Inleiding tot serologische pipetten en pipetters

De serologische pipetten zijn een bijna alomtegenwoordig laboratoriuminstrument dat wordt gebruikt voor het overbrengen van milliliter hoeveelheden vloeistof. Serologische pipetten hebben meestal verdelingen langs de zijkanten voor het meten van de hoeveelheid vloeistof die wordt aangezogen of afgegeven.

Deze instrumenten worden meestal gebruikt met een pipettendispenser, die de vloeistofdoverdracht vergemakkelijkt door het creëren van een gedeeltelijk vacuüm. Dezelfde pipettendispenser kan worden gebruikt met verschillende serologische pipettengrootten, afhankelijk van de hoeveelheid volume die u wilt overbrengen.

Serologische pipetten zijn doorgaans van plastic, steriel en wegwerpbaar of van glas, sterieel en herbruikbaar.

Alle serologische pipetten vereisen het gebruik van een pipettendispenser voor het overbrengen van vloeistoffen.

De pipettendispenser maakt het niet nodig dat een onderzoeker de oude techniek van mondeling pipetteren uitvoert. Deze primitieve methode voor het overbrengen van vloeistoffen wordt niet aanbevolen, omdat het ertoe kan leiden dat vloeistof in de mondholte terechtkomt en ernstige nadelige bijwerkingen kan veroorzaken.

Een type dispenser, de pipettenbalg, biedt de minste nauwkeurigheid en wordt over het algemeen gebruikt met glazen serologische pipetten voor het overbrengen van niet-specifieke hoeveelheden vloeistof.

De pipettenpomp wordt ook gebruikt met glazen pipetten en maakt een nauwkeuriger regeling van het vloeistofvolume mogelijk. Pipettenpompen zijn bijzonder nuttig voor het afgeven van herhaalde volumes oplossing.

De pipet-aid is het meest gebruikelijke type pipettendispenser. Het bestaat uit verschillende belangrijke componenten: de neuskegel is de plaats waar de pipet aan de dispenser wordt bevestigd en waar de filter – die de binnenkant van de pipet-aid beschermt tegen vloeistof en de steriliteit handhaaft - zich bevindt.

Op de hendel van de pipet-aid zijn twee bedieningsorganen te vinden; de bovenste bediening wordt ingedrukt voor het aanzuigen van vloeistoffen, de onderste voor het afgeven.

Vaak worden pipet-aids geleverd met instellingen die de snelheid waarmee vloeistof wordt afgegeven, regelen. Het instrument kan bijvoorbeeld worden ingesteld om vloeistof af te geven met behulp van perslucht, in een uitblazende stand, en zonder kracht, in een zwaartekrachtstand.

Hoewel sommige pipet-aids over snoeren beschikken, zijn de meeste op batterijen gebaseerd.

Sommige pipet-aids zijn uitgerust met een standaard die aan de hendel kan worden bevestigd, waardoor de pipet-aid op zijn zij kan worden geplaatst zonder de pipet te hoeven verwijderen.

Zoals gezegd, verschillende maten serologische pipetten kunnen worden gebruikt met dezelfde pipettendispenser, afhankelijk van het volume vloeistof dat wordt overgebracht, van zo weinig als een tiende milliliter tot tientallen milliliters.

Selecteer eerst de pipet van de juiste grootte voor het volume dat u wilt overbrengen. Open vervolgens de verpakking aan de bovenkant en bevestig de pipet aan de dispenser voordat u de rest van de verpakking verwijdert, waarbij u de pipet alleen boven de verdelingsmerken aanraakt.

Houd de pipetdispenser met één hand vast, verwijder de dop van de vloeistof die u wilt aanzuigen. Houd de pipet vervolgens verticaal en druk voorzichtig op de bovenste bediening om uw monster langzaam aan te zuigen.

Gebruik de verdelingsmerken langs de zijkant van de pipet om het volume te meten dat u zult overbrengen. Let op dat het volume wordt afgelezen bij de verdeling langs de onderkant van de meniscus, niet bij de bovenkant van de vloeistof.

Spuit nu de vloeistof voorzichtig in uw geselecteerde recipiënt zonder de punt van de pipet aan te raken aan niet-steriele oppervlakken.

Wees voorzichtig en gebruik zachte druk bij het aanzuigen van vloeistoffen, vooral bij het gebruik van kleinere volume serologische pipetten om te voorkomen dat de filter en het monster worden verontreinigd of de pipet-aid wordt beschadigd. Als u geen voorzichtigheid in acht neemt bij het bedienen van een pipet-aid, zult u ergerde veel ervaren leden van het laboratorium die dit instrument mogelijk moeten demonteren en repareren. Bij het aanzuigen van grotere volumes en bij het afgeven kan een stevigere druk op de bediening worden gebruikt voor een snellere overbrenging van de oplossing.

Zorg er ten slotte voor dat u de pipet op de juiste manier weggooit nadat u klaar bent met het overbrengen van de vloeistof.

Nu u weet hoe u een serologische pipet bedient, laten we eens nader bekijken wat enkele veelvoorkomende laboratoriumtoepassingen zijn.

Een gelijkmatige verdeling van cellen in een oplossing is een belangrijke stap bij het beplaten of cultiveren van cellen. Gebruik een serologische pipet voor het voorzichtig en effectief mengen van celsuspensies, evenals voor het mengen van chemische oplossingen en reagentia.

Na isolatie of behandeling van experimentele celculturen kunnen serologische pipetten nuttig zijn voor het overbrengen van hele kolonies cellen voor expansie of verdere experimentele analyse.

Een andere veelvoorkomende toepassing van serologische pipetten is het zorgvuldige stapelen van reagentia voor de creatie van dichtheidsgradienten zoals een ficoll-gradiënt, die wordt gebruikt om cellen uit bloedplasma te zuiveren.

Je hebt zojuist de JoVE-introductie van serologische pipetten bekeken.

In deze video hebben we besproken: wat een serologische pipet is en wanneer het wordt gebruikt, hoe een pipet-aid helpt bij het aanzuigen en afgeven van milliliter hoeveelheden vloeistof, en enkele verschillende toepassingen van je serologische pipet. Bedankt voor het kijken en onthoud de gevaren van mondeling pipetteren!