Name: Nanofibras ECM proteínas e Nanoestruturas Engineered Usando Assembléia iniciou-Surface (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-04-17T16:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 33 s
Description: Aprenda a engenhar nanofibras e nanoestruturas de proteínas da matriz extracelular usando montagem iniciada por superfície. Este método permite controlar a composição e arquitetura para aplicações em engenharia de tecidos.

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O apoio financeiro foi fornecido a JMS do NIH em Biomecânica Medicina Regenerativa Programa de Formação de T32 (2T32EB003392), a QJ do Fellowship Dowd-ICES e AWF de New Innovator Award do Diretor NIH (1DP2HL117750).

1. Fabricação de Molde Mestre usando fotolitografia <ol><li> As nanofibras de proteínas ECM, nanofabrics e nanoestruturas a ser fabricados são primeiramente projetados usando software Computer Aided Design (CAD). Este arquivo CAD é então transferido para um photomask. O tipo de fotomáscara dependerá da resolução das características; com um photomask baseada em transparência adequada para o recurso tamanhos até ~ 10 m. Características menores &lt;10 m exigirá um cromo em photomask vidro. Todas as nanofibras e nanoestruturas aqui apresentados foram fabricados usando um photomask baseado em transparência e, portanto, foram à escala nanométrica de espessura, mas não dimensões laterais. Nota: É importante distinguir quais as regiões da fotomáscara será escuro (luz UV para evitar a passar) e que vai ser transparente (permitir que a luz UV para passar através) como este, juntamente com o tipo de material fotosensitivo (positivo ou negativo) , vai ditar a topografia final do molde mestre. </li><li> Para iniciar o fabrico do molde mestre, desidratar uma bolacha 4 &quot;de silício, colocando-o numa placa de aquecimento configurado para 150 ° C durante 15 min. </li><li> Centralize o wafer sobre o chuck vácuo de um spin-coater. Despeje SU8-2015 fotorresistente negativo para o meio da bolacha e continuar vertendo em círculos concêntricos, até cerca de dois terços da bolacha é coberto. Nota: Manter a garrafa de SU8 perto da bolacha quando vazar para minimizar a formação de bolhas. </li><li> Programar a spincoater como se segue: <ul><li> Ciclo Spread: 500 rpm com uma aceleração de 100 rpm / s por 10 s. </li><li> Ciclo de centrifugação: 4000 rpm com uma aceleração de 100 rpm / seg para 30 seg. </li></ul> Nota: Esta receita spincoating vai formar uma camada foto-resistente, que é de aproximadamente 10 um de espessura. Ao alterar a velocidade de rotação ou da formulação SU8, a espessura pode ser ajustada. </li><li> Mole cozer a bolacha, colocando-o numa placa de aquecimento configurado a 95 ° C durante 3 min. </li><li> Expor o wafer com luz UV através defotomáscara para uma dose total de 140 mJ / cm 2. Nota: SU8 é uma fotorresistência negativo, por conseguinte, as regiões onde a luz ultravioleta é capaz de passar através da foto-mascara permanecerá após o desenvolvimento e tornou características levantadas sobre o molde mestre. </li><li> Após a exposição cozer a bolacha, colocando-o numa placa de aquecimento configurado a 95 ° C durante 4 min. </li><li> Desenvolver o wafer, colocando-o desenvolvedor SU8 por 3 min. Após 3 min, lavar o wafer com álcool isopropílico. Se uma película branca é produzido durante a lavagem, a pastilha não é totalmente desenvolvido e deve ser colocada de volta no revelador durante mais 30 seg. Enxágüe novamente com álcool isopropílico. Repita esse processo até que uma película branca não formar durante a lavagem álcool isopropílico. </li><li> Seca-se a bolacha em uma corrente de azoto e em lugar de uma placa de petri de 150 milímetros para proteger da poeira. </li></ol> 2. Fazendo as PDMS selos <ol><li> Preparar o pré-polímero de PDMS, combinando a base de elastómero e de agente de cura numa10:1 w / w. Tipicamente, 80 g de base e 8 g de agente de cura são utilizados para garantir que há PDMS suficientes para cobrir o molde mestre de uma camada de 1 cm de espessura. </li><li> Misture e degas do PDMS utilizando um misturador centrípeta definido para o seguinte: <ul><li> Misturar: 2000 rpm durante 2 min </li><li> Desgaseifica: 2000 rpm durante 2 min. </li></ul></li><li> Se um misturador está indisponível misturar os PDMS com a mão por 10 min usando uma pipeta de 10 ml sorológica. Desgaseificar a mistura, colocando-o em um exsicador de vácuo durante 30 min para remover as bolhas. </li><li> Despeje suficiente pré-polímero de PDMS sobre o molde mestre (pastilha de silício modelado) para formar uma camada de 1 cm de espessura. Curar o PDMS por cozedura a 65 ° C durante 4 horas ou à temperatura ambiente durante 48 horas. </li><li> Uma vez curada, as regiões que contêm os padrões pode ser cortado para formar os selos PDMS. Para distinguir o lado do recurso na parte de trás do selo PDMS, cortar um entalhe de um dos cantos na parte de trás do selo. </li></ol> 3. Microcontact Printing de padrões de ECM <ol><li> Limpo lamelas de vidro 25 mm de diâmetro por sonicação em etanol a 95% durante 1 hora e em seguida seco num forno de 65 ° C. </li><li> Preparar a solução PIPAAm dissolvendo PIPAAm em 1-butanol, a uma concentração de 10% (w / v, tipicamente 1 g em 10 ml). </li><li> Centrar uma lamela de vidro sobre o mandril de vácuo dos spincoater e pipeta 200 uL da solução PIPAAm modo que a superfície de vidro inteiro é coberto. </li><li> Spincoat a lamela a 6.000 rpm durante 1 min. </li><li> Limpar os selos PDMS por sonicação em etanol a 50% durante 30 min e, em seguida, seca sob uma corrente de azoto. Nota: A secagem e passos subsequentes devem ser realizados numa câmara de biossegurança para manter a esterilidade para aplicações em que as nanoestruturas ECM serão utilizados com células. </li><li> Revestir a superfície padronizada de cada selo de PDMS com 200 ul da solução de proteína, tipicamente 50 ug / ml em água destilada estéril para FN. Incubar durante 1 h à temperatura ambiente. Nota: Thé o revestimento de volume é um PDMS selo 1,5 cm 2 e terá de ser ajustada, dependendo do tamanho do selo PDMS, a proteína da MEC utilizado e a concentração da proteína na solução de ECM. </li><li> Lave os selos PDMS em água destilada para remover o excesso de proteína e seco cuidadosamente sob uma corrente de azoto. Nota: Qualquer água deixada sobre o selo irá desencadear a dissolução prematura do revestimento PIPAAm na lamela e evitar a transferência de proteína adequada. </li><li> Para a fabricação estéril, coloque as lamelas PIPAAm revestidos no interior de uma placa de Petri fechada e esterilizar utilizando a exposição UV, 45 min sob a luz UV em uma cabine de segurança biológica é suficiente. Se a esterilidade não é necessário este passo pode ser omitido. </li><li> Executar impressão microcontact colocando lado a característica do selo PDMS em contato com a lamela PIPAAm-revestido. Se necessário, utilize uma pinça para bater levemente na parte de trás dos selos para remover as bolhas de ar e garantir o contato uniforme. </li><li> Após 5 min, retire o selo PDMS da lamela. </li><li> Nesta fase, as proteínas de ECM adicionais, pode ser modelado para criar estruturas mais complexas e de componentes múltiplos. Até 3 impressões foram verificados para trabalhar com este processo, e muito mais pode ser viável. </li></ol> 4. Lançamento de ECM nanofibras e Nanoestruturas <ol><li> Coloque o PIPAAm lamela revestida modelada em um 35 milímetros placa de Petri e fiscalizar a fidelidade padrão usando microscopia de contraste de fase. Dependendo do padrão, uma câmara CCD pode ser necessário, para resolver as características do padrão. A microscopia de fluorescência também pode ser utilizado para inspeccionar o padrão fornecidas as proteínas de ECM são marcadas por fluorescência. </li><li> Adicionar 3 ml de água destilada, 40 ° C para a placa de petri e permite que a água a arrefecer gradualmente. </li><li> A dissolução da camada PIPAAm e a libertação dos padrões de proteínas de ECM podem ser monitorizadas através de microscopia de contraste de fase. Se o aplicativo não permite o uso de tec ópticahniques, a libertação pode ser monitorizado através da medição da temperatura da solução. Tipicamente, a água é arrefecida até à temperatura ambiente, bem abaixo da TCIS de PIPAAm (32 ° C), para assegurar que as nanoestruturas de proteínas de ECM foram libertados. </li><li> Após a liberação, as nanofibras, nanofabrics e outras nanoestruturas estão flutuando na água. Para usá-los para outras aplicações que necessitam para ser manipulado. A abordagem exacta dependerá do objectivo experimental e pode incluir passos tais como a imobilização para outra superfície, movendo-se com um sistema micromanipulador ou incorporação num hidrogel. </li></ol>

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</ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

O método aqui apresentado SIA imita montagem matriz mediada por células e permite que a engenharia de proteínas ECM nanofibras e nanoestruturas com tamanho ajustável, organização e composição. Apesar de não ser idêntico ao ECM gerado pelo celular, SIA cria ECM composta de fibrilas da proteína em nanoescala 20 que sofrem de dobramento reversível / desdobramento durante tensão mecânica 21 e podem ligar células 20. Isto proporciona uma capacidade única para construir materiais proteicos que...

A matriz extracelular (ECM) dos tecidos é composta de proteínas multifuncionais envolvidos na regulação física e química de vários processos celulares, incluindo adesão, proliferação, diferenciação e apoptose 1-3. O ECM é sintetizada, montado e organizado pelas células e as fibras de proteína constituintes têm composições únicas, tamanho da fibra, geometrias e arquiteturas interligadas que variam com o tipo de tecido e estágio de desenvolvimento. Trabalhos recentes têm demonstrado que o ECM pode fornecer pistas instrutivas para orientar células para formar tecidos artificiais 4, sugerindo que recapitulando a ECM em termos de composição e estrutura pode permitir o desenvolvimento de materiais biomiméticos para aplicações em engenharia de tecidos e biotecnologia. Um número de métodos de fabrico têm sido desenvolvidos para manipular andaimes poliméricos que podem imitar aspectos da ECM em tecidos. Por exemplo, eletrofiação e separ faseção têm ambos demonstraram a capacidade para formar matrizes porosas de fibras com diâmetros que variam entre dezenas de micrómetros deslocamento de dezenas de nanómetros de 5-7. Ambas as técnicas têm também mostrado que as matrizes altamente porosas de nanofibras pode suportar a adesão de células e infiltração no andaime 8. No entanto, estas abordagens estão limitadas nas geometrias possíveis orientações de fibra, e 3D arquitecturas que podem ser criados. Electrospinning normalmente produz andaimes com fibras ou orientadas aleatoriamente ou altamente alinhadas ao passo que a separação de fase produz andaimes com fibras orientadas aleatoriamente. Também existem limitações sobre o material, com investigadores tipicamente utilizando polímeros sintéticos, tais como poli (ε-caprolactona) 8 e poli (ácido láctico-co-glicólico), 9, que são posteriormente revestidos com proteínas de ECM para promover a adesão celular. Biopolímeros naturais também são utilizados, incluindo o colágeno tipo I 10, 11 gelatina, fibrinogênio 12,quitosana 13 e 14 de seda, mas representam apenas um pequeno subconjunto das proteínas encontradas no tecido nativo. A maioria dos tecidos contêm um meio maior de proteínas da MEC e polissacarídeos incluindo a fibronectina (FN), laminina (LN), o colagénio tipo IV e ácido hialurónico que são difíceis ou impossíveis de fabricar utilizando nanofibras de métodos já existentes. Para enfrentar esse desafio, temos focado nossos esforços de pesquisa sobre imitando a forma como as células sintetizar, montar e organizar fibrilas da proteína ECM em seus arredores. Enquanto o processo de fibrilogénese específica varia para diferentes proteínas da MEC, tipicamente uma alteração conformacional na molécula de proteína da MEC é desencadeada por um enzimática ou interacção mediada por receptor, o que expõe locais de auto-montagem crípticos. Aqui usamos FN como um sistema modelo para entender melhor o processo fibrilogênese. Resumidamente, FN homodímeros se ligam a receptores de integrina sobre a superfície celular através da sequência de aminoácidos RGD no 10 tipo IIRepito unidade. Uma vez ligado, as integrinas se afastam via contração actomiosina e desdobrar os dímeros FN para expor sites de auto-montagem enigmáticas. A exposição a estes locais de ligação de NF-FN permite que os dímeros de FN para montar em uma fibrila insolúvel direita na superfície da célula 15. Trabalho em sistemas livres de células demonstrou que os sítios de ligação FN-FN enigmáticas pode ser revelado através de desdobramento usando desnaturantes 16 ou tensão superficial em um ponto sólido-líquido interface de ar 17-19. No entanto, as fibras de FN criada por estas técnicas são restritas para os tamanhos e geometrias de fibras específicas e está tipicamente ligado a uma superfície. Aqui nós descrevemos um conjunto iniciou-superfície denominado abordagem (SIA) 20, que supera estas limitações, utilizando interações proteína de superfície para criar nanofibras sem pé insolúveis, nanofabrics (folhas 2D) e outras nanoestruturas compostas de proteínas individuais ou múltiplas de ECM (Figura 1 ). Neste process, proteínas da MEC são absorvidos a partir de uma conformação compacta, globular em solução e parcialmente desnaturado (desdobrado) em um, polidimetilsiloxano hidrofóbico (PDMS) selo padronizado. As proteínas são então transferidas ECM neste estado num poli resposta térmica (N-isopropilacrilamida) (PIPAAm) superfície através microcontact impressão 22. Quando hidratado com água de 40 ° C a PIPAAm continua a ser um sólido, mas, quando arrefecida a 32 ° C que passa através de uma temperatura crítica inferior de solução (TCIS), onde ela se torna hidrofílico, incha com água e, em seguida, dissolve-se, libertando as nanoestruturas ECM montados fora de a superfície. O método SIA fornece controle sobre as dimensões com precisão à escala nanométrica. Ao controlar os parâmetros-chave, tais como a composição, a geometria da fibra, e arquitetura, é possível recapitular muitas propriedades da ECM encontradas in vivo e desenvolver suportes avançados para aplicações de engenharia de tecidos e biotecnologia.

<table><tbody><tr><td>Poli(N-isopropilacrilamida) / PIPAAm</td><td>Polysciences</td><td>21458-10</td><td>40,000 Mw</td></tr><tr><td>Sylgard 184 Kit de Silicone (PDMS)</td><td>Dow Corning</td><td></td><td>Mix 10 peças base com 1 parte de agente de cura.&nbsp;</td></tr><tr><td>Butanol</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fibronectina</td><td>BD</td><td>biosciences 354008</td><td>Humano, 1mg</td></tr><tr><td>Laminina</td><td>BD</td><td>biosciences 354239</td><td>Ultrapuro, camundongo, 1mg</td></tr><tr><td>Negativo Fotorresistente</td><td>Microchem</td><td>SU8-2015</td><td></td></tr><tr><td>SU8 Desenvolvedor</td><td>Microchem</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sonicator Branson M3510</td><td>Branson Ultrasonic Corporation</td><td>CPN-952-318</td><td></td></tr><tr><td>Misturador Thinky ARE-250</td> Sistemas de revestimento <td>especiais Spincoater da Thinky Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>G3P-8</td><td></td></tr><tr><td>Tampa de vidro de 25 mm de diâmetro, nº 1.5</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-545-86</td><td></td></tr></tbody></table>

nanofibras ecm proteínas e nanoestruturas engineered usando assembléia iniciou-surface

ECM Protein Nanofibers and Nanostructures Engineered Using Surface-initiated Assembly

A matriz extracelular (ECM) dos tecidos é sintetizada e montada pelas células para formar um fibrilar 3D, rede com proteína fortemente regulada diâmetro da fibra, da composição e organização. Além de proporcionar um suporte estrutural, as propriedades físicas e químicas do ECM desempenham um papel importante em vários processos celulares, incluindo adesão, diferenciação e apoptose. In vivo, a ECM é montado expondo críptico automontagem locais (fibrilogênese) dentro de proteínas . Este processo varia para diferentes proteínas, mas a fibronectina (FN) fibrilogênese é bem caracterizado, e serve como um sistema modelo para a montagem de ECM mediada por células. Especificamente, as células utilizam receptores de integrina sobre a membrana celular para ligar dímeros de FN e forças contrácteis gerado-actomiosina para desdobrar e expor os locais de ligação para a montagem em fibras insolúveis. Este processo mediado por receptores de células permite montar e organizar o ECM do tecido celular para scales. Aqui, apresentamos um método denominado montagem iniciou-superfície (SIA), que recapitula a montagem da matriz mediada por células usando interações proteína-superfície a se desdobrar proteínas da MEC e montá-las em fibras insolúveis. Primeiro, proteínas da MEC são adsorvidos um polidimetilsiloxano hidrofóbico (PDMS) superfície onde eles parcialmente desnaturar (desdobrar) e expor domínios de ligação enigmáticas. As proteínas desdobradas em seguida, são transferidos em bem definidas micro e nanopatterns através de impressão em uma microcontacto poli resposta térmica (N-isopropilacrilamida) (PIPAAm) superfície. Dissolução termicamente acionado do PIPAAm leva à montagem final e liberação de proteínas insolúveis nanofibras ECM e nanoestruturas com geometrias bem definidas. Arquiteturas complexas são possíveis por padrões de engenharia definidos nos selos PDMS utilizados para impressão microcontact. Além disso a FN, o processo de PEI poderá ser usado com laminina, fibrinogénio e colagénios do tipo I e IV para criar multi-componente nanostruc ECMturas. Assim, o SIA pode ser utilizado para manipular os materiais à base de proteínas de ECM com o controlo preciso sobre a composição de proteína, fibra de geometria e arquitectura de andaime, a fim de recapitular a estrutura e composição da MEC in vivo.

SIA é capaz de ECM engenharia nanofibras de proteínas com um controle preciso sobre as dimensões das fibras. Para demonstrar isto, matrizes de nanofibras FN com dimensões planares de 50 x 20 um foram modelados para uma lamela PIPAAm revestido (Figura 2A). Após a liberação, as fibras contratados porque estavam sob uma pré-estresse inerente ao modeladas na superfície PIPAAm (Figura 2B). Análise das nanofibras FN revelou que foram pré-autorização monodisperso com um comprimento médio de 50...

Um método para obtenção de nanofibras e nanoestruturas de complexos de proteínas de matriz extracelular simples ou múltiplos é descrito. Este método utiliza as interações proteína de superfície para criar materiais à base de proteínas free-standing com composição sintonizável e arquitetura para o uso em uma variedade de aplicações de engenharia de tecidos e biotecnologia.

Nanofibras ECM proteínas e Nanoestruturas Engineered Usando Assembléia iniciou-Surface

The extracellular matrix (ECM) in tissues is synthesized and assembled by cells to form a 3D fibrillar, protein network with tightly regulated fiber ...

O objetivo geral deste procedimento é produzir fibras, nanoestruturas e matrizes bidimensionais autossustentáveis a partir de proteínas da matriz extracelular únicas ou múltiplas, utilizando montagem iniciada em superfície. Isso é realizado primeiramente preparando carimbos de poli(dimetilsiloxano) ou PDMS, despejando o pré-polímero de PDMS em um molde-mestre com padrão topográfico e deixando curar. O segundo passo consiste em recortar os carimbos de PDMS curados e revesti-los com uma solução contendo as proteínas da matriz extracelular desejadas.Em seguida, os carimbos são lavados, secos e impressos por microcontato em uma lamínula de vidro revestida com poli N iso propil acrilamida, ou pipe PAM. O passo final é hidratar a lamínula com água desionizada morna a 40 graus Celsius e permitir que esfrie gradualmente, reduzindo a temperatura da solução. Abaixo de aproximadamente 32 graus Celsius, ocorre a dissolução da camada de pipe PAM termossensível e a liberação das nanoestruturas ou nanofibras proteicas montadas.No final, as nanoestruturas e nanofibras montadas são autossustentáveis em solução, conforme confirmado por microscopia de contraste de fase e/ou fluorescência, e podem ser

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

Uma abordagem eficiente para a preparação de nanofibras decorados com grupos funcionais capazes de interagir especificamente com as proteínas é descrito. A primeira abordagem requer a preparação de um polímero funcionalizado com o grupo funcional apropriado. O polímero funcional é fabricado em nanofibras por electrospinning. A eficácia da ligação das nanofibras com uma proteína é estudada por microscopia confocal.

Procedimento para a fabricação de nanofibras biofuncionais

Este documento descreve a formação de estruturas com base em peptídeos altamente ordenada pelo processo espontâneo de auto-montagem. O método utiliza peptídeos comercialmente disponíveis e equipamento de laboratório comum. Esta técnica pode ser aplicada a uma grande variedade de péptidos e podem conduzir à descoberta de novos conjuntos com base em peptídeos.

A formação de estruturas biomoleculares ordenada pelo auto-montagem de pequenos peptídeos

Superfícies de ilhas marinhas nanoescalonadas compostas de copolímeros em bloco termorresponsivos foram fabricadas pelo método de Langmuir-Schaefer para controlar a adesão e o desprendimento espontâneo de células. Tanto a preparação da superfície quanto a adesão e descolamento das células na superfície foram visualizadas.

Preparação de Thermoresponsive nanoestruturados Surfaces para Engenharia de Tecidos

O presente trabalho descreve um método para fabricar micélica nanocristais, uma classe emergente grande de nanobiomaterials. Este método combina electrospray de cima para baixo, de baixo para cima, auto-montagem e controle de estrutura de base solvente. O método de fabricação é em grande parte contínuo, podemos produzir produtos de alta qualidade e possui um meio barato de controle de estrutura.

Fabricação de nanocristais micélica esférico e em forma de verme, combinando Electrospray, auto-montagem e controle de estrutura de base solvente

Este artigo descreve a metodologia detalhada para preparar uma matriz multiplexado Artificial celular microambiente (MACME) para manipulação de alta produtividade de física e química sugestões imitando na vivo o microambiente celular e para Identifica o ambiente celular ideal para as células-tronco pluripotentes humanas (hPSCs) com perfis de célula única.

Fabricação de uma matriz de microambiente celular Artificial multiplexado

Apresentado é um método fácil para fabricar estruturas de múltipla escala nano-micro, para superfícies funcionais, agregando nanofibras fabricadas usando um filtro de óxido de alumínio anódico.

Estruturas de múltipla escala agregadas por nanofibras impressos para superfícies funcionais

Na interface de solventes orgânicos e aquosos, proteínas anfífilas sob medida se reúnem em estruturas supramoleculares complexas, como vesículas, fibras e coacervates desencadeadas por parâmetros ambientais. Os protocolos de montagem descritos produzem compartimentos baseados em membrana sérica (PMBCs) com propriedades ajustáveis, permitindo o encapsulamento de várias cargas.

Montagem dirigida de proteínas semelhantes à elastina em estruturas supramoleculares definidas e encapsulamento de carga in vitro

O objetivo deste protocolo é mostrar a montagem de uma nanomatrix biomimética (NM) com nanotubos base janus (JBNTs) e fibronectina (FN). Quando co-cultivados com células-tronco mesenquimais humanas (hMSCs), os NMs apresentam excelente bioatividade no incentivo à adesão dos HMSCs.

Fabricação de uma Nano-Matriz Biomimética com Nanotubos base janus e fibronectina para adesão de células-tronco

Este protocolo tem como objetivo avaliar peptídeos biofuncionais de automontagem quanto à adesão celular, morfologia organoide e expressão gênica por imunocoloração. Usaremos uma linha celular de câncer colorretal para fornecer uma maneira econômica de obter organoides para testes intensivos.

Fabricação e caracterização de organoides de câncer colorretal da linha celular SW1222 em matriz peptídica de automontagem ultracurta

As inserções de cultura de tecidos com membranas plásticas são o padrão ouro em laboratórios de cultura de células como suportes permeáveis para estabelecer camadas celulares e modelos de tecidos de barreira. Aqui, apresentamos um método simples para substituir a membrana plástica por uma membrana mais biologicamente relevante feita de uma proteína de seda de aranha funcionalizada recombinante.

Mímica de membrana basal nanofibrilar feita de seda de aranha funcionalizada recombinante em inserções de cultura de tecidos feitas sob medida

O protocolo a seguir apresenta um método de extrusão baseado em cisalhamento para a fabricação de hidrogéis de colágeno com fibrilas padronizadas em nanoescala, que pode ser aplicado a uma ampla gama de aplicações de engenharia de tecidos.

Produção de colágeno estampado nanofibrilar para engenharia de tecidos

Aprenda a engenhar nanofibras e nanoestruturas de proteínas da matriz extracelular usando montagem iniciada por superfície. Este método permite controlar a composição e arquitetura para aplicações em engenharia de tecidos.

Nanofibras ECM proteínas e Nanoestruturas Engineered Usando Assembléia iniciou-Surface

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