Name: Encapsulation título celular por Droplets (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T13:09:54.000+00:00
Duration: 13 min 10 s
Description: Aprenda encapsulação celular por droplets para bioimpressão 3D usando válvula solenoide e estágio motorizado. Este método avança a engenharia de tecidos e viabilidade celular.

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NIH3T3 preparação células: Células de A. de ejeção <ol><li> Trypsinize células, então diluir 1:1 com media de células, e transferência de um frasco T75 para um tubo Falcon 15 mL </li><li> Spin down células em um pellet por centrifugação, aspirar o sobrenadante e lavar as células com DPBS </li><li> Spin down células em uma pelota de novo, e aspirar o sobrenadante </li><li> Ressuspender as células em meios de comunicação </li><li> Determinar a densidade de células com hemocitômetro (~ 200 X 10 4 células / mL por frasco T75) </li><li> Solução da célula centrífuga, aspirar o sobrenadante e ressuspender em quantidade adequada dos meios de comunicação para diferentes concentrações de células </li></ol> B. Célula de ejeção <ol><li> Vortex células antes de usar para a ejeção </li><li> Transferir 200 mL da solução de célula em seringa </li><li> Definir o modo apropriado no gerador de pulso <ol><li> Para ejetar gotículas de única e gotículas múltiplas (rajadas), grupo gerador de pulso para &quot;E. BUR&quot; modo </li><li> Para a ejeção de gotas contínuo, grupo gerador de pulso para &quot;NORM&quot; modo de </li></ol></li><li> Alterar as configurações de sinal <ol><li> Conjunto de alto nível e baixo nível de tensão de saída: LIS a 5 V e LOL para 0 V e certifique-se o &quot;LIM&quot; LED está ligado </li><li> Definir como um sinal de pulso quadrado </li><li> Alterar a quantidade de tempo que a válvula solenóide é aberta para a ejeção de gotas, alterando o valor para &quot;WID&quot; ou mudar ciclo (&quot;dever&quot;) </li><li> Mudar a freqüência de ejeção, alterando o valor para &quot;PER&quot; </li><li> Alterar o número de gotículas ejetado em uma explosão, alterando o valor para &quot;BUR&quot; </li></ol></li><li> Solução da célula ejetar em substrato preparado para imagens com microscópio </li></ol> Coloração C. <ol><li> Compõem solução corante com 0,5 mL calceína-AM e 2 homodímero de etídio mL por mL de DPBS </li><li> Substrato preparado mergulhe em solução corante </li><li> Deixar a amostra para incubar por 10 minutos a 37 ° C antes de imagem </li></ol> Validação de experiência <ol><li> Em um microscópio Nikon Eclipse TE U-2000 Fluorescent <ol><li> Software ponto avançado (Diagnostics, Inc.) </li><li> Live / Morto Assay </li></ol></li></ol>

Os autores não têm nada a declarar.

<table><tbody><tr><td>Microscópio Fluorescente</td><td></td><td>Nikon Instruments</td><td>Eclipse TE-2000 U</td><td></td></tr><tr><td>Ejetor de células com válvula solenoide</td><td></td><td></td><td></td><td>Frequência de operação: 1 KHz, 30 psi, 50 nl~0,5 µl. Driver de válvula 12 V: corrente de acionamento de 2,5 A</td></tr><tr><td>Reservatório de ar portátil de 5 galões</td><td></td><td>Coleman</td><td>Powermate CT5</td><td>Ar pressurizado: 30 PSI</td></tr><tr><td>Reguladores de pressão</td><td></td><td>Marsh Bellofram</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gerador de Pulso</td><td></td><td></td><td>HP8112A</td><td>Geração de frequência de acionamento: 50 MHz</td></tr><tr><td>Estágio XYZ</td><td></td><td>Newmark Systems</td><td></td><td>Com motor de passo: estágio xy com curso de 6 polegadas (NLS4-6-25), estágio z com curso de 2,5 polegadas (NLS4-2,5-25), controlador de 3 eixos (NSC-G3), resolução de 0,1 µm</td></tr><tr><td>NIH 3T3</td><td>Linhagem celular</td><td></td><td></td><td>fibroblastos</td></tr><tr><td>Tripsina</td><td></td><td></td><td></td><td>Solução a 0,05%</td></tr><tr><td>Meio para células NIH 3T3</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Tampão</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>T75</td><td></td><td></td><td></td><td>Frascos de cultura de tecidos</td></tr><tr><td>Tubos cônicos de plástico</td><td></td><td></td><td></td><td>15 ml, para cultura de tecidos</td></tr></tbody></table>

encapsulation título celular por droplets

Title Cell Encapsulation by Droplets

Encapsulation título celular por Droplets

Meu nome é Hang Moon. Estou trabalhando com o professor de preservativos. Ele e eu trabalhamos com o estágio XYJ para criar uma estrutura tridimensional de célula.Olá, sou PE e Lynn, e estou trabalhando no projeto de impressão celular com encapsulamento celular e meios e géis. Este é o solenoide para a ejeção de uma célula e mistura celular de aros sobre o meio celular. A válvula solenoide é ativada por duas linhas de sinal.A linha de sinal vem de uma placa seca aqui. O sinal vem daqui. Essa linha através daquela linha, aquela é o gerador de função primeiro.Primeiro, o sinal é gerado por nosso método programado. Assim, se desejar alterar o pulso, você pode modificar o programa com a linha de comutação ou pode controlar esse gerador de processo por meio do computador. A válvula celular é aberta e fechada pelo sinal elétrico, mas a célula é suprida através dessa linha.A célula e o meio ou gel de ágar são fornecidos através das seringas. As seringas dentro da água, dentro da seringa, estão sob pressão leve causada pelo ar. O ar pressurizado é fornecido a partir de um tanque, como nesta linha.Assim, a pequena linha e o ar pressurizado passam através do filtro de ar. O filtro de ar disc

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Nós apresentamos os protocolos para o 3-dimensional encapsulamento (3D) de células dentro de hidrogéis sintéticos. O procedimento de encapsulamento é descrito por dois métodos comumente utilizados de reticulação (michael tipo adição e light-iniciado livre mecanismos radical), bem como uma série de técnicas para avaliar o comportamento das células encapsuladas.

O encapsulamento celular em Hidrogéis 3D para Engenharia de Tecidos

Combinando monodispersos geração gota com ordenação de inércia de células e partículas, nós descrevemos um método para encapsular um número desejado de células ou partículas em uma única gota a taxas kHz. Nós demonstramos a eficiência duas vezes superiores às de encapsulamento desordenada para gotas simples e dupla-partícula.

Alta taxa de transferência de célula única e múltipla de células Micro-encapsulamento

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Imunomarcação de células encapsuladas em um sistema de hidrogel 3D

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Encapsulamento de células de mamífero em grânulos de alginato usando um recipiente agitado simples

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Tecnologia celular encapsulada para a entrega de biológicos ao olho do rato

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Aprenda encapsulação celular por droplets para bioimpressão 3D usando válvula solenoide e estágio motorizado. Este método avança a engenharia de tecidos e viabilidade celular.

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