Indução de Enterocolite Necrosante em Modelo Enteróide Epitelial Humano

Obtenha criptas derivadas do tecido do intestino delgado humano - invaginações tubulares contendo células-tronco e vários tipos de células epiteliais.

Adicione as criptas intestinais em uma matriz de porão gelada.

Transfira essa mistura para uma placa multipoços, criando uma cúpula tridimensional.

Adicione o meio de crescimento e incube.

As células-tronco se auto-organizam, proliferam e se diferenciam em vários tipos de células intestinais, formando enterosferas.

Com o tempo, as enterosferas amadurecem em enteróides - estruturas tridimensionais auto-renovadoras, semelhantes às criptas intestinais.

Adicione lipopolissacarídeos, ou LPS, uma endotoxina bacteriana, no poço contendo enteróides e incuba.

As moléculas de LPS se ligam ao receptor toll-like no enteróide, iniciando uma resposta pró-inflamatória, resultando no acúmulo de espécies reativas de oxigênio. Isso desencadeia uma cascata de eventos que levam à apoptose.

Consequentemente, a integridade do enteroide é comprometida, levando à penetração do LPS no lúmen, intensificando ainda mais a resposta inflamatória.

Isso imita o desenvolvimento de enterocolite necrosante, uma inflamação grave no intestino de bebês prematuros.

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