Name: 폴리카프로락톤 골격 및 hiPSC 유래 심장 세포의 용융 전기방사 쓰기를 사용한 3D 인간 심근 조직 생성 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T14:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 17 s
Description: 배우세요 용융 전기방사 쓰기(MEW)와 hiPSC 유래 심장 세포를 활용한 3D 인간 심근 조직 생성 방법을. 이 기술은 정확한 질병 모델링과 신뢰할 수 있는 약물 테스트를 위한 생체공학적 접근법을 제공합니다.

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이 연구는 보조금 계약 No 874827(BRAV<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/67847/67847eq01.jpg" style="margin: auto;">)에 따라 H2020 연구 및 혁신 프로그램의 지원을 받았습니다. MICIU/AEI /10.13039/501100011033 및 European Union NextGenerationEU/PRTR이 자금을 지원하는 프로젝트 PLEC2021-008127(CARDIOPRINT), PID2022-142562OB-I00(VOLVAD) 및 PID2022-142807OA-I00(INVESTTRA)을 통한 Ministerio de Ciencia y Universidades(스페인); Gobierno de Navarra Proyectos Estratégicos IMPRIMED(0011-1411-2021-000096) 및 BIOHEART(0011-1411-2022-000071); Gobierno de Navarra Proyectos Colaborativos BIOGEN (PC020-021-022) 및 Gobierno de Navarra Salud GN32/2023. 그림 1A, 그림 2A 및 그림 4A는 BioRender.com 로 생성됩니다.

<ol><li>Cho, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+opportunities+for+the+next+generation+of+cardiovascular+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Challenges and opportunities for the next generation of cardiovascular tissue engineering.</a> Nat Methods. 19 (9), 1064-1071 (2022).</li>
<li>Garbern, J. C., Lee, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+regeneration%3A+20+years+of+progress+and+renewed+optimism%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Heart regeneration: 20 years of progress and renewed optimism.</a> Dev Cell. 57 (4), 424-439 (2022).</li>
<li>Lian, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Robust+cardiomyocyte+differentiation+from+human+pluripotent+stem+cells+via+temporal+modulation+of+canonical+Wnt+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Robust cardiomyocyte differentiation from human pluripotent stem cells via temporal modulation of canonical Wnt signaling.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 109 (27), E1848-E1857 (2012).</li>
<li>Burridge, P. W., Holmström, A., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemically+defined+culture+and+cardiomyocyte+differentiation+of+human+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">Chemically defined culture and cardiomyocyte differentiation of human pluripotent stem cells.</a> Curr Protoc Hum Genet. 87 (21), 21.3.1-21.3.15 (2015).</li>
<li>Feric, N. T., Radisic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maturing+human+pluripotent+stem+cell-derived+cardiomyocytes+in+human+engineered+cardiac+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Maturing human pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes in human engineered cardiac tissues.</a> Adv Drug Deliv Rev. 96, 110-134 (2016).</li>
<li>Huang, S., Yang, Y., Yang, Q., Zhao, Q., Ye, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineered+circulatory+scaffolds+for+building+cardiac+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Dis%22%5BJournal%5D)">Engineered circulatory scaffolds for building cardiac tissue.</a> J Thorac Dis. 10 (Suppl 20), S2312-S2328 (2018).</li>
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<li>Brown, T. D., Dalton, P. D., Hutmacher, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+writing+by+way+of+melt+electrospinning%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Mater%22%5BJournal%5D)">Direct writing by way of melt electrospinning.</a> Adv Mater. 23 (47), 5651-5657 (2011).</li>
<li>Vernon, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+heart+valve+interfaces+using+melt+electrowriting%3A+Biomimetic+design+strategies+from+multi-modal+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Healthc+Mater%22%5BJournal%5D)">Engineering heart valve interfaces using melt electrowriting: Biomimetic design strategies from multi-modal imaging.</a> Adv Healthc Mater. 11 (24), 2201028(2022).</li>
<li>Montero-Calle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+human+myocardium+using+multidimensional+modeling+of+engineered+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Fabrication of human myocardium using multidimensional modeling of engineered tissues.</a> Biofabrication. 14 (4), 045017(2022).</li>
<li>Castilho, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melt+electrospinning+writing+of+poly-hydroxymethylglycolide-co-%CE%B5-caprolactone-based+scaffolds+for+cardiac+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Healthc+Mater%22%5BJournal%5D)">Melt electrospinning writing of poly-hydroxymethylglycolide-co-ε-caprolactone-based scaffolds for cardiac tissue engineering.</a> Adv Healthc Mater. 6 (18), 1700311(2017).</li>
<li>Castilho, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melt+electrowriting+allows+tailored+microstructural+and+mechanical+design+of+scaffolds+to+advance+functional+human+myocardial+tissue+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Funct+Mater%22%5BJournal%5D)">Melt electrowriting allows tailored microstructural and mechanical design of scaffolds to advance functional human myocardial tissue formation.</a> Adv Funct Mater. 28 (40), 1803151(2018).</li>
<li>Ronaldson-Bouchard, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+maturation+of+human+cardiac+tissue+grown+from+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Advanced maturation of human cardiac tissue grown from pluripotent stem cells.</a> Nature. 556, 239-243 (2018).</li>
<li>Palaskas, N. L., Ali, H. J., Koutroumpakis, E., Ganatra, S., Deswal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+toxicity+of+immune+therapies+for+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular toxicity of immune therapies for cancer.</a> BMJ. 385, e075859(2024).</li>
<li>Lian, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+cardiomyocyte+differentiation+from+human+pluripotent+stem+cells+by+modulating+Wnt%2F%CE%B2-catenin+signaling+under+fully+defined+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Directed cardiomyocyte differentiation from human pluripotent stem cells by modulating Wnt/β-catenin signaling under fully defined conditions.</a> Nat Protoc. 8 (1), 162-175 (2012).</li>
<li>Zhang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+quiescent+cardiac+fibroblasts+from+human+induced+pluripotent+stem+cells+for+in+vitro+modeling+of+cardiac+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Generation of quiescent cardiac fibroblasts from human induced pluripotent stem cells for in vitro modeling of cardiac fibrosis.</a> Circ Res. 125 (5), 552-566 (2019).</li>
<li>Breckwoldt, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+of+cardiomyocytes+and+generation+of+human-engineered+heart+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Differentiation of cardiomyocytes and generation of human-engineered heart tissue.</a> Nat Protoc. 12 (6), 1177-1197 (2017).</li>
<li>Ronaldson-Bouchard, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+maturation+of+human+cardiac+tissue+grown+from+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Advanced maturation of human cardiac tissue grown from pluripotent stem cells.</a> Nature. 556, 239(2018).</li>
<li>Rivera-Arbeláez, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+assessment+of+human-engineered+heart+tissues+using+deep+learning+and+template+matching+for+segmentation+and+tracking%5BTitle%5D)+AND+%22Bioeng+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Automated assessment of human-engineered heart tissues using deep learning and template matching for segmentation and tracking.</a> Bioeng Transl Med. 8 (3), e10513(2023).</li>
<li>Sala, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MUSCLEMOTION%3A+A+versatile+open+software+tool+to+quantify+cardiomyocyte+and+cardiac+muscle+contraction+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">MUSCLEMOTION: A versatile open software tool to quantify cardiomyocyte and cardiac muscle contraction in vitro and in vivo.</a> Circ Res. 122 (3), e5-e16 (2018).</li>
<li>Reyat, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+the+pathology+and+treatment+of+cardiac+fibrosis+in+vascularised+atrial+and+ventricular+cardiac+microtissues%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">Modeling the pathology and treatment of cardiac fibrosis in vascularised atrial and ventricular cardiac microtissues.</a> Front Cardiovasc Med. 10, 1156759(2023).</li>
<li>Park, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Materials+and+extracellular+matrix+rigidity+highlighted+in+tissue+damages+and+diseases%3A+Implication+for+biomaterials+design+and+therapeutic+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Bioact+Mater%22%5BJournal%5D)">Materials and extracellular matrix rigidity highlighted in tissue damages and diseases: Implication for biomaterials design and therapeutic targets.</a> Bioact Mater. 20, 381-403 (2023).</li>
<li>Wunner, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melt+electrospinning+writing+of+three-dimensional+poly%28%CE%B5-caprolactone%29+scaffolds+with+controllable+morphologies+for+tissue+engineering+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Melt electrospinning writing of three-dimensional poly(ε-caprolactone) scaffolds with controllable morphologies for tissue engineering applications.</a> J Vis Exp. 130, e55617(2017).</li>
<li>Robinson, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+next+frontier+in+melt+electrospinning%3A+Taming+the+jet%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Funct+Mater%22%5BJournal%5D)">The next frontier in melt electrospinning: Taming the jet.</a> Adv Funct Mater. 29 (44), 1904664(2019).</li>
<li>Kade, J. C., Dalton, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymers+for+MELT+electrowriting%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Healthc+Mater%22%5BJournal%5D)">Polymers for MELT electrowriting.</a> Adv Healthc Mater. 10 (1), 2001232(2021).</li>
<li>Inchingolo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polycaprolactone+in+bone+tissue+engineering%3A+A+comprehensive+review+of+innovations+in+scaffold+fabrication+and+surface+modifications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Funct+Biomater%22%5BJournal%5D)">Polycaprolactone in bone tissue engineering: A comprehensive review of innovations in scaffold fabrication and surface modifications.</a> J Funct Biomater. 15 (9), 243(2024).</li>
<li>Mondadori, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+response+of+human+primary+macrophages+to+defined+fibrous+architectures+fabricated+by+melt+electrowriting%5BTitle%5D)+AND+%22Bioact+Mater%22%5BJournal%5D)">Assessing the response of human primary macrophages to defined fibrous architectures fabricated by melt electrowriting.</a> Bioact Mater. 21, 209-222 (2022).</li>
<li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melt-electrowriting-enabled+anisotropic+scaffolds+loaded+with+valve+interstitial+cells+for+heart+valve+tissue+Engineering%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nanobiotechnology%22%5BJournal%5D)">Melt-electrowriting-enabled anisotropic scaffolds loaded with valve interstitial cells for heart valve tissue Engineering.</a> J Nanobiotechnology. 22 (1), 378(2024).</li>
<li>Ristovski, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+fabrication+of+melt+electrospun+tissue+engineering+scaffolds+using+direct+writing+and+advanced+electric+field+control%5BTitle%5D)+AND+%22Biointerphases%22%5BJournal%5D)">Improved fabrication of melt electrospun tissue engineering scaffolds using direct writing and advanced electric field control.</a> Biointerphases. 10 (1), 011006(2015).</li>
<li>Puluca, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioprinting+approaches+to+engineering+vascularized+3D+cardiac+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Cardiol+Rep%22%5BJournal%5D)">Bioprinting approaches to engineering vascularized 3D cardiac tissues.</a> Curr Cardiol Rep. 21 (9), 1-11 (2019).</li>
<li>Lu, T. Y., Xiang, Y., Tang, M., Chen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+printing+approaches+to+engineer+cardiac+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Cardiol+Rep%22%5BJournal%5D)">3D printing approaches to engineer cardiac tissue.</a> Curr Cardiol Rep. 25 (6), 505-514 (2023).</li>
<li>Voges, H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+cells+improve+functionality+of+human+cardiac+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Vascular cells improve functionality of human cardiac organoids.</a> Cell Rep. 42 (5), 112322(2023).</li>
<li>Zhu, L., Liu, K., Feng, Q., Liao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+organoids%3A+A+3D+technology+for+modeling+heart+development+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Rev+Rep%22%5BJournal%5D)">Cardiac organoids: A 3D technology for modeling heart development and disease.</a> Stem Cell Rev Rep. 18 (8), 2593-2605 (2022).</li>
<li>Karbassi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiomyocyte+maturation%3A+advances+in+knowledge+and+implications+for+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Cardiomyocyte maturation: advances in knowledge and implications for regenerative medicine.</a> Nat Rev Cardiol. 17 (6), 341-359 (2020).</li>
<li>Carlos-Oliveira, M., Lozano-Juan, F., Occhetta, P., Visone, R., Rasponi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+strategies+of+mechanical+stimulation+for+maturation+of+cardiac+microtissues%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+Rev%22%5BJournal%5D)">Current strategies of mechanical stimulation for maturation of cardiac microtissues.</a> Biophys Rev. 13 (5), 717(2021).</li>
<li>Maihemuti, W., Murata, K., Abulaiti, M., Minatoya, K., Masumoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+electro-dynamic+stimulation+accelerates+maturation+of+engineered+cardiac+tissues+generated+by+human+iPS+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Simultaneous electro-dynamic stimulation accelerates maturation of engineered cardiac tissues generated by human iPS cells.</a> Biochem Biophys Res Commun. 733, 150605(2024).</li>
<li>Wang, L., Serpooshan, V., Zhang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+human+cardiac+muscle+patch+constructs+for+prevention+of+post-infarction+LV+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">Engineering human cardiac muscle patch constructs for prevention of post-infarction LV remodeling.</a> Front Cardiovasc Med. 8, 621781(2021).</li>
<li>Matveeva, V. G., Khanova, M. U., Antonova, L. V., Barbarash, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrin+%E2%80%93+A+promising+material+for+vascular+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Russ+J+Transplantol+Artif+Organs%22%5BJournal%5D)">Fibrin – A promising material for vascular tissue engineering.</a> Russ J Transplantol Artif Organs. 22 (1), 196-208 (2020).</li>
<li>Sproul, E. P., Hannan, R. T., Brown, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlling+fibrin+network+morphology%2C+polymerization%2C+and+degradation+dynamics+in+fibrin+gels+for+promoting+tissue+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Controlling fibrin network morphology, polymerization, and degradation dynamics in fibrin gels for promoting tissue repair.</a> Methods Mol Biol. 1758, 85-99 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>&마이크로;-슬라이드 8웰 챔버 커버슬립(IbiTreat)</td><td>IBIDI</td><td>80826</td><td></td></tr><tr><td>0.1% 젤라틴 용액(Embryomax)</td><td>Merck Millipore</td><td>ES-006-B</td><td></td></tr><tr><td>10% 포르말린</td><td>Sigma Aldrich</td><td>HT501128</td><td></td></tr><tr><td>12웰 플레이트</td><td>Costar/Corning</td><td>3513</td><td></td></tr><tr><td>6웰 플레이트</td><td>Costar/Corning</td><td>3506</td><td></td></tr><tr><td>고급 DMEM 1x (ADMEM)</td>소의 폐에서 추출한 <td>Gibco</td><td>12491015</td><td></td></tr><tr><td>아프로티닌</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A1153</td><td></td></tr><tr><td>B-27 SUPLEMENT, 플러스 인슐린 (50x)&nbsp;</td><td>Life Technologies</td><td>A317504044</td><td></td></tr><tr><td>B27 보충제, 인슐린 제외 (50x)</td><td>Life Technologies</td><td>A1895601</td><td></td></tr><tr><td>생검 펀치 (직경 6mm)</td><td>Medical</td><td>BP-60F</td><td></td></tr><tr><td>소 혈청 알부민 (BSA)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>CHIR-99021&nbsp;</td><td>AXON MEDCHEM</td><td>AXON1386</td><td></td></tr><tr><td>컨포칼 레이저 스캐닝 현미경</td><td>Zeiss</td><td>LSM 800</td><td></td></tr><tr><td>문화 플라스크 175 cm</td><td>Greiner Bio-One</td><td>660175</td><td></td></tr><tr><td>문화 플라스크 75 cm</td><td>Falcon</td><td>353136</td><td></td></tr><tr><td>Cytometer</td><td>Beckman Coulter</td><td>CytoFlex&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>다피&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D9542</td><td></td></tr><tr><td>동키 안티-마우스 IgG (H+L) 고-교차 흡착 2차 항체, Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen</td><td>A-21202&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>당나귀 항-토끼 IgG (H+L) 고-교차 흡착 2차 항체, Alexa Fluor 594</td><td>Invitrogen</td><td>A-21207&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>DPBS (Mg2+, Ca2+ free)</td><td>Gibco</td><td>A314190094</td><td></td></tr><tr><td>EDTA 0.5M pH 8.0</td><td>Life Technologies</td><td>AM9260G</td><td></td></tr><tr><td>ESSENTIAL 8 MEDIUM KIT</td><td>Life Technologies</td><td>A1517001</td><td></td></tr><tr><td>FGF2 (재조합 인간 FGF-basic 154 a.a.)</td><td>Peprotech</td><td>100-18B</td><td></td></tr><tr><td>소 혈장에서 추출한 피브리노겐</td><td>Sigma Aldrich</td><td>F8630</td><td></td></tr><tr><td>섬유아세포 성장 매체 3 KIT (FGM3)</td><td>PromoCell</td><td>C-23130</td><td></td></tr><tr><td>녹아웃 세럼 교체(KSR)</td><td>Life Technologies</td><td>10828028</td><td></td></tr><tr><td>젖산염(L-락테이트나트륨)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>71718</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel 성장 인자 감소 (MGFR) 기저막 매트릭스, LDEV-free</td><td>Corning</td><td>354230</td><td></td></tr><tr><td>MEW 23-G 바늘</td><td>Nordson</td><td>7018302</td><td></td></tr><tr><td>MEW 프린터</td><td>QUT, 퀸즐랜드 공과</td><td></td><td></td>대학</tr><tr><td>MEW 주사기</td><td>Nordson</td><td>7012072</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Anti-Cardiac Troponin T Monoclonal Anti Neural Anti</td><td>Biological</td><td>Gen MA5-12960&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>마우스 Anti-DDR2 단클론 항체</td><td>Sigma Aldrich</td><td>SAB5300116</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Anti-&alpha;-actinin (sarcomeric) 단클론 항체</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A7811&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>페니실린 - 스트렙토마이신</td><td>생명 기술</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>폴리&엡실론;-카프로락톤(PCL), 의료용</td><td>Corbion</td><td>PURASORB&reg; PC 12</td><td></td></tr><tr><td>Rabbit Anti-Vimentin 재조합 단클론 항체 [EPR3776] - 세포골격 마커</td><td>Abcam</td><td>Ab29547&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>레티노산&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R2625</td><td></td></tr><tr><td>ROCK 억제제 Y-27632 (10mg)</td><td>Fisher Scientific</td><td>HB2297</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 (L-글루타민)</td><td>Gibco</td><td>21875034</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 (페놀 레드 없음)</td><td>Gibco</td><td>32404014</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 포도당 없음</td><td>Gibco</td><td>11879020</td><td></td></tr><tr><td>SB431542</td><td>SELLECK CHEMICALS</td><td>S1067</td><td></td></tr><tr><td>분광 광도계&nbsp;</td><td>BMG 랩테크&nbsp;</td><td>SPECTROstar 나노</td><td></td></tr><tr><td>트롬빈(인간 알파 트롬빈, Factor IIa)</td><td>효소 연구소</td><td>HT 1002a</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T8787</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express</td><td>Life Technologies</td><td>12604021</td><td></td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P2287</td><td></td></tr><tr><td>Wnt-C59</td><td>AXON MEDCHEM</td><td>AXON2287</td><td></td></tr></tbody></table>

폴리카프로락톤 골격 및 hipsc 유래 심장 세포의 용융 전기방사 쓰기를 사용한 3d 인간 심근 조직 생성

3D Human Myocardial Tissue Generation Using Melt Electrospinning Writing of Polycaprolactone Scaffolds and hiPSC-Derived Cardiac Cells

2D hiPSC 유래 심장 세포의 특성화 다중 표현형 심장 조직을 생성하기 위해 hiPSC-CM과 hiPSC-CF를 독립적으로 분화하고 in vitro에서 특성화합니다. 적절한 최적화와 엄격한 유지 관리를 통해 다음 프로토콜은 분화 9일차에 80% 이상의 hiPSC-CM 수율을 달성하여 자발적으로 박동하는 세포를 생성합니다(그림 1A). 또한, 대사 선택에 의한 순도 강화는 non-hiPSC-CM을 크게 제거하여 21일째에 심장 트로포닌 단백질(cTNT+)을 발현하는 세포의 90% 이상으로 구성된 배양물을 생성합니다(그림 1B). 이러한 강력한 박동 단층은 IF 염색에 의한 수축성 육종 악티닌 단백질(ACTN)의 발현을 보여줍니다(그림 1C, D).
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폴리카프로락톤 골격 및 hiPSC 유래 심장 세포의 용융 전기방사 쓰기를 사용한 3D 인간 심근 조직 생성

The development of functional human cardiac tissues holds significant promise for advancing applications in drug screening, disease modeling, and ...

3d-human-myocardial-tissue-generation-using-melt-electrospinning

Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

정렬 심근 조직의 생성 임상 유용한 목적에 줄기 세포 생물학의 최근 발전을 조절하기위한 중요한 요구 사항입니다. 여기에 우리는 세포의 형태와 기능의 정확한 제어를위한 microcontact 인쇄 방법을 설명합니다. 심장 progenitors을 파생 배아 줄기 세포의 높은 정화 인구 사용하여, 우리는 비 등방성 기능 심근 조직을 생성합니다.

Microcontact 인쇄를 통해 정렬 기능 심근 조직의 생성

이 원고는 표면 마커 발현과 세포 분류를 사용하여 정의된 공학적 심장 조직의 생성을 설명합니다. 그런 다음 정의된 조직을 다중 조직 생물반응기에서 사용하여 심장 세포 치료의 메커니즘을 조사하여 기능적이면서도 제어된 인간 심장 모델 시스템을 제공할 수 있습니다.

정의 인간 공학 심장 조직의 건설 심장 세포 치료의 메커니즘을 연구하는

이 프로토콜은 생체 재료를 사용하지 않고 심장 ​​조직의 3D bioprinting을 설명합니다. 3D bioprinted 심장 패치는 구성 요소 spheroids의 기계적 통합을 나타내며 심장 조직 재생 및 심장병의 3D 모델로서 매우 유망합니다.

3D Bioprinting을 이용한 Spheroids의 기계적 통합을 보여주는 심장 조직의 생성

이 프로토콜 만족 구조적 무결성 및 동기 박동 동작 3 차원 비 계 없는 심장 조직을 만들 순 형 기반 방법을 설명 합니다.

비 계-무료 3 차원 심장 조직 창조의 그물 형 기반 방법

본 프로토콜은 인간 유도만능 줄기 세포에서 유래한 심혈관 세포를 포함하는 메쉬 모양의 엔지니어링 된 심장 조직을 생성하여 심장 질환에 대한 세포 이식 요법의 조사를 허용합니다.

생체 내 심근 수리를 위한 인간 iPS 세포에서 파생된 메쉬 모양의 조작된 심장 조직의 준비

여기서, 우리는 미리 분화된 인간 유도만능 줄기 세포 유래 심근세포, 심장 섬유아세포 및 내피 세포로 구성된 3D 자가 조립 심장 미세 조직 배열을 생성하는 사용하기 쉬운 방법론을 기술합니다. 심장 미세 조직을 생성하는 기술을 요구하는 이 사용자 친화적이고 낮은 세포는 질병 모델링 및 약물 개발의 초기 단계를 위해 구현될 수 있습니다.

인간 iPSC 유래 심근세포, 심장 섬유아세포 및 내피 세포를 사용하여 3D 심장 미세 조직 배열의 제조

이 프로토콜의 목표는 심장 조직 공학, 약물 스크리닝 및 질병 모델링을 위해 심장 섬유아세포(CFs)와 공동 배양된 줄기 세포 유래 심근세포(CFs)로 구성된 고도로 정렬된 인간 심장 조직의 3차원(3D) 미세유체 모델의 개발을 설명하고 시연하는 것이다.

미세 유체 플랫폼 내에서 3D 조직 된 인간 심장 조직 개발

제시된 방법은 3차원(3D) 스캐폴드(예: 심장 판막 전단지)에서 생체 모방 섬유 구조를 엔지니어링하는 혁신적인 방법을 제공합니다. 3D 인쇄된 전도성 형상은 모양과 치수를 결정하는 데 사용되었습니다. 섬유 배향 및 특성은 각 층에 대해 개별적으로 조정가능하였다. 하나의 설정으로 여러 샘플을 제조 할 수 있습니다.

3D 프린팅과 전기방사를 결합하여 생체모방 심장 판막 전단지 제조

여기에 제시된 것은 고처리량, 다차원 형식으로 배양된 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 심근 세포에서 심장 스페로이드(CS)의 생성 및 냉동 보존을 위한 일련의 프로토콜입니다. 이 3차원 모델은 질병 모델링, 고처리량 스크리닝을 위한 강력한 플랫폼 역할을 하며 냉동 보존 후에도 기능을 유지합니다.

인간 유도 만능 줄기 세포 유래 심장 스페로이드의 생성, 고처리량 스크리닝 및 바이오뱅킹

빛을 사용하여 심장 세포와 조직을 제어하면 비접촉 자극이 가능하여 세포의 자연 상태와 기능을 보존할 수 있으므로 기본 연구와 치료 응용 분야 모두에 유용한 접근 방식이 됩니다.

비유전적 광학 자극을 통한 Ca2+ 전파를 연구하기 위한 심장 미세생리학적 시스템

배우세요 용융 전기방사 쓰기(MEW)와 hiPSC 유래 심장 세포를 활용한 3D 인간 심근 조직 생성 방법을. 이 기술은 정확한 질병 모델링과 신뢰할 수 있는 약물 테스트를 위한 생체공학적 접근법을 제공합니다.

폴리카프로락톤 골격 및 hiPSC 유래 심장 세포의 용융 전기방사 쓰기를 사용한 3D 인간 심근 조직 생성

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