Um Modelo murino de metástases hepáticas pré-clínica

Resumo

A modelo pré-clínico, murino de metástases hepáticas realizado através de uma técnica de injeção hemispleen.

Resumo

Numerosos modelos murinos foram desenvolvidas para estudar os cancros humanos e avançar o entendimento de tratamento e o desenvolvimento do cancro. Aqui, um modelo pré-clínico, murino tumor pancreático de metástases hepáticas através de uma injecção de células tumorais hemispleen pancreáticos de murino singeneicas é descrito. Este modelo imita muitas das condições clínicas em pacientes com doença metastática para o fígado. Ratos consistentemente desenvolvem metástases no fígado, permitindo a investigação do processo metastático, testes terapia experimental, e a pesquisa da imunologia tumoral.

Introdução

Adenocarcinoma ductal pancreático (PDA) é a quarta principal causa de mortes relacionadas ao câncer nos Estados Unidos ^1. A sobrevida em cinco anos para pacientes com PDA metastático é 2-12% ^1. Embora a quimioterapia adjuvante e neoadjuvante para câncer de pâncreas é mais eficaz do que nunca hoje em dia, ainda há uma necessidade desesperada de novas terapias.

O desenvolvimento de novas terapêuticas necessita de modelos animais pré-clínicos fidedignos. Embora os modelos de tumores subcutâneos são simples de utilizar, desvantagens incluem a incapacidade destes tumores e a metástase imitar a progressão do tumor e microa....

Protocolo

Todos os experimentos com animais conformados com as orientações do Comitê de Cuidados e Uso da Universidade Johns Hopkins animal, e os animais foram mantidos de acordo com as diretrizes da Associação para a Avaliação e Acreditação do Laboratório de Cuidados (AAALAC). O procedimento cirúrgico é realizado sob condições estéreis, numa sala de operações, que passa por um mínimo de quinze trocas de ar por hora. Todos os instrumentos são esterilizados em autoclave antes do procedimento e novamente com etanol a 70%, entre cada um dos ratinhos durante o procedimento. Todos os ratos que não se espera para sobreviver ao procedimento cirúrgico são sacrificados sob CO ₂

Resultados

Células tumorais Panc02 injetados na hemispleen (Figura 1) formar metástases hepáticas em 100% dos ratos, enquanto metástases pulmonares e peritoneal não são observados se a técnica é realizada corretamente. Esta técnica foi realizada em mais de cem ratos usando células Panc02 em vários experimentos independentes, e reprodutível, todos os ratos não tratados morrem com metástases hepáticas entre 30 e 60 dias após o procedimento hemiesplenectomia (Figura 2). Para obter significância estat.......

Discussão

Este modelo murino pré-clínico de metástase do câncer pancreático para o fígado através de uma técnica de injeção hemispleen é o primeiro modelo descrito que espelha muitas das condições clínicas e imunológicas de pacientes com doença metastática para o fígado. Este modelo apresenta várias vantagens em relação aos outros modelos de murino. Em primeiro lugar, ao contrário dos modelos transgénicos de cancro pancreático, em que apenas 30% dos ratinhos desenvolvem metástases do fígado e a temporização de formação de metásta.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Os meios e componentes			celular variam dependendo da linha celular
Fosfato Tampolado Salino	Gibco da Life Technologies	10010-023
Tubos de centrífuga de 15 ml Corning		430052
Tesoura de Operação Curva	Roboz Surgical Store	RS-6835
Micro Dissecing Graefe Forceps	Roboz Surgical Store	Porta-agulha RS-5130
(regular)	World Precision Instruments, Inc
Sutura			cortesia do departamento de cirurgia, Aplicador de
Clipe de Ligação Aberto Weck Horizon da Johns Hopkins, pequeno, angulado	Aplicador de Clipe de Ligação Aberto Teleflex	137085
Horizon, médio, angular	Teleflex	237115
Clipes de ligação médios Weck Horizon	Teleflex	002200
Clipes de ligação pequenos Weck Horizon	Teleflex	001200
Seringa, 1 cc, seringa de tb, ponta deslizante de 3/8"	Seringa Becton Dickinson	309625
, seringa de 1 cc, tb, ponta deslizante de 5/8"	Becton Dickinson	309597
aplicador de clipe automático de 9 mm	Mikron	427630
427631		Autoclip	Becton Dickinson
	Sunbeam	CAT93
70% Etanol			vendido por vários fornecedores
Cloridrato de Cetamina	Hospira	22395DD
	Sigma	X1251

de cultura 3-0 ou 4-0 Almofada de aquecimento de de 9 mmCloridrato de xilazina