은 뇌 영역의 하위 영역에서 기록할 수 있습니다. 따라서 tastants의 구강 내 주입과 결합된 FSCV는 깨어 있고 행동하는 동물에서 tastants 또는 기타 자극이 위상 DA 방출을 어떻게 변경하는지 연구하는 데 이상적인 모델입니다. 실제로, 이러한 기술은 보상과 혐오감이 어떻게 세포외 DA 방출을 변화시키는지 조사하는 실험을 가능하게 했습니다[5]. 
지난 10년 동안 FSCV 분석은 약물 중독 모델에서 위상 DA 메커니즘의 역할을 확인하기 위해 정맥 주사 약물 전달[6] 및 쥐 자가 투여 패러다임[7, 8]과 성공적으로 결합되었습니다. 또한, 코카인 가용성과 짝을 이루는 구강 내 전달이 어떻게 위상적 DA 방출 및 정서적 영향을 반영하는 행동 반응을 조절하는지 조사하기 위해 FSCV와 결합된 구강 내 전달이 사용되었습니다[3]. 이 결합된 구강 내 및 FSCV 방법론은 담배 및 용해성 담배 제품에 첨가되는 멘톨 및 경구 감미료와 같은 향미제에 대한 위상 DA 반응을 조사하는 데에도 강력하게 활용될 수 있습니다[9-11]. 담배 제품에 첨가된 많은 향미제가 식욕을 돋우지만[9-11], 이러한 향미제가 보람 있는 쾌락 원자가와 일치하는 방식으로 위상 DA 방출을 증가시키는지는 알려져 있지 않습니다. 실제로, 담배 및 용해성 담배 제품에 첨가된 향미제는 DA 보상 시스템에 직접적인 영향을 미칠 수 있으며 도파민 메커니즘을 통해 작용하여 담배 및 기타 담배 제품의 보상 원자가에 영향을 미칠 수 있습니다. 따라서 FSCV와 결합된 구강 내 전달은 향미제가 빠른 DA 방출을 조절하는 방법에 대한 새로운 이해를 제공할 수 있습니다. 구강 내 및 생체 내 FSCV 방법론을 결합한 사용과 이러한 연구에서 얻은 데이터는 향료와 니코틴이 어떻게 상호 작용하여 DA 신호를 변경하고 잠재적으로 니코틴 강화를 조절하는지 결정하기 위한 향후 연구를 촉진할 수도 있습니다. 또한, 이러한 연구에서 얻은 데이터는 담배 제품 향료에 대한 규제 결정을 알리는 데 사용할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>자극 전극</td><td>플라스틱원</td><td>MS303/2-A/SPC</td><td>주문 시, 페데스탈 하단 22mm 절단을 요청하십시오.</td></tr><tr><td>전극용 캐뉼라</td><td>바이오 분석 시스템</td><td>MD-2251</td><td></td></tr><tr><td>유리 모세관</td><td>A-M 시스템</td><td>624503</td><td></td></tr><tr><td>탄소 섬유</td><td>쏜넬</td><td>T650</td><td></td></tr><tr><td>전극 인출기</td><td>Narishige International</td><td>PE-22</td><td></td></tr><tr><td>&lt;a href="http://digitimer.com/products/neurolog-system/" target="_blank"&gt;Neurolog 자극 절연기&lt;/a&gt;</td><td><a href="http://www.digitimer.com" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> &lt;a href="http://digitimer.com" target="_blank"&gt;Digitimer Ltd.&lt;/a&gt;</a></td><td>&lt;a href="http://digitimer.com/products/research/stimulators/ds4-bi-phasic-stimulus-isolator/" target="_blank"&gt;DS4&lt;/a&gt;</td><td></td></tr><tr><td>열수축 튜브</td><td>3M</td><td>FP-301</td><td></td></tr><tr><td>전극용 절연 전선</td><td>Squires 전자 기기</td><td>맞춤형</td><td>L 3.000 x 1.000s x 1.000s UL1423 30/1 BLU</td></tr><tr><td>마이크로매니퓰레이터</td><td>일리노이 대학교 시카고 캠퍼스, 공학 기계 작업장</td><td></td><td></td></tr><tr><td>에폭시</td><td>ITW Devcon</td><td>14250</td><td>5분 경화 에폭시</td></tr><tr><td>퍼플루오로-3,6-디옥사-4-메틸-7-옥텐-술폰산과 테트라플루오로에틸렌의 공중합체</td><td>이온 전력</td><td>LQ-1105</td><td>&lt;em&gt;즉,&lt;/em&gt; 나피온(Nafion)</td></tr><tr><td>은 페인트</td><td>GC 전자 장치</td><td>22-023</td><td></td></tr><tr><td>전원 공급 장치</td><td>BK Precision</td><td>9110</td><td></td></tr><tr><td>구강 내 카테터용 튜빙</td><td>인트라메딕</td><td>427426</td><td>PE 100, 내경(I.D.) = 0.86 mm; 외경(O.D.) = 1.52 mm</td></tr><tr><td>구강 내 주입용 튜브</td><td>Fischer Scientific</td><td>02-587-1A</td><td>내경 1/32"; 외경 3/32"</td></tr><tr><td>플로우 셀용 시린지 펌프</td><td>Pump Systems Inc.</td><td>NE 1000</td><td></td></tr><tr><td>수술용 시멘트</td><td>Dentsply Caulk</td><td>675571 및 675572</td><td></td></tr><tr><td>공압 액추에이터</td><td>VICI</td><td>A60</td><td>6포지션 디지털 밸브 인터페이스</td></tr><tr><td>디지털 밸브 인터페이스</td><td>VICI</td><td>DVI</td><td>230 VAC</td></tr><tr><td>쿼드 헤드스테이지</td><td>노스캐롤라이나 대학교, 전자시설</td><td></td><td></td></tr><tr><td>UEI 전원 공급 장치</td><td>노스캐롤라이나 대학교, 전자 시설</td><td></td><td></td></tr><tr><td>UEI 브레이크아웃 박스</td><td>노스캐롤라이나 대학교, 전자시설</td><td></td><td></td></tr><tr><td>tastant 시린지 펌프용 전원 공급 장치</td><td>메드 어소시에이츠(Med Associates)</td><td>SG-504</td><td></td></tr><tr><td>Tastant 시린지 펌프</td><td>Med Associates</td><td>PHM-107</td><td></td></tr><tr><td>텅스텐 미세전극</td><td>마이크로프로브</td><td>WE30030.5A3</td><td></td></tr><tr><td>AgCl 코팅 은선 기준 전극</td><td>InVivo Metric</td><td>E255A</td><td></td></tr><tr><td>자당</td><td>시그마</td><td>80497</td><td></td></tr><tr><td>염화마그네슘</td><td>시그마</td><td>M8266</td><td></td></tr><tr><td>염화나트륨</td><td>시그마</td><td>S7653</td><td></td></tr><tr><td>과염소산</td><td>시그마</td><td>244252</td><td></td></tr><tr><td>염산 (4 M)</td><td>시그마</td><td>54435</td><td></td></tr><tr><td>수산화나트륨</td><td>시그마</td><td>306576</td><td></td></tr><tr><td>과산화수소</td><td>시그마</td><td>H1009</td><td></td></tr><tr><td>도파민 염산염</td><td>시그마</td><td>H8502</td><td></td></tr><tr><td>TarHeel HDCV 소프트웨어</td><td>노스캐롤라이나 대학교 채플힐</td><td></td><td>&lt;a href="http://www.chem.unc.edu/facilities/index.html?display=electronics" 전자 장비&amp;amp;소프트웨어&amp;amp;software_id=2" target="_blank"&gt;소프트웨어 요청 필수: 소프트웨어 요청 페이지 링크를 클릭하십시오&lt;/a&gt;</td></tr></tbody></table>

깨어 쥐의 구강 내 tastant 관리하는 동안 빠른 스캔 순환 전압 전류 법으로 빠른 도파민 역학 시험

Examination of Rapid Dopamine Dynamics with Fast Scan Cyclic Voltammetry During Intra-oral Tastant Administration in Awake Rats

포유류의 뇌에서 빠르게, 위상 도파민(DA) 방출은 보상 처리, 강화 학습 및 동기 부여 제어에 중요한 역할을 합니다. FSCV(Fast Scan Cyclic voltammetry)는 여러 유형의 제제에서 위상 DA 방출을 검사하는 데 사용되는 높은 공간 및 시간(초 미만) 해상도를 가진 전기화학 기술입니다. 단세포 및 뇌 절편에 대한 시험관 내 실험과 마취된 설치류에 대한 생체 내 실험은 정상적인 조건과 질병 모델에서 도파민 방출 및 흡수를 매개하는 메커니즘을 확인하는 데 사용되었습니다. 지난 20년 동안 깨어 있고 자유롭게 움직이는 설치류를 대상으로 한 생체 내 FSCV 실험은 보상 처리 및 보상 학습에서 도파민 메커니즘에 대한 통찰력을 제공했습니다. 깨어 있고 자유롭게 움직이는 준비의 주요 장점 중 하나는 특정 행동 이벤트나 보상 또는 신호 프레젠테이션에 시간이 고정된 빠른 DA 변동을 조사할 수 있는 능력입니다. 그러나 행동과 전압전류법 실험을 결합한 것의 한 가지 한계는 1차 보상 또는 혐오적 자극에 특이적인 DA 효과를 보상 지향적 또는 기타 운동 행동을 매개하는 동시에 발생하는 DA 변동과 분리하기 어렵다는 것입니다. 여기에서는 깨어 있는 쥐에서 생체 내 FSCV와 구강 내 주입을 사용하여 구강 타구에 대한 DA 반응을 직접 조사하는 결합 방법을 설명합니다. 이 실험에서는 구강 타스탄트를 쥐의 입맛에 직접 주입하여 보상 지향적 행동과 자발적인 음주 행동을 우회하여 타스탄트 자극에 대한 DA 반응을 직접 조사할 수 있습니다.

구강 내 카테터 삽입술과 결합 FSCV 방법 크로스, appetitive tastant을 검사하는 데 사용되었다 NAC 코어에 phasic DA 자료를 변조한다. tastant 주입, 전기 자극하기 전에.; VTA의 (150 μA, 60 Hz에서, 24 펄스 빨간색 막대로 표시)은 그림 1 NAC (그림 1)에서 phasic 다 릴리스의 강력한 증가를 생산 잠재력을 가진 컬러 플롯을 보여줍니다 Z 축의 Y 축, X 축에 시간 및 전류 (거짓 색으로 표시). 색상 플롯 아래 시간 추적 대 DA 농도이다. 시간에 대한 농도는 도파민의 산화 전위에서 전류 대 시간 추적을 사용하여 측정 하였다 전극의 교정 후 다음과 같은 농도로 전환시켰다 (점선 흰색 선으로 표시). 시간 추적이 DA 대 농도는 PCA에 설정된 훈련의 일부로서 사용되었다. 자당의 훈련 세트를 획득 한 후, 25 주입(10 %, 주입 당 200 μL)을 매 ...

세포외 도파민(DA)의 급격한 변동은 포유류의 보상 처리와 동기 부여 행동을 모두 중재합니다. 이 원고는 깨어 있고 자유롭게 움직이는 쥐에서 타스탄트가 빠른 도파민 방출을 어떻게 변경하는지 결정하기 위해 FSCV(Fast Scan Cyclic Volammetry)와 구강 내 타스탄트 투여의 조합을 설명합니다.

깨어 쥐의 구강 내 Tastant 관리하는 동안 빠른 스캔 순환 전압 전류 법으로 빠른 도파민 역학 시험

Rapid, phasic dopamine (DA) release in the mammalian brain plays a critical role in reward processing, reinforcement learning, and motivational control. ...

이 실험 절차의 전반적인 목적은 구강 미각 자극에 대한 초 단위 미만의 도파민 반응을 측정하는 것입니다. 이를 위해 먼저 수술 절차 및 이후 fast scan cyclic V 원격 측정법을 통한 기록에 필요한 구강 카테터, 기준 전극 및 탄소 섬유 전극을 제작합니다. 두 번째 단계는 구강 카테터, 두개내 전극 및 탄소 섬유 전극용 가이드 캐뉼라를 외과적으로 이식하는 것입니다.일주일 후, 탄소 섬유 미세 전극을 측좌핵으로 내려 구강 내 미각 전달에 반응하여 나타나는 세포 외 도파민 방출의 변화를 기록할 수 있습니다. 기록 후 마지막 단계는 전극을 보정하고 주성분 분석을 사용하여 도파민에 관한 정보를 포함하는 데이터를 분리하는 것입니다. 최종적으로, 구강 내 미각 전달과 고속 스캔 순환 전압전류법 텔레메트리를 결합하여 사용함으로써 미각에 대한 1초 미만의 도파민 반응 변화를 보여줍니다.이 결합된 기술은 기존 방법들에 비해 두 가지 주요한 장점이 있습니다. 첫째, 고속 IC 광도 측정법은 높은 시간 분해능을 가지고 있으며, 둘째로 tatin의 구강 내 투여는 쥐가 tatin을 얻기 위해 움직여야 하는 동선을 최소화하여 tatin에 대한 도파민 반응을 더 잘 분리해 낼 수 있게 해줍니다. 일반적으로 이 방법에 익숙하지 않은 연구자들은 구강 카테터 제작에 어려움을 겪을 수 있습니다.하지만, 정교하게 제작되고 고정된 구강 카테터는 뺨과 상악 대구치 사이에 카테터가 밀착되도록 하여 실험의 성공 가능성을 높여줍니다. 기록 전극을 준비하려면, 먼저 내경 0.4 mm의 붕규산 유리 모세관에 직경 7 µm의 T 6 50 탄소 섬유를 흡입합니다. 그다음, 모세관을 수직 전극 풀러에 배치하고 처음에는 히터를 55.0으로 설정하고 자석은 끈 상태에서 풀링을 수행한 후, 필요에 따라 조정합니다.현미경 하에서 피펫을 당긴 후, 노출된 탄소 섬유가 유리 밖으로 75에서 100 microns 정도 돌출되도록 절단합니다. 유리 내부의 섬유는 단단히 밀봉되어 있어야 하며, 그렇지 않을 경우 해당 준비물을 폐기하십시오. 다음으로, 3인치 길이의 30 gauge 와이어 절반의 절연체를 벗겨내고, 열수축 튜브를 적용하여 전극을 마이크로 매니퓰레이터에 고정합니다.그 후 은색 페인트가 아직 젖어 있을 때 와이어에 얇게 도포합니다. 와이어를 전극의 열린 끝부분으로 삽입하여 내부의 탄소 섬유에 부착합니다. 현미경을 통해 이 접촉 상태를 확인합니다.마이크로 조

examination-rapid-dopamine-dynamics-with-fast-scan-cyclic-voltammetry

Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

striatal 뇌 조각의 전기적 evoked presynaptic 도파민의 역학을 측정하는 빠른 스캔 순환 voltammetry를 사용하여.

빠른 스캔 순환 Voltammetry와 Striatal 뇌 조각의 Presynaptic 도파민 역학

이 비디오는 마취된 쥐에 전극과 캐뉼라를 이식하여 전위차점 측좌핵의 도파민 방출을 측정하고 복부 피개 영역의 도파민 활성을 조절하기 위한 약물 주입을 보여줍니다.

VTA 도파민 뉴런 수용체 조작을 사용한 쥐 모델에서 도파민 방출 모니터링

구강 자기 관리 : 현재의 연구는 실험실 쥐의 입맛 솔루션의 보강 효과를 평가하기위한 새로운 절차를 평가합니다. 이를 위해 조작 적 서로 다른 농도의 달콤한 솔루션의 구강 내 주입을위한 (즉, 레버를 눌러) 응답은 강화를 지속적으로 진보적 인 비율의 일정에 따라 측정 하였다.

실험실 쥐에 Tastants의 강화 속성을 평가하기위한 새로운 방법 : 조작 적 구강 자기 관리

이 연구의 목적은 쥐의 지방과 설탕의 소설 섭취 후 도파민 경로 및 터미널 사이트에서 동시에 변화를 측정하기 위해 휴대 C-FOS 활성화를 사용하여 신뢰할 수있는 면역 조직 기술을 서술하여 보상 관련 분산 뇌 네트워크를 식별하는 것입니다.

흰쥐의 나이브 설탕과 지방 섭취에 따라 변연계와 Mesocortical 도파민 보상 사이트에서 C-에 Fos 활성화의 동시 검출

빠른 스캔 순환 voltammetry 약물, 질병 및 기타 실험 조작의 맥락 에서 생체 내 도파민 신경 전달을 모니터링 할 수 있습니다. 이 연구는 도파민 방출 및 재 흡수 역학의 평가를 정량화하기위한 양적 신경 생물학 모델에 따라 전기 자극 된 도파민 반응을 모델링하는 소프트웨어 인 QNsim1.0의 구현을 설명합니다.

QNsim1.0을 이용한 전기 자극 도파민 신경 전달 데이터의 고속 스캔 순환 전압 측정 데이터 모델링

Synaptosomal 도파민 통풍 관 및 고성능 액체 크로마토그래피 분석 대표 실험 도구 마우스에서 도파민 항상성 도파민 운송업 자의 기능과 striatal 조직에서 도파민의 수준을 평가 하 여 조사를 각각. 여기 선물이 도파민 조직 콘텐츠를 측정 하 고 도파민 운송업 자의 기능을 평가 하는 프로토콜.

고성능 액체 크로마토그래피 분석 및 Synaptosomal 도파민 통풍 관의 사용에 의해 쥐에서 Dopaminergic 항상성의 평가

이 문서 내용을 사용 하 여 탄소 섬유 전극 효소 바이오 센서 기술에 자연적인 보상 행동 동안 도파민과 높은 시간 해상도와 조미료의 릴리스를 측정 하는 고정 잠재력 amperometric 녹음의 사용은 여자는...

자연스럽 게 여성 시리아 햄스터에 동작을 보람 있는 하는 동안 Extracellular 신경 전달 물질의 생체 내에서 변화를 측정

이 프로토콜의 목표는 직접 서브 두 번째 도파민 방출에 자신의 기여를 연구하는 복부 tegmental 영역 수용체를 조작하는 것입니다.

빠른 스캔 순환 볼탐법 (CIS-FSCV)과 결합 된 주입 및 자극을 결합하여 Phasic 도파민의 복부 테자멘트 영역 수용체 조절을 평가합니다.

우리는 흡연에 의한 도파민 변동을 캡처 새로운 PET 이미징 방법을 제시한다. 주제 PET 스캐너에 연기. 동적 PET 영상은 시간에 따라 변화 도파민 용어를 포함 LP-ntPET에 의해 시간에 복셀 별 복셀 모델링됩니다. 결과는 흡연하는 동안 선조체에서 도파민 변동 '영화'입니다.

담배 흡연의 도파민 영화 : LP-ntPET와 짧은 수명 도파민 변동의 동적 이미지 만들기

마우스의 뇌 신호의 생체 전기 생리학 기록에 대한 마이크로 드라이브의 설계와 어셈블리가 설명되어 있습니다. 튼튼한 driveable 캐리어 미세 번들을 부착하여,이 기술은 장기적이고 안정적​​인 신경 녹음을 허용합니다. 경량 디자인은 동물 다음과 같은 드라이브 주입에 의한 제한 행위 성능을 할 수 있습니다.

깨어있는 행동을 한 쥐의 만성 신경 녹음을위한 마이크로 드라이브 배열의 건설

학습하세요 빠른 스캔 순환 전압 전류법(FSCV)을 이용하여 깨어 있는 쥐의 구강 내 미각 자극에 대한 도파민 역학을 측정하는 방법을. 이 기법은 보상 처리 및 동기 부여의 신경화학적 기전을 연구하는 데 활용됩니다.

깨어 쥐의 구강 내 Tastant 관리하는 동안 빠른 스캔 순환 전압 전류 법으로 빠른 도파민 역학 시험

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