Inleiding tot serologische pipetten en pipetteurs

De serologische pipette is een vrijwel alomtegenwoordig laboratoriuminstrument dat wordt gebruikt voor het overbrengen van vloeistofvolumes in milliliters. Serologische pipetten hebben doorgaans schaalverdelingen langs de zijden om de hoeveelheid vloeistof te meten die wordt opgezogen of gedoseerd.

Deze instrumenten worden meestal gebruikt in combinatie met een pipetdispenser, die de vloeistofoverdracht faciliteert door het creëren van een gedeeltig vacuüm. Dezelfde pipetdispenser kan worden gebruikt met verschillende formaten serologische pipetten, afhankelijk van het volume dat u wilt overbrengen.

Serologische pipetten zijn doorgaans ofwel van plastic, steriel en wegwerpbaar, of van glas, steriliseerbaar en herbruikbaar.

Voor alle serologische pipetten is een pipetdispenser vereist voor het overbrengen van vloeistoffen.

De pipetdispenser maakt het overbodig dat een onderzoeker de verouderde techniek van het mondpipetteren toepast. Deze primitieve methode voor het overbrengen van vloeistoffen wordt niet aanbevolen, omdat vloeistof in de mondholte kan terechtkomen, wat ernstige ongewenste bijwerkingen kan veroorzaken.

Eén type dispenser, de pipetbulb, biedt de minste nauwkeurigheid en wordt over het algemeen gebruikt met glazen serologische pipetten om niet-specifieke volumes vloeistof over te brengen.

De pipetpomp wordt ook gebruikt met glazen pipetten en maakt een preciezere regulering van het vloeistofvolume mogelijk. Pipetpompen zijn bijzonder handig voor het dispenseren van herhaalde volumes van een oplossing.

De pipet-aid is het meest voorkomende type pipetdispenser. Deze bestaat uit verschillende belangrijke componenten: de neuskegel is de plek waar de pipet wordt bevestigd en waar ook het filter is geplaatst, dat de binnenzijde van de pipet-aid beschermt tegen vloeistoffen en de steriliteit waarborgt.

Op het handvat van de pipet-aid bevinden zich twee knoppen; de bovenste knop wordt ingedrukt voor het aspireren van vloeistoffen, de onderste voor het dispenseren.

Vaak zijn pipet-aids uitgerust met instellingen die de snelheid regelen waarmee de vloeistof wordt gedispergeerd. Het instrument kan bijvoorbeeld worden ingesteld om vloeistof te dispenseren met behulp van geforceerde lucht, in een blow-out stand, of zonder kracht, in een zwaartekrachtstand.

Hoewel sommige pipet-aids een snoer hebben, werken de meeste op batterijen.

Sommige pipet-aids zijn uitgerust met een standaard die aan het handvat wordt bevestigd, waardoor de pipet-aid op zijn zij kan rusten zonder dat de pipet verwijderd hoeft te worden.

Zoals vermeld kunnen verschillende maten serologische pipetten worden gebruikt met dezelfde pipetdispenser, afhankelijk van het volume vloeistof dat wordt overgebracht, variërend van een tiende van een milliliter tot tientallen milliliters.

Selecteer eerst de pipet met de juiste maat voor het volume dat u wilt overbrengen. Open vervolgens de verpakking aan de bovenkant en bevestig de pipet aan de dispenser voordat u de rest van de verpakking verwijdert, waarbij u de pipet alleen boven de maatstreepjes vastpakt.

Verwijder daarna, terwijl u de pipetdispenser in één hand houdt, de dop van de vloeistof die u wilt opzuigen. Houd de pipet verticaal en druk voorzichtig de bovenste trekker in om uw monster langzaam op te zuigen.

Gebruik de maatstreepjes aan de zijkant van de pipet om het volume te meten dat u zult overbrengen. Let op dat het volume wordt afgelezen bij de maatstreep langs de onderkant van de meniscus, niet aan de bovenkant van de vloeistof.

Dispenseer de vloeistof nu voorzichtig in het door u gekozen opvangvat, zonder dat de punt van de pipet niet-steriele oppervlakken raakt.

Oefen voorzichtig druk uit bij het opzuigen van vloeistoffen, vooral bij het gebruik van serologische pipetten met een kleiner volume, om contaminatie van het filter en het monster of beschadiging van de pipet-aid te voorkomen. Wanneer er niet zorgvuldig met een pipet-aid wordt gewerkt, kan dit leiden tot ernstige irritatie bij meer ervaren lableden die het instrument mogelijk moeten demonteren en repareren. Bij het opzuigen van grotere volumes en bij het dispenseren kan een stevigere druk op de trekker worden uitgeoefend voor een snellere overdracht van de oplossing.

Vergeet tenslotte niet de pipet op de juiste wijze weg te gooien nadat u klaar bent met het overbrengen van de vloeistof.

Nu u weet hoe u een serologische pipet moet bedienen, kijken we eens dichter naar enkele veelvoorkomende laboratoriumtoepassingen.

Het gelijkmatig verdelen van cellen in een oplossing is een belangrijke stap bij het uitplaten of kweken van cellen. Gebruik serologische pipetten voor het voorzichtig en effectief mengen van cel-suspensies, evenals voor het mengen van chemische oplossingen en reagentia.

Na isolatie of behandeling van experimentele celculturen kunnen serologische pipetten nuttig zijn voor het overbrengen van volledige celkolonies voor expansie of verdere experimentele analyse.

Een ander veelvoorkomend gebruik van serologische pipetten is het zorgvuldig in lagen aanbrengen van reagentia voor het creëren van dichtheidsgradiënten, zoals een ficoll-gradiënt, die wordt gebruikt om cellen uit bloedplasma te zuiveren.

U heeft zojuist de JoVE-introductie over serologische pipetten bekeken.

In deze video hebben we besproken: wat een serologische pipette is en wanneer deze wordt gebruikt, hoe een pipet-aid helpt bij het opzuigen en dispenseren van milliliters volumes vloeistof, en enkele verschillende toepassingen van uw serologische pipette. Bedankt voor het kijken en vergeet alsjeblieft de gevaren van mondpipetteren niet!