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3D 회전 타원체 생산을위한 효율적이고 유연한 셀 집계 방법
3D 회전 타원체 생산을위한 효율적이고 유연한 셀 집계 방법
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JoVE Journal Biology
An Efficient and Flexible Cell Aggregation Method for 3D Spheroid Production

3D 회전 타원체 생산을위한 효율적이고 유연한 셀 집계 방법

Full Text
25,712 Views
07:46 min
March 27, 2017

DOI: 10.3791/55544-v

Sarah M. Maritan*1,2, Eric Y. Lian*1,2, Lois M. Mulligan1,2

1Division of Cancer Biology and Genetics,Queen's University Cancer Research Institute, 2Department of Pathology and Molecular Medicine,Queen's University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a rapid and flexible protocol for generating 3D cell spheroids through cell aggregation. The method is adaptable to various cell types and applicable in assays related to cell migration, invasion, and cell-matrix interactions.

Key Study Components

Area of Science

  • Cell Biology
  • 3D Cell Culture
  • Cell Aggregation Techniques

Background

  • Understanding cell-cell and cell/matrix interactions is crucial for tissue growth.
  • 3D cell spheroids provide a more physiologically relevant model compared to 2D cultures.
  • The use of a non-proteinaceous matrix facilitates easy spheroid formation.
  • This method allows for rapid isolation of spheroids for various assays.

Purpose of Study

  • To develop a protocol for efficient generation of robust cell spheroids.
  • To investigate the effects of the microenvironment on cell behavior.
  • To enhance the understanding of tissue growth dynamics.

Methods Used

  • Preparation of a methylcellulose solution for cell aggregation.
  • Heating and agitation of ultrapure water and methylcellulose powder.
  • Storage of the solution to achieve clarity before use.
  • Application of the method in various cell-based assays.

Main Results

  • Successful formation of 3D cell spheroids from different cell types.
  • Demonstrated ease of spheroid isolation using the non-proteinaceous matrix.
  • Insights gained into cell-matrix interactions in a 3D environment.
  • Potential applications in migration, invasion, and anoikis assays.

Conclusions

  • The protocol provides a versatile approach for 3D cell culture.
  • It can be adapted for various research applications in cell biology.
  • This method enhances the understanding of complex cellular interactions.

Frequently Asked Questions

What types of cells can be used with this protocol?
The protocol is adaptable to multiple cell types, making it versatile for various research applications.
How long does it take to prepare the methylcellulose solution?
Preparation involves heating and agitating the solution, followed by overnight storage, making it a quick process overall.
What are the advantages of using a non-proteinaceous matrix?
It allows for easy and rapid isolation of spheroids without the complications associated with protein-based matrices.
Can this method be used for imaging cell interactions?
Yes, the generated spheroids can be used for imaging and quantifying cell-matrix interactions.
What applications can this protocol support?
Applications include cell migration, invasion, and anoikis assays, among others.

여기에서는 세포 응집을 통해 3D 세포 스페로이드를 형성하기 위한 빠르고 유연한 프로토콜에 대해 설명합니다. 이는 여러 세포 유형에 쉽게 적용할 수 있으며 세포 이동, 침습 또는 아노이키스 분석을 포함한 다양한 응용 분야와 세포-매트릭스 상호 작용의 이미징 및 정량화에 적합합니다.

내레이터: 이 방법의 전반적인 목표는 다양한 세포 기반 분석에 사용하기 위해 세포 응집을 통해 대량의 강력한 세포 스페로이드를 효율적으로 생성하는 것입니다. 이 기술의 주요 장점은 세포 응집 및 스페로이드 형성을 위해 비단백질성 수용성 매트릭스를 사용하여 스페로이드를 쉽고 빠르게 분리할 수 있다는 것입니다. 이 방법은 3차원 미세환경에서 조직 성장에 대한 세포-세포 및 세포/기질 상호 작용의 영향에 대한 세포 생물학의 새로운 통찰력을 얻는 데 도움이 될 수 있습니다.

내레이터: 응집체를 준비하기 전에 50ml의 초순수를 섭씨 80도까지 가열하고 메틸셀룰로오스 분말 10g을 첨가하십시오. 입자가 고르게 분산될 때까지 현탁액을 교반합니다. 그런 다음 최종 부피 100ml에 차가운 초순수를 첨가하고 용액이 투명해지고 눈에 보이는 고형물 없이 밀짚 색이 될 때까지 입자를 섭씨 4도에서 밤새 보관합니다.

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세포 생물학 문제 (121) 입체 구형 종양 미세 환경 세포 배양 세포 응집 메틸 셀룰로오스 침공 세포 외 기질 마이그레이션 anoikis 면역 형광

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