Name: 쥐 하악 어금니 추출 소켓 치유 모델 구축 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-01-13T13:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 19 s
Description: 배우세요 쥐 하악 어금니 추출 기법을 통해 턱뼈 재생 및 치유 메커니즘을 연구하는 신뢰할 수 있는 동물 모델을 구축하는 방법을. 이 프로토콜은 골 형성 조절인자 Sp7 발현 분석을 포함하여 뼈 재생 과정을 4주간 평가합니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

이 작업은 81825005중국 국립 자연 과학 재단 (L.Y.), 82201045 (F.Y.) 및 82100982 (F.L.)와 쓰촨성 과학 기술 프로그램 2021JDRC0144 (F.L.), 2022JDRC0130 (F.Y.)의 지원을 받는다.

이 연구의 모든 동물 절차는 쓰촨 대학교 서중국 구강학 윤리 위원회(WCHSIRB-D-2017-041)에서 검토하고 승인했습니다. 상업적 공급원으로부터 입수한 성인 C57BL/6 마우스( 재료 표 참조)를 본 연구에 사용하였다.
1. 수술 전 준비
<ol><li>기구 준비<ol><li>엘리베이터로 사용할 다양한 일회용 주사기 바늘(26G, 25G, 23G, 재료 표 참조)을 준비합니다. 그림 20과 같이 바늘 머리를 약 40°-1° 굴절시킵니다.</li>
		<li>집게로 톱니 안과 핀셋을 준비하십시오. 생쥐의 어금니 크기에 맞고 어금니를 단단히 잡을 수 있는지 확인하십시오. 이상적인 핀셋 크기는 그림 1A, B3에 나와 있습니다.</li>
		<li>입 오프너로 사용할 고무 밴드(의료용 라텍스 장갑에서 찢을 수 있음), 수술 플랫폼으로 폼 보드 또는 코르크판, 수술 부위를 밝히는 헤드램프, 수술 후 부흥을 위한 가열 패드를 구하십시오. 마른 면봉을 작은 조각으로 찢어 시술 중 출혈이 발생하면 수술 부위에 바릅니다.</li>
	</ol></li>
	<li>마취 준비<ol><li>마우스는 '발가락 꼬집기' 방법을 통해 확인된 전신 마취를 달성하는 임의의 적절한 마취 프로토콜에 의해 마취될 수 있다. 마취 후 마우스의 눈에 수의학 연고를 바르십시오. 참고: 바람직한 전신 마취 프로토콜은 다음과 같을 수 있습니다: 자일라진(10mg/kg) 및 케타민(100mg/kg)을 복강내(IP)로 유도 및 유지; 이 연구를 위해 이소플루란과 1% 펜토바르비탈 나트륨(50mg/kg, IP)을 마취 유도 및 유지에 사용했으며 필요에 따라 추가 용량을 투여했습니다.</li>
	</ol></li>
	<li>소독 및 살균 준비<ol><li>작업 플랫폼과 야외 오버헤드를 75% 에탄올 분무기로 소독합니다. 각 마우스 시술 전에 새로운 일회용 바늘 세트를 사용하는 것이 좋습니다. 알림: 톱니 핀셋은 재사용이 가능하며 증기 멸균과 같은 선호하는 방법을 사용하여 멸균할 수 있습니다.</li>
	</ol></li>
</ol>2. 수술 과정
<ol><li>마우스와 하악골의 고정<ol><li>접착 테이프를 사용하여 마우스를 앙와위 자세로 수술 플랫폼에 묶습니다. 두 개의 26G 바늘을 안와 귀면에 맞추고 다른 두 개의 26G 바늘을 하악 아래에 편안하게 고정합니다.</li>
		<li>바늘 주위에 고무 밴드를 감고 앞니를 교차시켜 입을 벌리십시오. 혀를 살짝 당겨 수술 쪽 반대쪽 고무 밴드 아래에 고정하여 시야를 가리지 않도록 합니다(그림 1C).</li>
	</ol></li>
	<li>원위 저항 제거<ol><li>핀셋으로 어금니를 근심 방향으로 잡고 23G 바늘을 원위치의 협측 치조골에 밀어 넣고 간격을 만듭니다. 알림: 이 단계는 너무 깊숙이 박힌 바늘이 뿌리를 부러뜨릴 수 있으므로 매우 주의해서 수행해야 합니다.</li>
		<li>다음으로, 25G 바늘로 변경하여 간격을 계속 확장하고 치근단 부위를 향해 섬세하게 진행하면서 바늘을 천천히 앞뒤로 그리고 설측으로(마우스 해부학적 위치로) 회전시켜 치조와에서 치근을 밀어냅니다.</li>
	</ol></li>
	<li>근심 저항 제거<ol><li>충분한 공간이 있으면 23G 바늘을 사용하여 루트 포크에 삽입하고 어금니를 교합으로 들어 올립니다. 어금니를 단단히 잡은 후 23G 바늘을 더 가져다가 설근 근심 치주막에 밀어 넣어 간격을 만듭니다.</li>
		<li>그런 다음 25G 바늘로 대체하고 천천히 앞으로 회전시킵니다. 일부 근본적인 장애가 어금니의 탈구를 방해하는 경우 26G 바늘을 사용하여 치근점을 관통하고 수술을 반복합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>최종 추출<ol><li>치아를 발치하고 발치하는 동안 크라운이 교합면 위로 높이 올라가고 두 개의 온전한 뿌리가 명확하게 보이는지 확인합니다. 참고 : 치아의 탈구 (탈구)는 절차에서 가장 고통스럽고 고통스러운 순간으로 간주됩니다. 치아를 탈구하기 전에 발가락 핀치 테스트를 사용하여 마취 깊이를 재평가해야 하며, 따라서 필요한 경우 적당한 용량의 마취제를 투여해야 합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>수술 후 관리<ol><li>치아를 뽑은 후 마른 면봉을 발라 출혈을 멈추고 혀의 위치를 바꾸고 카프로펜(5mg/kg)을 피하 투여하고 마취에서 회복될 때까지 마우스를 항온 가열 패드에 올려 놓습니다.</li>
	</ol></li>
</ol>3. 마우스 하악 및 추출 소켓의 이미징
<ol><li>시료 준비<ol><li>자궁 경부 탈구로 마우스를 안락사시킵니다. 안과 가위를 사용하여 하악과 광대뼈에 부착된 골격 근육을 자릅니다. 하악의 아래쪽 가장자리를 따라 목구멍에서 오름차순 가지로 자른 다음 과두의 뒤쪽으로 자른 다음 하악을 아래로 당기고 하악 정중선을 따라 자릅니다. 이렇게 하면 두 개의 분리된 하악골이 수확됩니다.</li>
		<li>표준 절차17에 따라 고정, 탈염 및 탈수를 수행하십시오. 17을 내장할 때 교합면이 카세트의 가장자리와 평행한지 확인하십시오( 재료 표 참조). 하악골을 카세트 하단에 고정하고 아래쪽 가장자리를 코킹합니다(그림 2). 참고: 이 프로토콜은 하악 영역의 시상면을 제공합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>마이크로톰에 시료 고정<ol><li>마이크로톰의 시편 클램프를 조절하여 과두와 크라운 쪽을 5°-20° 더 돌출시켜 뿌리 펄프와 함께 제공되는 크라운 펄프의 통합 이미지를 얻습니다(그림 2).</li>
	</ol></li>
	<li>섹션 준비 참고: 과두는 항상 절단되는 첫 번째 해부학적 구조입니다. 그것이 사라지면 어금니 영역을 여러 조각으로 자를 수 있습니다.<ol><li>마이크로톰 범위를 5μm로 이동하고, 8개의 슬라이스마다 수집하고, 마지막 슬라이스에서 상아질을 찾습니다. 치근단 상아질 없이 크라운 상아질이 처음 나타나면 시편 클램프를 조정하여 치근 영역이 돌출되도록 하거나 그 반대의 경우도 마찬가지입니다.</li>
	</ol></li>
	<li>섹션 수집 알림: 절단 각도는 상아질이 크라운과 치근단 영역 모두에서 균등하게 도달할 때까지 적절합니다.<ol><li>이 방향을 따라 자르고 치과 펄프가 크라운과 뿌리 모두에 나타날 때까지 현미경으로 슬라이스를 관찰하십시오. 어금니의 모호한 윤곽이 파라핀 샘플17의 표면에 나타날 때 절편을 수집한다.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Mamoun, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dry+socket+etiology%2C+diagnosis%2C+and+clinical+treatment+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Korean+Association+of+Oral+and+Maxillofacial+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Dry socket etiology, diagnosis, and clinical treatment techniques.</a> Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons. 44 (2), 52-58 (2018).</li>
<li>Laraki, M., Chbicheb, S., El Wady, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolitis%3A+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Odonto-Stomatologie+Tropicale+%3D+Tropical+Dental+Journal%22%5BJournal%5D)">Alveolitis: review of the literature.</a> Odonto-Stomatologie Tropicale = Tropical Dental Journal. 35 (139), 19-25 (2012).</li>
<li>Soundia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteonecrosis+of+the+jaws+%28ONJ%29+in+mice+after+extraction+of+teeth+with+periradicular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Osteonecrosis of the jaws (ONJ) in mice after extraction of teeth with periradicular disease.</a> Bone. 90, 133-141 (2016).</li>
<li>Araújo, M. G., Silva, C. O., Misawa, M., Sukekava, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+socket+healing%3A+what+can+we+learn%5BTitle%5D)+AND+%22Periodontology+2000%22%5BJournal%5D)">Alveolar socket healing: what can we learn.</a> Periodontology 2000. 68 (1), 122-134 (2015).</li>
<li>Hojo, H., Ohba, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sp7+Action+in+the+skeleton%3A+its+mode+of+action%2C+functions%2C+and+relevance+to+skeletal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Sp7 Action in the skeleton: its mode of action, functions, and relevance to skeletal diseases.</a> International Journal of Molecular Sciences. 23 (10), 5647(2022).</li>
<li>Zhou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+functions+of+Osterix+are+required+for+bone+growth+and+homeostasis+in+postnatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Multiple functions of Osterix are required for bone growth and homeostasis in postnatal mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (29), 12919-12924 (2010).</li>
<li>Ito, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathological+differences+in+the+bone+healing+processes+between+tooth+extraction+socket+and+femoral+fracture%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Reports%22%5BJournal%5D)">Pathological differences in the bone healing processes between tooth extraction socket and femoral fracture.</a> Bone Reports. 16, 101522(2022).</li>
<li>Vasak, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+bone+apposition+to+hydrophilic+and+hydrophobic+titanium+implant+surfaces%3A+a+histologic+and+histomorphometric+study+in+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Oral+Implants+Research%22%5BJournal%5D)">Early bone apposition to hydrophilic and hydrophobic titanium implant surfaces: a histologic and histomorphometric study in minipigs.</a> Clinical Oral Implants Research. 25 (12), 1378-1385 (2014).</li>
<li>Araújo, M. G., Lindhe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dimensional+ridge+alterations+following+tooth+extraction.+An+experimental+study+in+the+dog%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Periodontology%22%5BJournal%5D)">Dimensional ridge alterations following tooth extraction. An experimental study in the dog.</a> Journal of Clinical Periodontology. 32 (2), 212-218 (2005).</li>
<li>Kim, I. -S., Ki, H. -C., Lee, W., Kim, H., Park, J. -B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+systemically+administered+bisphosphonates+on+bony+healing+after+tooth+extraction+and+osseointegration+of+dental+implants+in+the+rabbit+maxilla%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+Journal+of+Oral+%26+Maxillofacial+Implants%22%5BJournal%5D)">The effect of systemically administered bisphosphonates on bony healing after tooth extraction and osseointegration of dental implants in the rabbit maxilla.</a> The International Journal of Oral & Maxillofacial Implants. 28 (5), 1194-1200 (2013).</li>
<li>Kanyama, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connective+tissue+growth+factor+expressed+in+rat+alveolar+bone+regeneration+sites+after+tooth+extraction%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Oral+Biology%22%5BJournal%5D)">Connective tissue growth factor expressed in rat alveolar bone regeneration sites after tooth extraction.</a> Archives of Oral Biology. 48 (10), 723-730 (2003).</li>
<li>Zhou, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+IFT140+in+early+bone+healing+of+tooth+extraction+sockets%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Diseases%22%5BJournal%5D)">The role of IFT140 in early bone healing of tooth extraction sockets.</a> Oral Diseases. 28 (4), 1188-1197 (2022).</li>
<li>Apaza Alccayhuaman, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FasL+is+required+for+osseous+healing+in+extraction+sockets+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">FasL is required for osseous healing in extraction sockets in mice.</a> Frontiers in Immunology. 12, 678873(2021).</li>
<li>Avivi-Arber, L., Avivi, D., Perez, M., Arber, N., Shapira, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+bone+healing+at+tooth+extraction+sites+in+CD24-deficient+mice%3A+A+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Impaired bone healing at tooth extraction sites in CD24-deficient mice: A pilot study.</a> PLoS One. 13 (2), 0191665(2018).</li>
<li>Vieira, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramembranous+bone+healing+process+subsequent+to+tooth+extraction+in+mice%3A+micro-computed+tomography%2C+histomorphometric+and+molecular+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Intramembranous bone healing process subsequent to tooth extraction in mice: micro-computed tomography, histomorphometric and molecular characterization.</a> PLoS One. 10 (5), 0128021(2015).</li>
<li>Min, K. -K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+resveratrol+on+bone-healing+capacity+in+the+mouse+tooth+extraction+socket%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Periodontal+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of resveratrol on bone-healing capacity in the mouse tooth extraction socket.</a> Journal of Periodontal Research. 55 (2), 247-257 (2020).</li>
<li>Yu, F., Li, F., Zheng, L., Ye, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+controls+of+Sonic+hedgehog+guarantee+fidelity+of+epithelial+adult+stem+cells+trajectory+in+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Epigenetic controls of Sonic hedgehog guarantee fidelity of epithelial adult stem cells trajectory in regeneration.</a> Science Advances. 8 (29), (2022).</li>
<li>Kuroshima, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+noncultured+stromal+vascular+fraction+cells+of+adipose+tissue+ameliorates+osteonecrosis+of+the+jaw-like+lesions+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Transplantation of noncultured stromal vascular fraction cells of adipose tissue ameliorates osteonecrosis of the jaw-like lesions in mice.</a> Journal of bone and Mineral Research. 33 (1), 154-166 (2018).</li>
<li>Ahel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forces+that+fracture+teeth+during+extraction+with+mandibular+premolar+and+maxillary+incisor+forceps%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+Journal+of+Oral+%26+Maxillofacial+Surgery%22%5BJournal%5D)">Forces that fracture teeth during extraction with mandibular premolar and maxillary incisor forceps.</a> The British Journal of Oral & Maxillofacial Surgery. 53 (10), 982-987 (2015).</li>
</ol>

모든 원본 데이터와 이미지는 이 문서에 포함되어 있습니다. 저자는 이해 상충을 선언하지 않습니다.

쥐 소켓 치유 모델은 뼈 치유 및 재생의 기본 메커니즘을 풀고 궁극적으로 임상적 문제를 해결하는 중요한 방법입니다. 기존 연구에서는 앞니 추출 모델과 상악 어금니 추출 모델의 가능성을 입증한 반면, 연구에서는 하악 제1대구치 모델13,17,18을 사용하지 않았습니다. 그러나 앞니는 설치류 생활에 매우 중요하며 손상은 치명적일 수 있습니다. 또한, 상악골의 뼈가 하악골보다 해면력이 더 높기 때문에 치유 과정에서 기본 메커니즘에 약간의 차이가 있을 수 있습니다. 따라서 실현 가능한 하악 제1대구치 추출 모델을 수립할 필요가 있다.
발치에서 가장 중요한 고려 사항은 치근 파손을 피하는 것이다19. 쥐 어금니는 작고 취약하며 하악의 잔류 뿌리를 추출 할 수 없습니다. 그러나 이 ...

발치 후 소켓 치유는 일반적인 임상 시나리오로, 바람직하지 않은 치유 하에서 소켓 출혈, 드라이 소켓, 심지어 턱 골수염과 같은 바람직하지 않은 합병증을 초래할 수 있다 1,2,3. 이러한 동반 질환은 환자의 삶의 질을 저하시킬 수 있으며, 더 나쁜 것은 대규모 뼈 손실로 인한 보철 재활에 심각한 어려움을 줄 수 있습니다4. 소켓 치유 단계가 해명되었지만 다양한 예후 문제에 직면했을 때 발치 후 임상 치료를 지시하기에는 부적절합니다4.
소켓 치유 과정의 기본 메커니즘을 더 잘 이해하고 위의 상황을 피하기 위해 동물 모델을 기반으로 한 여러 연구가 수행되었습니다. Sp7은 골격 발달, 뼈 지혈 및 뼈 재생에 중요한 역할을 하는 조골세포 분화의 마스터 조절제입니다 5,6. 합리적인 소켓 치유 모델은 뼈 재생에서 외상 후 Sp7의 중복성을 표시할 수 있습니다. 또한, 장골 골절 치유와는 달리, 단 하나의 골형성 과정, 막내 골화만이 추출 소켓(7)의 치유 과정을 수반한다. 따라서 임플란트 골유착은 동일한 골형성 규칙을 따르기 때문에 동물 치아 발치 모델은 임플란트 기반 치료법을 연구하는 데 최적입니다8.
수십 년 동안 치아 추출 모델은 쥐, 토끼 및 개에서 수행되었는데, 그 이유는 이들 종은 9,10,11에서 작동하기에 편리한 큰 이빨을 가지고 있기 때문입니다. 그러나 유전자 변형에 대한 요구가 증가하고 인간에 대한 보다 적응력이 뛰어난 유전적 배경을 감안할 때 마우스는 치아 추출 모델을 확립하는 데 점점 더 많이 사용되고 있습니다. 그 후, 연구자들은 표현형만을 관찰하는 대신 게놈 변형 마우스를 사용하여 소켓 치유 과정에서 특정 세포 집단의 역할을 밝힐 수 있었다12. 쥐 치아 발치 소켓 모델 중 선행 연구는 쥐 상악 치아 및 앞니 발치 소켓의 확립 및 치유 과정을 입증했습니다13,14,15,16. 그러나 예후의 치유 패턴과 탐정 및 관찰 시점은 프로토콜에 따라 다를 수 있습니다. 이것은 학자들이 쥐 소켓 치유 모델을 확립하는 보편적인 기준에 호소합니다.
이 연구는 위의 문제에 대해 실행 가능한 쥐 소켓 치유 모델을 구성하는 것을 목표로 했습니다. 생쥐의 하악 어금니는 상악 어금니 및 앞니에 비해 독특한 형태학적 특성을 가지고 있어 고유한 장점과 단점을 가지고 있습니다. 쥐 하악에 초점을 맞춘 모델이 현재 진공 기반이기 때문에 이 프로토콜은 생쥐에서 하악 제1대구치를 추출하는 성공적인 방법을 제공하려고 했습니다. 우리는 이 프로토콜이 소켓 치유의 기본 메커니즘을 밝히고 임상 치료를 나타내기 위한 새로운 아이디어로 기초 연구자들을 계몽하기를 바랍니다.

<table><tbody><tr><td>23/25/26 G 바늘</td><td>Chengdu Xinjin Shifeng 의료 기기 및 악기 (주)</td><td>SB1-074(IV)</td><td></td></tr><tr><td>C57/B6J&nbsp;</td><td>Gempharmatech Experimental Animals Company, 중국 청두</td><td>C57/B6J</td><td></td></tr><tr><td>DAPI 염색 솔루션&nbsp;</td><td>비요타임&nbsp;</td><td>Cat#C1005</td><td></td></tr><tr><td>임베딩 카세트</td><td>CITOTEST Scientific</td><td>80106-1100-16</td><td></td></tr><tr><td>헤마톡실린 및 에오신 염색 키트</td><td>Biosharp</td><td>BL700B</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RWD Life Science Co., Ltd</td><td>R510-22-10</td><td></td></tr><tr><td>Masson' s 트리크롬 스테인 키트</td><td>Solarbio</td><td>G1340</td><td></td></tr><tr><td>마이크로톰&nbsp;</td><td>Leica</td><td>RM2235</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital Sodium</td><td>Huaxia 화학 시약 Co., Ltd</td><td>2018042001</td><td></td></tr><tr><td>Rabbit polyclonal&nbsp;</td><td>안티-Sp7&nbsp;</td><td>Abcam Cat# ab22552</td><td></td></tr><tr><td>핀셋</td><td>Chengdu Xinjin Shifeng 의료 기기 및 악기 (주)</td><td>SB2-115</td><td></td></tr></tbody></table> 시리즈

쥐 하악 어금니 추출 소켓 치유 모델 구축

The Establishment of a Murine Mandibular Molar Extraction Socket Healing Model

본 연구는 폐포골 재생 및 막내 골화 연구를 위한 실행 가능한 모델을 제공하기 위해 쥐 하악에서 어금니 추출 모델의 개발을 소개합니다. C57/J6 마우스를 사용하여 하악 제1대구치를 추출하여 이 모델을 확립했습니다. 그들은 안락사되었고 수술 후 각각 1주와 4주에 양측 하악골을 적출했습니다. 성공적인 수술을 입증하기 위해 후속 연속 입체 채취, 조직학적 평가 및 면역형광 염색을 수행했습니다. 수술 직후, 입체 영상은 빈 추출 소켓을 표시하였다. 수술 후 1주째의 헤마톡실린 및 에오신(H&E) 및 4주째의 Masson 염색은 원래 뿌리의 면적이 각각 부분적으로 그리고 완전히 뼈 섬유주로 채워져 있음을 보여주었습니다. 면역형광 염색 결과 항상성 측면과 비교하여 수술 후 1주일에 Sp7 발현이 증가하여 치조와에서 활발한 골형성을 시사하는 것으로 나타났습니다. 이 모든 결과는 실행 가능한 쥐 치아 추출 소켓 치유 모델을 입증했습니다. 턱뼈 결함 치유 또는 소켓 치유의 메커니즘을 밝히는 향후 연구에서는 이 방법을 채택할 수 있습니다.

이 방법의 실제 사용을 설명하기 위해 건강한 C57BL/6 마우스 2마리(생후 3개월, 둘 다 암컷)의 우측 하악 제1대구치를 추출하여 각각 1주와 4주 동안 추적 관찰했습니다. 손상되지 않은 왼쪽 하악골은 건강한 대조군으로 사용되었습니다. 그림 1A 는 26-23G 바늘과 톱니형 안과용 핀셋을 포함한 수술 기구의 특정 기능을 보여줍니다. 26G 바늘은 핀포인트 제거되고 구부러집니다. 25G 바늘은 정확한 지점에서 약 25°로 구부러져 있습니다. 23G 바늘은 수술의 핵심이며 정확한 지점에서 각각 약 25° 및 35° 구부러져 있습니다(그림 1B1, B2). 핀셋은 쥐 어금니의 모양에 맞는 1mm 길이의 이빨을 가지고 있습니다(그림 1B3). 도 1C 는 수술 전의 마우스 상태를 나타낸다...

이 프로토콜은 마우스에서 하악 제1대구치를 추출하는 방법에 대한 단계별 세부 사항을 보여줍니다. 턱뼈 치유 및 재생에 중점을 둔 연구자들에게 대안적인 방법을 제공합니다.

This study introduces the development of a molar extraction model in the murine mandible to provide a practicable model for studying alveolar bone ...

이 프로토콜은 사용 가능한 뼈 재생 연구에서 거의 도입되지 않는 쥐 하악 어금니 추출 모델을 제공합니다. 쥐 하악 어금니 추출 모델을 개발하는 것은 다양한 개입 그룹 간에 더 유사하고 일관된 하악으로 필요합니다. 이 기술의 의미는 어떤 질병의 치료에도 미치지 못합니다.그러나 이 과정의 기본 메커니즘을 검토하는 데 도움을 줌으로써 장기적으로 임상적 치유 및 턱뼈 재생에 도움이 될 수 있습니다. 이 기술은 연구를 돕기 위해 개발되어 사용 가능한 치유 및 재생 메커니즘을 밝힙니다. 유감스럽게도 이 방법은 다른 시스템에는 적용할 수 없습니다.마취된 마우스의 원위 저항을 제거하기 시작하여 핀셋으로 어금니를 내측으로 잡습니다. 그런 다음 23게이지 바늘을 원위근의 협측 치조골에 강제로 넣고 간격을 만듭니다. 그런 다음 25게이지 바늘로 변경하여 간격 확장을 계속합니다.치근단 부위를 향해 섬세하게 진행하면서 바늘을 천천히 앞뒤로 돌리고 치조와에서 뿌리를 밀어냅니다. 근심 저항을 제거하려면 23 게이지 바늘을 루트 포크에 삽입하고 교합 어금니를 들어 올립니다. 어금니를 단단히 잡은 후 다른 23게이지 바늘을 잡고 설근 근심 치주막에 밀어 넣어 간격을 만듭니다.그런 다음 25 게이지 바늘을 사용하여 천천히 앞으로 그리고 협측으로 회전합니다. 일부 근본적인 장애물이 어금니의 탈구를 방해하는 경우 26게이지 바늘을 사용하여 치근점을 관통하고 수술을 반복합니다. 최종 발치 중에 치아를 추출하여 크라운이 교합면 위로 올라가고 두 개의 온전한 뿌리가 명확하게 보이도록 합니다.하악 제1대구치를 성공적으로 발치한 후 마른 면봉을 발라 출혈을 멈추고 혀의 위치를 바꾸고 진통제를 시행하고 마우스를 마취에서 회복될 때까지 항온 가열 패드에 올려 놓습니다. 치아 소켓은 즉시 응고 후 추출로 채워졌습니다. 소켓의 치유 과정을 일주일 동안 관찰하였다.일부 스펀지 같은 섬유주 뼈가 형성되었지만 혈전은 남아 있었습니다. 치유 과정에서 소켓은 2주 후에 스폰지 뼈로 채워져 재생이 완료되었음을 나타냅니다. 조골세포 분화의 마스터 조절자인 Sp7은 골을 형성하는 앞쪽의 가장자리에 있는 골수세포에서 널리 발현되었다.항상성 상태에서 섬유주 뼈는 일관되고 섬처럼 뿌려진 골수 세포 블록과 합류했습니다. 수술 후 일주일 후, 수많은 Sp7 발현 세포가 새로 형성된 섬유주골이 발치 소켓을 가득 채웠습니다. 수술 후 4주가 지나자 상태가 역전되어 섬유주골로 크게 합쳐졌습니다.Sp7 발현 세포의 활성은 항상성 상태에 근접하는 수준으로 감소했습니다. 신생아 재생 과정을 입증하기 위해 수행될 수도 있다. 이 기술은 연구자들이 새로운 쥐 모델을 제공함으로써 사용 가능한 치유 및 재생 과정의 기본 메커니즘을 밝히는 데 도움이 될 수 있습니다.

the-establishment-murine-mandibular-molar-extraction-socket-healing

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

여기에서 우리는 뼈 재생 능력의 관점에서 뼈 치환 물질을 평가하는 것을 목표로 토끼에 있는 외과 프로토콜을 제시합니다. 토끼 두개골에 고정된 PEEK 실린더를 사용하여, 골전도, 골연, 골형성 및 물질에 의해 유도된 혈관발생은 살아있는 동물 또는 안락사된 동물상에서 평가될 수 있다.

뼈 치환 재료의 뼈 성장 및 혈관 혈관 의 평가를 위한 토끼에 있는 뼈 증강의 Calvarial 모형

이 기사에서는 구강 누공이 있는 마우스 모델을 설정하는 단계별 절차를 간략하게 설명합니다. 구강 누공은 열화된 안과 소작을 사용하여 경구의 정중선 부분을 손상시켜 구강과 비강 사이에 구멍을 형성하여 만들어졌습니다.

Oronasal Fistula 마우스 모델 구축

이 기사에서는 혁신적인 구강 재갈을 사용하여 마우스에서 치수염 모델을 확립하기 위한 간소화된 프로토콜을 제시한 후 후속 조직학적 분석을 제공합니다.

Pulpitis 연구를 위한 새로운 구강 개그를 이용한 Murine Pulp Exposure Model 구축

여기에서 우리는 쥐 상악 모델에서 작동하는 관리 가능한 교정 치아 이동 프로토콜을 단계별로 보여줍니다. 각 단계에 대한 명확한 설명과 시각적 시연을 통해 연구원은 이 모델을 마스터하고 약간의 수정을 통해 실험 요구 사항에 적용할 수 있습니다.

쥐 상악 교정 모델의 확립

이것은 마우스에서 합자에 의한 임플란트 주위염의 실험 모델에 대한 보고서입니다. 동물의 수술 전후 관리, 발치, 임플란트 식립, 합자에 의한 임플란트 주위염에 이르기까지 모든 수술 단계를 설명합니다.

마우스의 인대 유도 임플란트 주위염의 실험 모델

이 프로토콜은 하악골 복구를 분석하기 위한 포괄적이고 효율적인 방법을 제시합니다. 생쥐 모델에서 비안정화 하악골 골절에 대한 재현 가능한 기술을 설명하여 조직 손상 및 뼈 손실을 최소화하면서 내연골 뼈 복구 과정을 분석할 수 있습니다.

Less-Invasive Technique for Non-stabilized Mandibular Fracture in Mouse Models

본 연구의 목적은 두개안면 조직 재생 연구를 위해 Ambystoma mexicanum 에서 완전 횡단적 하악 절단술을 안전하고 재현 가능한 수술법을 표준화하는 것이었습니다.

Ambystoma mexicanum 모델에서 두개안면 조직 재생 연구를 위한 하악 손상 모델 설계 및 표준화

생쥐의 신장 이식은 성공을위한주의 이후 수술 진료와 치료를 필요로하는 기술적으로 도전적인 절차입니다.

Murine 신장 이식 절차

이 동영상은 심근 국소 빈혈의 pathobiological 및 pathophysiological 프로세스를 연구하기위한 빠르고 안정적​​인 모델을 사용하는 방법을 보여줍니다.

내사 - 결합 : 심근 경색의 Murine 모델

이 비디오 프로토콜은 유전자 변형을 생성하는 방법을...

트렌스 제닉 생산 Xenopus laevis 제한 효소 중재 통합 및 핵 이식에 의해

배우세요 쥐 하악 어금니 추출 기법을 통해 턱뼈 재생 및 치유 메커니즘을 연구하는 신뢰할 수 있는 동물 모델을 구축하는 방법을. 이 프로토콜은 골 형성 조절인자 Sp7 발현 분석을 포함하여 뼈 재생 과정을 4주간 평가합니다.

쥐 하악 어금니 추출 소켓 치유 모델 구축

더 많은 동영상 탐색