December 16th, 2010
Aqui vamos descrever um ensaio de comportamento de roedores que podem detectar a recuperação da função forelimb proximal e distal incluindo movimentos dígito durante um comportamento que ocorre naturalmente e não requer treinamento extensivo ou privação para aumentar a motivação.
Este vídeo demonstra a escala de membros de queda de Irvine Bates e Bresnahan ou IBB, que pode detectar a recuperação da função de queda proximal e distal. Os ratos são primeiro adaptados ao ambiente de teste e observados após C seis SC unilateral. Os animais são então registrados enquanto comem dois cereais de formatos diferentes de tamanho consistente.
Os vídeos são usados para avaliar características de uso caído, como posição articular, suporte de objeto, movimento de dedos e técnica de preensão, e a presença de diferentes características comportamentais é registrada na folha de pontuação do IBB. O IBB mostra um padrão consistente de recuperação que é sensível à gravidade da lesão. Além disso, a escala IBB pode ser usada para avaliar a recuperação após outros tipos de lesão que afetam a função normal da queda.
Embora existam vários ensaios comportamentais que são sensíveis a diferentes aspectos da recuperação de quatro membros e modelos experimentais de lesão medular cervical. Poucas técnicas fornecem informações detalhadas sobre a recuperação do controle motor fino e do movimento dos dígitos. Este método pode ajudar a responder a questões-chave sobre a recuperação de lesões na medula espinhal, como o papel de tratos axonais específicos no retorno da função proximal e distal dos membros inimigos.
Por exemplo, o trato rubroespinhal ou o trato corticoespinhal. As implicações desta técnica se estendem à terapia de humanos. A maioria das lesões da medula espinhal humana ocorre no nível cervical.
Além disso, uma prioridade fundamental para pacientes com lesão medular cervical é a restauração da função da mão e do braço. Assim, são necessárias medidas de resultado que avaliem as funções proximais e distais dos membros anteriores. Embora esse método possa fornecer informações sobre a recuperação do membro anterior após a lesão da medula espinhal, ele também pode ser aplicado a outros tipos de lesão que afetam as funções normais do membro anterior, como acidente vascular cerebral ou neuropatias periféricas.
Indivíduos novos neste método podem ter dificuldade devido ao número de características comportamentais que são solicitados a avaliar enquanto o rato está comendo. Tivemos a ideia desse método pela primeira vez quando estávamos observando os ratos comerem durante a recuperação após uma lesão na medula espinhal. Este método baseia-se em trabalhos anteriores de outros investigadores, incluindo Ian Wisha e seus colaboradores.
A demonstração visual desse método é crítica, pois as características comportamentais do movimento dos membros ocorrem muito rapidamente e, portanto, exemplos em vídeo dos comportamentos que são pontuados ou necessários para treinar os observadores na técnica. Os animais devem ser expostos ao cheiro e sabor do cereal assim que chegarem ao biotério para que possam se acostumar a comer esse alimento. Os animais devem também ser adaptados ao ambiente de ensaio.
Um cilindro de perspex ou plexiglass coloca alguns pedaços de cereal no cilindro no chão antes de colocar o rato dentro dele. Escovar, urinar, defecar e pular em excesso são indicadores de que o animal está estressado e é necessário mais tempo para a aclimatação. Uma vez que o animal esteja bem adaptado ao ambiente de teste, o próximo passo envolve a gravação de vídeo dos animais comendo o cereal durante as filmagens.
É melhor segurar a câmera de vídeo, pois o animal provavelmente mudará de posição durante a alimentação. Filme o animal comendo um pedaço de cereal esférico inteiro e um em forma de rosquinha, pois os movimentos necessários variam entre as formas e a melhor avaliação envolve a observação de ambas as sequências. Colete os dados de cada peça moldada separadamente em uma folha de pontuação e, em seguida, combine as pontuações para criar uma pontuação geral para aquele rato naquele dia após a lesão.
Agora vamos ver algumas dicas para avaliar os vídeos. A avaliação da função de queda do animal deve começar assim que o animal começar a comer o cereal e parar assim que o pedaço de cereal for comido. As avaliações só devem ser feitas com cereais esféricos e em forma de rosquinha que sejam de tamanho e forma consistentes antes do início da alimentação.
Os animais não devem ser pontuados ao comer pedaços de cereais quebrados Antes de testar para avaliação, é altamente recomendável que a velocidade dos vídeos seja reduzida para pelo menos metade da velocidade original, pois mesmo quando os ratos feridos podem comer rapidamente e a incidência de comportamentos-chave pode ser perdida. Isso pode ser alcançado em programas como QuickTime e Windows media player enquanto observa o animal. Use a folha de pontuação IBB para observar a presença das seguintes características comportamentais, que descreveremos agora.
O rato é avaliado quanto à posição predominante do cotovelo, que é a posição mais comum assumida pelo cotovelo durante a fase de alimentação, ocorrendo mais de 50% do tempo estendido onde o cotovelo é mantido reto com um ângulo de mais de 160 graus parcialmente flexionado onde o cotovelo é flexionado com um ângulo inferior a 160 graus, mas mais de 90 graus totalmente flexionados onde o cotovelo é flexionado com um ângulo inferior a 90 graus. O rato é avaliado quanto a movimentos de queda proximal, que são movimentos feitos pelo ombro e/ou cotovelo do membro de queda prejudicado. Os movimentos podem ou não resultar em contato do membro de queda com o serial nenhum onde não há movimentos de ombro e/ou cotovelo do membro de queda prejudicado leve onde há movimentos através de menos de um terço, a amplitude do ombro e/ou articulação do cotovelo contrações e encolher de ombros se enquadram nesta categoria extensa onde os movimentos são mais da metade da amplitude do ombro e/ou articulação do cotovelo.
No início da recuperação, esses movimentos podem ser numerosos e erráticos. O rato é avaliado por sua capacidade de usar a superfície não volla do membro prejudicado para estabilizar o pedaço de cereal. Ao fazer isso, o rato está mantendo-o em posição de ajudar a comer.
As áreas do membro que podem atuar como suportes são o antebraço acima do punho, o pulso ou a parte de trás dos dedos, nenhuma, onde não há suporte não VLA pelo for durante a fase de alimentação. Alguns em que o suporte não-A do objeto ocorre durante a fase de alimentação, mas nem sempre e quase sempre onde o suporte não VOA do objeto ocorre quase sempre ou sempre durante a fase de alimentação. 95 a 100% das vezes o rato é avaliado quanto à posição predominante de fopo, que é a posição assumida pelos dedos em mais de 50% das vezes durante a alimentação com bateras, fixas e flexionadas, onde os dedos são flexionados e mantidos em punho com ângulos articulares de cerca de 90 graus.
Estendido não adaptável onde os dígitos são estendidos com um ângulo maior ou igual a 160 graus e não estão em conformidade com a forma do objeto segurado parcialmente flexionado adaptável, onde os dígitos são parcialmente flexionados e estão em conformidade com a forma do objeto. O rato é avaliado quanto ao suporte de vola de contato, que é sua capacidade de usar a superfície vola do fopo prejudicado para estabilizar a peça serial e, ao fazê-lo, mantê-la em posição de ajudar a comer nenhum onde não haja suporte com a superfície vola do PO durante a alimentação ou menos de 5% do tempo. Alguns onde o suporte do objeto com uma superfície vola do para derramar ocorre durante a alimentação, mas nem sempre ou menos de 95% do tempo, e quase sempre o suporte do objeto com a superfície vola do fopo ocorre quase sempre ou sempre durante a alimentação, ou 95 a 100% do tempo.
O rato é avaliado quanto à presença de movimentos do punho do poro prejudicado durante a alimentação. Uma vez estabelecido o suporte vola, os movimentos dos riscos que ocorrem na ausência de contato entre o prejudicado para PO e o seriado não são pontuados. Esses movimentos pontuados podem ocorrer em qualquer direção.
Por exemplo, na direção dorsal para ventral ou medial para lateral, as pontuações possíveis incluem sim ou não. É necessário um mínimo de um movimento do pulso para que o rato seja contado como sim para esse comportamento. O rato é avaliado quanto a movimentos feitos pelo membro anterior prejudicado que são sincronizados com movimentos manipulatórios bem-sucedidos do membro anterior não prejudicado e que contribuem para a manipulação adequada do serial.
Nenhum onde não há ajustes seriais feitos pelo membro caído prejudicado exagerado onde há movimentos do ombro e/ou cotovelo e/ou punho do membro prejudicado que produzem uma perda completa de contato entre o fopo e o serial. Essas incidências são breves e geralmente ocorrem pouco antes de movimentos manipulatórios bem-sucedidos da série com a superfície vol do fopo sutil prejudicado, onde há movimentos do ombro e/ou cotovelo e/ou punho do membro caído prejudicado que ocorrem sem perda de contato entre o fopo e o cereal durante a alimentação, O rato é avaliado quanto à presença de movimentos feitos pelos dedos individuais durante a alimentação. Esses movimentos podem ser sem contato ou manipulatórios de contato para movimento sem contato.
Ocorrem movimentos dos dígitos, mas não resultam em contato com a série para movimentos manipulatórios de contato. Ocorrem movimentos dos dígitos que resultam em contato vola do dedo com o objeto e, ao fazê-lo, contribuem para a manipulação da série possíveis pontuações incluem simplesmente sim ou não. O rato é avaliado quanto à técnica de preensão mais comum usada durante a fase de alimentação, que ocorre mais de 50% das vezes.
Existem vários métodos de preensão, mas os mais comuns são o piner, o gancho e toda a preensão. As técnicas de preensão usadas pelo rato são estereotipadas, dependendo do tamanho e da forma da peça serial. Os escores possíveis incluem anormal, onde há uso consistente de um método alternativo de preensão ao método usado antes da lesão para apoiar e controlar o pedaço de cereal durante a fase de alimentação, às vezes normal, onde há uso inconsistente do método de preensão usado antes da lesão para apoiar e controlar o pedaço de cereal durante a fase de alimentação e quase sempre normal.
Onde há uso consistente do método de preensão usado antes da lesão para apoiar e controlar a peça serial durante a fase de alimentação. Uma vez que a filmagem dominada possa ser feita em cinco a 10 minutos, a avaliação e a pontuação exigirão um pouco mais de tempo devido à necessidade de reduzir a velocidade do vídeo e, ocasionalmente, reexaminar comportamentos ambíguos. Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de filmar o rato comendo um pedaço completo de cereal e filmar de perto e em foco para permitir que o rato seja julgado com precisão Após este procedimento, a análise histológica do local da lesão pode ser realizada para responder a perguntas adicionais, como quais axônios ou quais populações de células neuronais são importantes para o retorno de características-chave dos movimentos após seu desenvolvimento.
Esta técnica ajudará os pesquisadores no campo da lesão da medula espinhal a explorar a recuperação proximal e distal dos membros anteriores e roedores e relacioná-la com a recuperação em primatas e pessoas. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como treinar os animais para comer no ambiente de teste enquanto eles estão sendo filmados para identificar as diferentes características comportamentais e anotá-las usando a folha de pontuação IBB e, em seguida, ser capaz de atribuir uma pontuação.
Este artigo descreve um ensaio comportamental de roedores, a escala de queda dos membros de Irvine Bates e Bresnahan (IBB), que detecta a recuperação da função dos membros anteriores proximais e distais durante um comportamento natural. O método requer treinamento mínimo e avalia o controle motor fino e os movimentos dos dedos em ratos após lesão medular.