Name: 마우스 기본 모드 네트워크의 종단적이고 다중 모드 전기생리학 기록을 가능하게 하는 대형 재밀봉 가능한 두개골 창을 위한 수술 프로토콜 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-29T16:25:00.000+00:00
Duration: 14 min 34 s
Description: 학습하세요 마우스 기본 모드 네트워크의 장기간 다중 모드 전기생리학 기록을 위한 재밀봉 가능한 대형 두개골 창 수술법을. 이 방법은 표면 micro-ECoG와 Neuropixels 프로브를 결합하여 1,000개 이상 채널에서 동시 기록을 가능하게 합니다.

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<table><tbody><tr><td>&micro; ECoG 어레이 & mdash; 512채널 커스텀 (2 & times; 256채널)</td><td>뉴로넥서스</td><td>E256-200-30-80</td><td>포장: IH256. 두 번의 16시간 넘게 되고; 16개의 하위 격자(각각 3.3mm 및 3.5 mm); 200 & mu; m 음정; 80 & mu; 전극 직경 m. 표면적인 DMN 녹음.</td></tr><tr><td>3축 왼쪽 마이크로매니퓰레이터 팔</td><td>월드 프리시전 인스트루먼트(WPI)</td><td>504926</td><td>10 & 뮤; m 해상도; 디지털 디스플레이; 수술 중 헤드플레이트/프로브 위치 조정에 사용됩니다</td></tr><tr><td>3D 프린팅 보호 캡</td><td>사내 (Anycubic Photon Mono 4K)</td><td>해당 없음</td><td>맞춤형 디자인; Anycubic High Clear UV 수지로 인쇄; STL 파일은 https://github.com/RazBalin/ProtectiveDMN_Cap 에서 이용 가능합니다</td></tr><tr><td>아세톤 (실험실 등급)</td><td>시그마-올드리치</td><td>179973</td><td>접착 전 두개골 표면 탈지 및 골막 제거</td></tr><tr><td>애드슨 듀라 훅 5mm (파인 듀라 훅)</td><td>gSource</td><td>gS 25.2570</td><td>뼈판을 경막에서 분리하는 데 사용; 고운 텅스텐 와이어나 이와 유사한 재료로 만들어졌습니다</td></tr><tr><td>Anycubic 하이 클리어 UV 레진</td><td>애니큐빅</td><td>STMGCL-102B&nbsp;</td><td>Anycubic Photon Mono 4K 프린터와 함께 3D 프린팅 보호 캡에 사용되는 광고분자 수지</td></tr><tr><td>Anycubic Photon Mono 4K 3D 레진 프린터</td><td>애니큐빅</td><td>포톤-모노-4K</td><td>Anycubic High Clear Resin에서 보호 창문 캡을 출력하는 데 사용됨</td></tr><tr><td>Anycubic UV 레진 워시 & 큐어 머신 2.0</td><td>애니큐빅</td><td>285-550</td><td>3D 프린팅 캡의 사후 세척 및 UV 경화</td></tr><tr><td>자기 베이스를 가진 관절 암(및 시간; 2)</td><td>하스 툴링</td><td>09-0535</td><td>예전에는 미세하게 잡아; 기록 중 피질 표면에 설치된 ECoG 서브그리드</td></tr><tr><td>인공 뇌척수액(aCSF)</td><td>내부 준비</td><td>해당 없음 (사내 보험)</td><td>aCSF 조제법: 124 mM NaCl, 3 mM KCl, 26 mM NaHCO3, 2 mM CaCl2, 1 mM MgSO4, 1.25 mM KH2PO4<서브>, 10 mM D-포도당; 준비 직후 95% O2 / 5% CO2 산소를 첨가합니다. 카탈로그 번호는 별도로 기재되어 있습니다.</td></tr><tr><td>둔한 미세외과 칼날(원형 메스) & nbsp;</td><td>이오겐</td><td>374769</td><td>두개골 표면 긁기 및 모자 제거에 사용됩니다</td></tr><tr><td>부프레노르핀 (템제식)</td><td>인디비어</td><td>BE-112515</td><td>오피오이드 진통제; 수술 전 0.05 mg/kg s.c.</td></tr><tr><td>C57BL/6JRj 마우스</td><td>잰비에 연구소</td><td></td><td>남성 또는 여성 모두; 최소 10주 이상 생후 상태, 수술 당시 체중 >20g</td></tr><tr><td>염화칼슘 이하이드레이트 (CaCl2 &middot; 2H<서브>2</서브>O)</td><td>시그마-올드리치</td><td>C-7902</td><td>2 mM; 월수 147:02; 0.29 g/L. Ca 및 시간으로 준비; 100 주식. 사내 aCSF의 구성 요소입니다.</td></tr><tr><td>카프로펜 (리마딜)</td><td>조에티스 동물 건강</td><td>RXRIM-INJ&nbsp;</td><td>NSAID 진통제; 수술 전 5 mg/kg S.C.</td></tr><tr><td>코르티코스테론</td><td>시그마-올드리치</td><td>C2505</td><td>21일 만성 스트레스/우울증 모델에서 식수에 용해됨</td></tr><tr><td>면봉</td><td>그리고 nbsp; 피셔브랜드</td><td>그리고 nbsp; 22-363-157&nbsp;</td><td>30G 경막 천자기와 두개골 표면의 아세톤 탈지 처리를 위한 손잡이 역할을 합니다</td></tr><tr><td>시아노아크릴레이트 접착제 및 mdash; 록타이트 401</td><td>헨켈 접착제</td><td>록타이트 401</td><td>얇은 점도의 시아노아크릴레이트; 두개골 표면 프라이밍, 헤드플레이트 및 캡 고정에 사용됩니다</td></tr><tr><td>치과 드릴과 mdash; 포어돔 K.1070</td><td>포어돔</td><td>K.1070</td><td>유연축 회전 드릴; 두개골 절개술 소량 및 파일럿홀 드릴링에 사용됩니다</td></tr><tr><td>덱사메타손</td><td>도파르마</td><td>1DEX004</td><td>코르티코스테로이드 항염증제; 수술 전 2 mg/kg S.C.</td></tr><tr><td>D-포도당</td><td>시그마-올드리치</td><td>G-7021</td><td>10 mM; 월수: 180.20; 1.80 g/L. 포도당 및 시간으로 준비됨; 100 주식. 사내 aCSF의 구성 요소입니다.</td></tr><tr><td>드릴 비트 스틸 버 라운드 1/007W</td><td>헤이거 & 마이징어</td><td>18089</td><td>참조 부위와 두개골 창에 사용됨</td></tr><tr><td>에탄올 80% (v/v) - A12t 디루투스</td><td>베르너</td><td>13221132</td><td>수술 기구와 멸균을 위한 외과용 층층 후드의 수술 전 담임</td></tr><tr><td>가스 배출 장치</td><td>RWD 생명과학</td><td>R546W</td><td>청소부는 수술 부위에서 마취 가스를 낭비시킵니다</td></tr><tr><td>금도금 기준 소켓</td><td>디지키</td><td>310-13-102-41-001000</td><td>좌소뇌 위에 이식됨; ECoG 접지/기준 역할을 합니다</td></tr><tr><td>GRANT 초음파 세척기 & 대시; 모델 17002A</td><td>그랜트 악기</td><td>17002A</td><td>이안: 4064343191654. 온수 초음파 목욕; TICKOPUR TR 3와 함께 기기 청소에 사용됩니다</td></tr><tr><td>온열 패드 & 대시도; 슈퍼테크 TMP-5B</td><td>슈퍼테크</td><td>TMP-5B</td><td>체온을 37도 이하로 유지합니다; 마취 내내 C</td></tr><tr><td>이소플루란</td><td>피라말 헬스케어</td><td>66794-017-25</td><td>흡입 마취제; 유도율 4%, 유지 1.5% & Ndash; 2.5%</td></tr><tr><td>Kimtech Science, 정밀 물티슈 (비섬유성 조직)</td><td>킴벌리 클라크</td><td>7552</td><td>뾰족한 끝과 함께 사용해 잔여 ACSF를 건조시키고 PDMS 막이 경막에 부착되도록 돕습니다</td></tr><tr><td>퀵-캐스트 멸균 엘라스토머 실란트</td><td>월드 프리시전 인스트루먼트(WPI)</td><td>쾅-캐스트</td><td>모델: KWIK-CAST-S. 생체 적합성 실리콘; PDMS 막 주변에 탈착 가능한 밀봉을 만드는 데 사용되었습니다.</td></tr><tr><td>LED UV 경화 펜 405nm</td><td>큐어UV</td><td>514424-405</td><td>임플란트 중 자외선 활성화 치아 시멘트(Total C-Ram)를 경화시키는 데 사용됨</td></tr><tr><td>리도카인-에피네프린 용액</td><td>오리온 파마</td><td>05 10 31</td><td>국소 마취; 두피 피부 아래 S.C. 주사</td></tr><tr><td>황산마그네슘 헵타하이드레이트 (MgSO4 &middot; 7H2O)</td><td>시그마-올드리치</td><td>M-7774</td><td>1 mM; 월수 246.48시간; 0.25 g/L. Mg 및 시간으로 준비; 100 주식. 사내 aCSF의 구성 요소입니다.</td></tr><tr><td>금속 헤드플레이트와 mdash; 뉴로타르 모델 13</td><td>뉴로타르</td><td>모델 13</td><td>티타늄 헤드플레이트; 직경 11mm의 원형 개구부; 두개골에 시아노아크릴레이트와 치아 시멘트로 부착했다</td></tr><tr><td>뉴로넥서스 헤드스테이지 어댑터 :)</td><td>뉴로넥서스</td><td>커스텀 IH256 64시간 이상; 4 몰렉스&nbsp;</td><td>맞춤형 어댑터 보드; 샌드위치와 마이크로; 두 대의 Intan RHD 128채널 헤드스테이지 사이의 ECoG 서브그리드</td></tr><tr><td>금속 캡이 있는 Neuropixels 1.0 프로브(&times; 2)</td><td>IMEC</td><td>PRB_1_4_0480_1_C</td><td>960개의 녹음 장소; 10mm 샹크. 한 탐침은 해마-시상-시상 기둥을, 다른 하나는 mPFC 기둥을 표적으로 합니다</td></tr><tr><td>NI PXIe-1083 섀시</td><td>내셔널 인스트루멘츠</td><td>PXIe-1083</td><td>9슬롯 PXI Express 섀시, Neuropixels 모듈과 NI DAQ 카드를 수용</td></tr><tr><td>NI PXIe-3839 다기능 입출력 모듈</td><td>내셔널 인스트루멘츠</td><td>PXIe-3839</td><td>NI PXIe-1083 섀시에 장착됨; 동기화 및 보조 I/O에 사용됩니다</td></tr><tr><td>NI PXIe-6363 다기능 DAQ</td><td>내셔널 인스트루멘츠</td><td>PXIe-6363</td><td>NI PXIe-1083 섀시에 장착됨; 동기화를 위한 아날로그 및 디지털 I/O</td></tr><tr><td>노바 마이크로시네레이터 -&nbsp; 적외선 살균기</td><td>아르고스 테크</td><td>S3022</td><td>노출된 뇌 조직에 닿을 수 있는 모든 기구를 신속히 멸균하는 데 사용됩니다</td></tr><tr><td>올림푸스 SZ51 입체 쌍안현미경</td><td>올림포스</td><td>SZ51</td><td>외과적 시각화; 두개골 절개술과 착상 과정 전반에 걸쳐 사용됩니다</td></tr><tr><td>오픈 Ephys 획득 보드 (One Box, 1세대)</td><td>오픈 에피스</td><td>OEPS-9029</td><td>수신 및 마이크로; SPI를 통한 ECoG 데이터 스트림; 오픈 소스 하드웨어. 참고 open-ephys.org</td></tr><tr><td>Ephys GUI 오픈</td><td>오픈 에피스</td><td>해당 없음 (오픈소스)</td><td>무료 오픈소스 전기생리학 획득 소프트웨어입니다. 이용 가능한 곳: open-ephys.org</td></tr><tr><td>염화칼륨(KCl)</td><td>시그마-올드리치</td><td>P-5405</td><td>3 mM; 월수 74시 55분; 0.22 g/L. 사내 aCSF의 구성 요소.</td></tr><tr><td>이수소 인산칼륨 (KH2PO4)</td><td>시그마-올드리치</td><td>P-5655</td><td>1.25 mM; 월수 136.09; 0.17 g/L. 사내 aCSF 성분(클렙스 및 시각; 10 스톡).</td></tr><tr><td>포비돈-요오드 용액(베타딘)</td><td>다케다</td><td>45 70 28</td><td>수술 현장 준비를 위한 국소 소독제</td></tr><tr><td>PXIe 획득 모듈</td><td>뉴로픽셀</td><td>PXIE_1000</td><td>Neuropixels 1.0 데이터 수집용 PXI 포맷 모듈; NI PXIe-1083 섀시에 장착됨</td></tr><tr><td>참조 소켓 커넥터</td><td>디지키</td><td>342-10-102-00-591000</td><td>위의 참조 소켓에 해당하는 맞물림 커넥터; DigiKey로 부품 번호를 확인하세요</td></tr><tr><td>RHD 128채널 헤드스테이지(및 시간; 4)</td><td>인탄 테크놀로지스</td><td>RHD 128</td><td>각 &마이크로 헤드스테이지 두 개; ECoG 서브그리드; 모델 확인(예: RHD2132 또는 RHD2164)</td></tr><tr><td>RHD SPI 인터페이스 케이블, 0.9m</td><td>인탄 테크놀로지스 / 오픈 에피스</td><td>C3203</td><td>오른쪽 헤드스테이지와 오픈 Ephys 획득 박스를 연결하는 표준 SPI 케이블</td></tr><tr><td>후륜구동 에어펌프</td><td>RWD 생명과학</td><td>R510-29</td><td>마취 회로를 통한 공기 흐름 제공</td></tr><tr><td>후륜구동 동물 마취 증기</td><td>RWD 생명과학</td><td>R5835</td><td>마취 유도 및 유지를 위한 정밀 아이소플루란 증기화</td></tr><tr><td>메스 칼날 #11</td><td>스완 모튼</td><td>SM0103</td><td>접착력을 높이기 위해 두개골 표면에 십자형 무늬를 새기는 데 사용됩니다.</td></tr><tr><td>작은 동물 헤어 트리머 - GT416</td><td>아스쿨랍 셰르마시넨 GmbH</td><td>D-98528H</td><td>수술 전 동물 두피 다듬기에 사용됨</td></tr><tr><td>중탄산나트륨 (NaHCO3)</td><td>시그마-올드리치</td><td>S-5761</td><td>26 mM; 월수 84시 01분; 2.18 g/L. 사내 aCSF의 구성 요소.</td></tr><tr><td>염화나트륨(NaCl)</td><td>시그마-올드리치</td><td>S-5886</td><td>124 mM; 월수 58시 44분; 7.25 g/L. 사내 aCSF의 구성 요소.</td></tr><tr><td>SOL-M (멸균 주사기 30G)</td><td>솔-밀레니엄 유럽</td><td>113005</td><td>90도 휘어짐; 끝에 부착하여 면봉에 부착하여 경막 천공 장치를 만듭니다</td></tr><tr><td>표준 매니퓰레이터 암, 3축 왼쪽 (스톨팅)</td><td>스톨팅 컴퍼니</td><td>51604</td><td>녹음 세션 중 뉴로픽셀 프로브 삽입에 사용됩니다</td></tr><tr><td>표준 매니퓰레이터 암, 3축 우측 (스톨팅)</td><td>스톨팅 컴퍼니</td><td>51606</td><td>녹음 세션 중 뉴로픽셀 프로브 삽입에 사용됩니다</td></tr><tr><td>입체정관 프레임 및 mdash; 후륜구동 F67001</td><td>RWD 생명과학</td><td>F67001</td><td>표준 입체 타격 프레임; 머리 안정화 및 좌표 참조 임플란트 삽입에 사용됩니다</td></tr><tr><td>자와 자인 수술용 마커 스킨펜 (바이올렛 잉크)</td><td>패닌</td><td>SM0372</td><td>생체 적합성 겐티안-바이올렛 기반 외과용 피부 표지자를 사용하여 계획된 두개골 절개술과 뼈에 임플란트 발자국을 제시했습니다. 시아노아크릴레이트 프라이밍에 저항하며(록타이트 401), 두개골 탈脂 및 머리 고정 시술을 통해 입체 좌표를 뼈 표면에 신뢰성 있게 전달할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>SYLGARD 184 실리콘 엘라스토머 키트 (PDMS)</td><td>다우 (독일)</td><td>1673921</td><td>폴리디메틸실록산; 얇게 캐스팅 (< 1 mm) 막; 뇌를 보호하기 위해 경막 표면에 놓입니다</td></tr><tr><td>테르가자임 효소 세제</td><td>알코녹스</td><td>1304-1</td><td>프로테아제 기반 세정제는 미지근한 RO 물에 1% 비율(w/v)로 사용되어 세션 후 전극 세척(45분 담근 후 정제수에 3번 헹궈 사용).</td></tr><tr><td>Total C-RAM Automix UV 덴탈 시멘트 (흰색)</td><td>이테나</td><td>R301950</td><td>모델: TTCRAM-BLC. 자외선 경화 가능한 치과용 수지; 헤드플레이트 보강 및 소켓 고정에 사용됩니다</td></tr><tr><td>초음파 세척 용액 (TICKOPUR TR 3)</td><td>&nbsp; Dr. H. Stamm GmbH</td><td>TR-3-913 &nbsp;</td><td>구연산 기반 농축액; 수술 후 기구 세척을 위한 초음파 욕조에 사용됩니다</td></tr><tr><td>비스코티어스 아이 젤 2 mg/g</td><td>알콘</td><td>503849</td><td>카보머 기반 윤활 연고; 마취 중 각막에 적용하여 건조를 방지하는 방법</td></tr><tr><td>자이스 콜드 라이트 소스 KL1500 LCD</td><td>칼 자이스</td><td>KL1500 LCD</td><td>수술 현장을 위한 광섬유 냉조명; 열 손상을 방지합니다</td></tr></tbody></table>

마우스 기본 모드 네트워크의 종단적이고 다중 모드 전기생리학 기록을 가능하게 하는 대형 재밀봉 가능한 두개골 창을 위한 수술 프로토콜

Surgical Protocol for a Large, Resealable Cranial Window Enabling Longitudinal, Multi-Modal Electrophysiology Recordings of Mouse Default Mode Network

The default mode network (DMN) is a central, large-scale brain network implicated in a range of cognitive functions and neuropsychiatric disorders, such ...

surgical-protocol-for-large-resealable-cranial-window-enabling

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

우리는 대규모 다중 단일 단위 기록 및 실리콘 프로브와 설치류 동물 행동은 현지 필드 가능성에 대한 방법을 설명합니다. 드라이브 제조, 드라이브 및 프로브 주입 공정에 프로브 첨부 파일은 쉽게 복제에 대한 충분한 세부 사항에 그림하고 있습니다.

설치류를 행동에 이동 가능한 실리콘 프로브에 의한 뉴런의 대규모 녹화

절차는 뇌파, electromyogram, 그리고 뇌성 젖산 농도를 모니터링하는 동안 optogenetically 뇌성 대뇌 피질의 피라미드 뉴런의 활동을 조작하기위한 설명되어 있습니다. 사람들이 자연 수면 / 웨이크주기를 받아야 동안 실험 녹음 케이블 테 더링 마우스에 수행됩니다. Optogenetic 장비는 우리의 실험실에서 조립, 녹화 장비는 상업적으로 사용할 수 있습니다.

동시 Electroencephalography, 설치류 대뇌 피질의 젖산 농도와 Neuronal 활동 Optogenetic 조작의 실시간 측정

이 방법은 탐색 및 동물의 머리의 확고한 고정을 필요로 미세한 영상 또는 단일 세포 전기 생리학 녹음하는 동안 탐험하는 마우스 유형, 친숙한 환경을 만듭니다.

평면 바닥의 공기 해제 플랫폼 : 새로운 방법이 깨어에 현미경 또는 전기 생리학과 행동을 결합하여 자유롭게 설치류 이동

이 프로토콜은 마우스 대뇌 피질의 시간과 정수리 영역에 걸쳐 큰 일방적 개두술을 만들기위한 방법을 제시한다. 이것은 대뇌 피질 반구의 광대 한 지역에 걸쳐 실시간 영상에 특히 유용합니다.

두뇌 활동의 중규모 넓은 필드 광학 이미징에 대한 큰 측면 개두술 절차

여기에 제시된 것은 깨어 있고 머리가 억제 된 마우스에서 뇌 세포의 종방향 이미징을위한 만성 두개골 창을 이식하기위한 프로토콜입니다.

깨어있는 마우스 에서 반복되는 생체 내 이미징을위한 두개골 창 이식

여기에서는 광 전달을위한 광섬유와 신경 기록을위한 전극 어레이가있는 옵트로드 시스템의 제조 방법을 제시합니다. 채널로돕신-2를 발현하는 트랜스제닉 마우스를 이용한 생체내 실험은 광유전학적 자극 및 전기생리학적 기록을 동시에 위한 시스템의 실현가능성을 보여준다.

동시 광유전학적 변조 및 전기 신경 기록을 위한 광섬유 어레이

밀리미터 크기의 코일과 결합된 저비용 뇌파 기록 시스템은 생체 내에서 마우스 뇌의 경두개 자기 자극을 유도하기 위해 제안되었습니다. 맞춤형의 유연한 다중 전극 어레이 기판이 있는 기존의 나사 전극을 사용하여 경두개 자기 자극에 대한 반응으로 마우스 뇌에서 다중 부위 기록을 수행할 수 있습니다.

생체 내에서 마우스 뇌를 경두개로 자극하기 위해 밀리미터 크기의 코일과 결합된 저비용 뇌파 기록 시스템

우리는 전극 제조를 위한 간단하고 비용 효율적인 접근 방식을 개발했으며 자유롭게 움직이는 마우스에서 여러 영역에 걸쳐 신호를 기록했습니다. 다중 지역 전기 생리학 및 칼슘 신호 기록과 함께 광유전학을 활용하면 발작 점화 모델에서 여러 지역의 신경 활동을 밝힐 수 있었습니다.

Multi-Region In vivo Recording을 위한 유연하고 편리한 전기생리학적 Optrodes를 제작하기 위한 통합 방법

이 프로토콜은 머리가 고정된 마우스의 뇌간에서 생체 내 고밀도 단일 뉴런 기록을 얻는 방법을 설명합니다. 이 접근법은 전신 마취 전과 전신 마취 중에 REM(Rapid Eye Movement) 수면 중에 비활성화된 뇌간 영역인 복외측 수관 주위 회색에서 뉴런의 활동 전위 발화를 측정하기 위해 배포됩니다.

Head-Fixed Mice의 뇌간에서 발생한 급성 단일 단위 다중 전극 기록

이 연구는 돼지 모델에서 반복되는 만성 피질 기록에 대한 확장 가능하고 신뢰할 수 있으며 재현 가능한 방법을 제시합니다. 이 방법은 통증 연구 및 신경 질환 진단을 포함한 다양한 신경 과학 분야에 응용되고 있습니다.

돼지의 마취 중 반복적인 피질 기록을 위한 만성 두개골 창 기술

여기에서는 쥐와 생쥐의 고밀도 마이크로 전기 피질 검사(μEcoG) 기록을 위한 수술, 이식 및 기록 방법을 포함한 두 가지 프로토콜을 제시합니다. μECoG 기록은 쥐의 청각 피질에서 층류 다원(laminar polytrode) 기록 또는 쥐의 체성 감각 피질(somatosensory cortex)에서 신경 활동의 광유전학적 조작과 함께 수행됩니다.

설치류의 미세 전기 피질 조영술과 층류 폴리트로드 및 광유전학을 통합하여 피질 처리의 멀티스케일 조사

학습하세요 마우스 기본 모드 네트워크의 장기간 다중 모드 전기생리학 기록을 위한 재밀봉 가능한 대형 두개골 창 수술법을. 이 방법은 표면 micro-ECoG와 Neuropixels 프로브를 결합하여 1,000개 이상 채널에서 동시 기록을 가능하게 합니다.

마우스 기본 모드 네트워크의 종단적이고 다중 모드 전기생리학 기록을 가능하게 하는 대형 재밀봉 가능한 두개골 창을 위한 수술 프로토콜

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