Моделирование инсульта у мышей - окклюзии средней мозговой артерии с накаливания Модель

Общая цель этой процедуры заключается в создании мышиной модели фокальной ишемии головного мозга путем блокирования средней мозговой артерии внутрипросветной нитью. Это достигается путем выполнения разреза по средней линии шеи и визуализации общей сонной артерии. Следующим шагом является завязывание лигатур вокруг общей сонной артерии, а внешние зажимы сонной артерии используются для их удержания на месте и предотвращения кровотечения.

Завершающим этапом процедуры является введение нити в круг Виллиса. Это блокирует ветвь средней мозговой артерии, в конечном счете, возникает неврологический дефицит. В результате этого окклюзию можно идентифицировать путем наблюдения за изменениями в поведении.

Одним из основных преимуществ проксимальной окклюзии MCA с помощью филаментной техники является то, что она обеспечивает высоковоспроизводимые поражения в слое и коре головного мозга. Ишемия может применяться постоянно и преходяще, и, кроме того, поскольку она не требует нитевидной черепной экклюзии, окклюзию МКА можно считать более или менее неинвазивной. Как правило, люди, плохо знакомые с этим методом, испытывают трудности из-за деликатного характера микрохирургических техник Перед процедурой подготовьте нить, разрезав нейлоновую нить толщиной 8,0 мм на 11 миллиметров под микроскопом.

Наконечник филамента должен быть полностью и равномерно покрыт по длине восьми миллиметров силиконовой смесью, для достижения оптимальных результатов рекомендуется использовать стандартные операционные процедуры. Тип используемой мыши зависит от цели исследования. Как правило, мыши должны быть старше 10 недель.

Используйте соответствующие обезболивающие средства после консультации с ветеринарным персоналом. Температура тела мышей поддерживается на уровне около 36,5 градусов Цельсия во время операции с помощью нагревательной пластины, подготовки места операции, дезинфекции кожи и окружающей шерсти и дачи ей высыхания. Сделайте разрез по средней линии вдоль шеи и аккуратно раздвиньте мягкие ткани.

Левая общая сонная артерия тщательно рассекается, освобождается от окружающих нервов, не повреждая блуждающий нерв, и делается лигатура с использованием шва от 5,0 до 7,0. Далее изолируйте левую наружную сонную артерию и завяжите второй узел. После изоляции левой внутренней сонной артерии неплотно завяжите вокруг нее узел.

При использовании нити 6.0 узел будет затянут позже в ходе процедуры. После получения хорошего обзора левой внутренней сонной артерии и левой тей-нёбной артерии, обеих артерий, ЭК клипируется для подготовки к введению нити. В общей сонной артерии прорезается небольшое отверстие до того, как она разветвится.

Подготовленная ранее монофиль затем вводится в артерию. Отрезанные артерии вскрываются, в то время как нить вставляется во внутреннюю сонную артерию. Чтобы окклюзировать среднюю мозговую артерию, закрывают третий узел на внутренней сонной артерии.

Чтобы зафиксировать нить в нужном положении, затем нанесите гель лидокаин местно на рану для облегчения боли. При фиктивных операциях филамент вводится и извлекается немедленно, чтобы обеспечить мгновенную реперфузию, и немедленно извлекается для обеспечения мгновенной реперфузии: 0,5 миллилитра физиологического раствора вводится подкожно в качестве восполнения объема. Чтобы изучить эффекты реперфузии, откройте третий узел и удалите нить.

Установленный временной промежуток времени после ишемии, обычно через 30-60 минут. В этом примере разрешается провести реперфузию через 60 минут после окклюзии иллюзии, ввести второй объем, восполняющий инъекцию физиологического раствора. Окончательно укоротите оставшиеся швы и закройте кожу хирургическим швом.

Поместите животных в отапливаемую клетку на два часа для восстановления после операции, ежедневно проверяйте животных на наличие признаков дискомфорта. После операции может произойти потеря веса, и мышей следует давать пюре из пищи, помещенной в чашку Петри на полу. Чтобы побудить к приему пищи.

Корм заменяется ежедневно в течение семи дней. Продолжительность ограничения кровотока может привести к различиям в двигательных и поведенческих дефицитах. После 30 или 60 минут ишемии головного мозга у большинства животных снижается сопротивляемость.

При более поздних толчках и кружениях из-за нарушения локомоции, более легкие поражения проявляются в виде положения сгибателя в передних конечностях. Эти легко наблюдаемые признаки могут быть использованы в качестве базовой оценки успеха операции. Образовавшееся поражение можно оценить с помощью гистологии или магнитно-резонансной томографии.

Как видно на рисунке, 60-минутная окклюзия средней мозговой артерии приводит к некрозу тканей в области, включающей как стриатум, так и стриатум, в то время как 30-минутная ишемия вызывает в основном гибель нейрональных клеток, ограниченную стриальным телом. Хорошо обученные хирурги MCAO могут освоить эту технику за 10 минут. При выполнении этой процедуры важно помнить о следовании стандартным рабочим процедурам, чтобы обеспечить воспроизводимые результаты и контролировать искажающие факторы.