1. Scruffing
Os ratos são mais frequentemente contidos usando a técnica de escrúpulos, mas ratos jovens também podem ser contidos com este método. Ratos adultos são mais difíceis de conter com essa técnica devido a um pescoço mais muscular, uma quantidade reduzida de pele solta e uma aversão a este método.

Figura 1: Método de contenção com uma mão e duas mãos para ratos
2. Luvas
Há uma variedade de luvas disponíveis para os manipuladores usarem para proteção contra mordidas de ratos. Eles geralmente são inadequados para o trabalho com ratos devido à perda de destreza. Muitas vezes, as desvantagens de muitos tipos de luvas superam as vantagens.
3. Contenção corporal

Figura 2: T-rex aderência e método de cruzamento de membros dianteiros para conter ratos
4. Dispositivos de contenção

Figura 3: Dispositivo de contenção estilo Broome

Figura 4: Cabente de roedor de fundo plano

Figura 5: Dispositivo de contenção do tubo

Figura 6: Contenção flexível
5. Métodos de contenção para procedimentos técnicos específicos
Fonte: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidade de Notre Dame, IN
Foi demonstrado que mesmo o manuseio mínimo de ratos e ratos é estressante para os animais. O manuseio para troca de gaiolas e outros procedimentos não invasivos causa um aumento na frequência cardíaca, pressão arterial e outros parâmetros fisiológicos, como os níveis de corticosterona sérica. As flutuações podem continuar por até várias horas. Os métodos de contenção necessários para injeções e retiradas de sangue também causam alterações fisiológicas que podem afetar potencialmente os dados científicos. O treinamento no manejo adequado de ratos e ratos é necessário para minimizar os efeitos aos animais. 1 Ratos e ratos podem ser contidos manualmente com dispositivos de contenção, ou com agentes químicos. Os métodos manuais e o uso de dispositivos de contenção são abordados neste manuscrito. Todos os métodos de contenção incluem o processo de retirada dos animais de sua gaiola doméstica.
1. Scruffing
Os ratos são mais frequentemente contidos usando a técnica de escrúpulos, mas ratos jovens também podem ser contidos com este método. Ratos adultos são mais difíceis de conter com essa técnica devido a um pescoço mais muscular, uma quantidade reduzida de pele solta e uma aversão a este método.

Figura 1: Método de contenção com uma mão e duas mãos para ratos
2. Luvas
Há uma variedade de luvas disponíveis para os manipuladores usarem para proteção contra mordidas de ratos. Eles geralmente são inadequados para o trabalho com ratos devido à perda de destreza. Muitas vezes, as desvantagens de muitos tipos de luvas superam as vantagens.
3. Contenção corporal

Figura 2: T-rex aderência e método de cruzamento de membros dianteiros para conter ratos
4. Dispositivos de contenção

Figura 3: Dispositivo de contenção estilo Broome

Figura 4: Cabente de roedor de fundo plano

Figura 5: Dispositivo de contenção do tubo

Figura 6: Contenção flexível
5. Métodos de contenção para procedimentos técnicos específicos
Os roedores são organismos modelo amplamente utilizados para investigar diversas questões científicas, e foi demonstrado que mesmo o manuseio mínimo é estressante para esses animais.
O manuseio de tarefas simples, como troca de gaiola, pode causar um aumento na frequência cardíaca, pressão arterial e níveis séricos de corticosterona, e essas flutuações podem continuar por várias horas. Os métodos de contenção necessários para procedimentos comuns de injeção e retirada de sangue também podem causar alterações fisiológicas, o que pode afetar potencialmente os dados científicos. Portanto, o treinamento para o manuseio adequado de camundongos e ratos é necessário para minimizar esses efeitos nos animais.
Neste vídeo, primeiro revisaremos as técnicas básicas para lidar com roedores e, em seguida, discutiremos os procedimentos de contenção de roedores, incluindo técnicas manuais e métodos que envolvem o uso de dispositivos de contenção.
Vamos começar discutindo os fundamentos do manuseio de roedores. Um dos métodos mais comuns para mover um camundongo ou rato adulto é levantar o animal pela cauda. Ao fazer isso, é imperativo que a cauda seja agarrada na base perto da garupa. Se o animal for levantado pela ponta da cauda, a pele pode ser arrancada devido ao peso corporal e pode levar a uma lesão resultando na amputação da cauda. É importante ressaltar que mover um animal de um lugar para outro deve ser feito de forma rápida e constante. Suspender o animal no ar por qualquer período de tempo não apenas causará angústia, mas também fará com que o animal se torça ou lute, possivelmente causando danos à cauda. Além disso, o condutor não deve colocar a mão sob o animal, pois ele pode tentar agarrá-lo por segurança, resultando em uma mordida.
Outro método para lidar com roedores adultos é usar fórceps. Os tipos de fórceps comumente usados são pinças de curativo longo ou pinças de língua com tubos de borracha, plástico ou silicone colocados sobre as extremidades para fornecer uma almofada. A pinça pode agarrar o mouse pela nuca ou pela base da cauda. O uso de fórceps minimiza a contaminação cruzada de animal para animal e é mais rápido e menos caro do que trocar as luvas entre cada gaiola de animal. Os iniciantes precisarão ser treinados sobre como segurar os ratos com força, especialmente na nuca, pois isso pode interferir na respiração. Ao usar a pinça na cauda, deve-se tomar cuidado para colocar a pinça perto da base da cauda para evitar ferimentos. Lembre-se de armazená-los virados para baixo em etanol 70% entre o manuseio de diferentes grupos de animais.
Além disso, pode-se usar tubos feitos de um material não poroso para transferir animais. Esses tubos podem ser adicionados a uma gaiola como um local para o animal se abrigar ou buscar refúgio seguro. A maioria dos camundongos ou ratos entraria de bom grado nos tubos quando sua gaiola fosse aberta, ou eles podem ser facilmente guiados para dentro do tubo. Quando o animal estiver dentro, cubra as pontas abertas com a palma da mão e os dedos. Em seguida, para encorajar o animal a sair, incline suavemente o tubo para cima na nova gaiola. Os animais são facilmente condicionados a esse método de troca de gaiola, tornando este um processo rápido e fácil para mover animais de um lugar para outro.
Algumas instituições preferem que os animais - especialmente os ratos - sejam levantados pelo corpo, mesmo durante o manuseio de rotina. Ratos adultos são gentilmente agarrados ao redor do tórax, levantados e rapidamente colocados em outra gaiola. É importante que os animais estejam habituados a este método de manuseio desde tenra idade. Ao trabalhar com ratos jovens, colocar a mão sobre as costas do rato fará com que ele pule na palma da mão do manipulador, permitindo que seja agarrado. Uma segunda mão pode ser necessária para evitar que o rato se contorça com o aperto.
Ao trocar de gaiola com camundongos ou ratos recém-nascidos, muitas vezes é necessário removê-los, mantendo o ninho intacto. Use as duas mãos para colher o ninho e os filhotes do fundo da gaiola para uma nova gaiola. Mantenha os dedos juntos para evitar deixar cair os filhotes. Uma vez que o ninho tenha sido movido para uma nova gaiola, é importante verificar se todos os filhotes estão presentes. Alternativamente, uma concha de plástico pode ser usada para mover roedores recém-nascidos em seus ninhos. Ao fazer isso, é importante que você coloque a mão por cima da concha para evitar que os recém-nascidos se mexam ou pulem. Comparado com o manuseio individual dos filhotes, escavar todo o ninho é menos angustiante tanto para os filhotes quanto para as mães.
Agora que discutimos os fundamentos do manuseio de roedores, vamos nos aprofundar nos procedimentos detalhados para contenção de roedores. Primeiro, descreveremos como conter esses animais manualmente. Camundongos e ratos jovens podem ser contidos usando a técnica de uma ou duas mãos. No entanto, para ratos adultos, a contenção de corpo inteiro usando a pegada de T-rex ou o método cruzado do membro anterior são as técnicas preferidas.
Vamos começar aprendendo o método de contenção com as duas mãos. Primeiro, coloque o animal em uma superfície que ele possa segurar, como a tampa da barra de arame. Com a mão dominante, segure a cauda na base e puxe suavemente o mouse para trás. Isso faz com que o animal se segure na superfície e permita que seu corpo seja esticado. Em seguida, prenda suavemente o roedor com o dedo indicador não dominante e o polegar posicionados na base do crânio e segure a pele solta no pescoço para levantar o animal. Use os dedos restantes para estabilizar o animal com as costas contra a base do polegar. Você pode prender os quartos traseiros prendendo a cauda com o dedo anelar contra a palma da mão.
Para o método de contenção com uma mão, coloque novamente o animal em uma superfície que ele possa segurar. Segure a cauda entre o terceiro e o quarto dedos da mão não dominante e aplique uma tração suave para trás. Com o dedo indicador e o polegar da mesma mão, prenda o roedor sobre os ombros. Deslize suavemente o polegar e o indicador para a frente e segure a pele solta no pescoço e levante o animal. Use o dedo médio para estabilizar o animal ao longo das costas, prendendo a pele dorsal contra a base do polegar.
O terceiro método de contenção que discutiremos é o aperto de T-rex - um método de contenção com as duas mãos para ratos. Primeiro, coloque o rato em uma superfície sólida, como um tapete, que ele possa segurar. Enquanto segura a base da cauda com uma mão, coloque a outra mão sobre o ombro do rato com o indicador e o dedo médio divididos em ambos os lados. Isso é para restringir o movimento da cabeça de um lado para o outro. Assim que a cabeça estiver estabilizada, envolva o corpo atrás das patas dianteiras com os dedos médio e anelar e o polegar. Evite comprimir o peito para que não comprometa a respiração do animal. Finalmente, estabilize a cauda e os quartos traseiros segurando a base da cauda SEM segurar as patas traseiras, se você planeja administrar uma gavagem oral; ou COM segurar as patas traseiras, se a intenção for injetar o animal.
Por fim, para conter um rato usando o método cruzado do membro anterior, coloque o animal em uma superfície que ele possa segurar. Em seguida, com a mão dominante, segure a cauda na base e aplique uma tração suave para trás para que o corpo do animal se alongue. Em seguida, com a outra mão, segure o animal diretamente atrás dos ombros, com os dedos de um lado e o polegar do outro lado do peito, e deslize a mão para a frente. Esse movimento forçará as patas dianteiras do animal a cruzar sob o queixo, criando uma barreira física que impede o animal de mover a cabeça para baixo. Tome cuidado para evitar comprimir o peito, o que levará à dificuldade para respirar.
Agora que revisamos as técnicas de contenção manual, vamos aprender como conter roedores usando dispositivos especializados.
O primeiro dispositivo sobre o qual aprenderemos é o dispositivo de contenção no estilo Broome. Possui uma ranhura que percorre todo o comprimento do dispositivo e um porta-objetivas de plástico, que é inserido para manter o animal no lugar. Comece afrouxando o parafuso para remover o revólver. Em seguida, oriente o tubo de retenção de forma que a fenda fique voltada para cima. Segure o animal pela base da cauda e puxe-o suavemente para dentro do dispositivo de contenção, primeiro os quartos traseiros. Assim que o animal estiver dentro, deslize o revólver de plástico de volta para dentro do tubo para evitar que ele se abra. Coloque o nariz de forma que o nariz do animal fique centralizado na abertura. Não o posicione com tanta força que o animal não consiga respirar.
Outro exemplo de dispositivo de contenção é o limitador de roedores de fundo plano, que é um meio cilindro com aberturas que permitem o acesso pela parte superior e inferior do dispositivo. Ele também possui ranhuras nas quais um portão de plástico rígido pode ser inserido para manter o animal no lugar. Para usar este limitador, segure o roedor pela base da cauda com a mão dominante e coloque-o em uma superfície lisa. Usando a outra mão, segure o tubo de contenção de fundo plano de modo que a extremidade aberta fique na cabeça do animal a 45? ângulo em relação à superfície. Coloque o tubo sobre a cabeça do animal e bata imediatamente na garupa para evitar que o animal recue. Uma vez no dispositivo, deslize o portão de plástico no slot apropriado para proteger a posição do animal.
O terceiro tipo de dispositivo que discutiremos são as restrições de tubo. Estes são cilindros de plexiglass com uma extremidade fechada contendo orifícios para circulação de ar e uma fenda na extremidade aberta. Para usar uma restrição de tubo, segure o animal e coloque-o em uma superfície lisa. Em seguida, coloque a extremidade aberta do tubo na cabeça do animal a 45? ângulo. Assim que o roedor entrar no tubo, bata na garupa para evitar que ele recue. Por fim, oclua a abertura enchendo uma grande luva de látex, que agarrará a superfície do Plexiglass e impedirá que o animal saia do tubo.
Por fim, discutiremos como usar contenções flexíveis, que são cones de plástico flexíveis descartáveis disponíveis em diferentes tamanhos. A seleção de um cone depende do tamanho do animal. Idealmente, deve ser longo o suficiente para se estender de 2 a 3 polegadas além da garupa do animal. Como os métodos anteriores, coloque o animal em uma superfície lisa e coloque o cone de contenção em um 45? ângulo sobre a cabeça do animal. Assim que o animal entrar no cone, segure a extremidade aberta e sele-a para forçar o animal até o fim. Prenda a abertura dobrando o plástico para um lado da cauda e aplicando um clipe de fichário no plástico dobrado, tomando cuidado para evitar prender a cauda ou a pele.
Depois de discutir os fundamentos do manuseio e as diferentes técnicas de contenção, vamos revisar por que ter uma compreensão desses procedimentos é necessário para qualquer cientista in vivo.
O conhecimento e a lógica por trás desses procedimentos básicos de manuseio estão no centro da manutenção da saúde do animal. Desde o momento em que os animais nascem, eles são manuseados para atividades simples do dia-a-dia, como pesagem, inspeção e troca de gaiola, que devem ser realizadas independentemente do objetivo científico.
Os procedimentos de restrição também são úteis para fins de marcação. Por exemplo, para realizar procedimentos como socos na orelha, o animal precisa ser contido por scruffing. Por outro lado, um dispositivo de contenção deve ser usado ao inserir um microchip em ratos para que possam ser marcados permanentemente.
Por fim, os métodos de contenção manual são usados para procedimentos comuns de injeção, como administração subcutânea e intraperitoneal. E o conhecimento dos dispositivos de contenção é útil ao realizar a administração intravenosa, que exige movimento mínimo do animal durante a injeção.
Você acabou de assistir à introdução de JoVE às técnicas básicas de manuseio e contenção para roedores. Esses procedimentos exigem um toque confiante e firme, mas suave. Abordagens provisórias podem resultar em mordidas do manipulador, enquanto o manuseio agressivo pode causar ferimentos ao roedor. Portanto, é importante aprender essas técnicas completamente e encontrar um equilíbrio entre uma pegada assertiva e suave. Como sempre, obrigado por assistir!
O manuseio rotineiro para troca de gaiolas e procedimentos técnicos é motivo de estresse para animais experimentais. Embora esse tipo de estresse não seja uma ameaça ao bem-estar geral do animal, pode causar flutuações nos parâmetros fisiológicos que podem ter um efeito adverso nos dados da pesquisa. O uso de pessoal qualificado, técnicas adequadas e equipamentos pode mitigar parte do estresse.
Chapters in this video
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Overview
1:13
Basics of Rodent Handling
5:09
Manual Restraining Methods
8:37
Rodent Restraint Devices
11:55
Applications
13:02
Summary
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