ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Эта работа финансировалась по Седьмой рамочной Европейское сообщество программа (FP7/2007-2013) в рамках грантового соглашения N ° 201024 и № 202213 (Европейская сеть Stroke). Дополнительное финансирование было дано Bundesministerium für Bildung унд Forschung (Центр исследований Stroke Берлин) и Deutsche Forschungsgemeinschaft (Exzellenzcluster NEUROCURE). Авторы хотели бы поблагодарить Марейке Thielke (отдел экспериментальной неврологии, Шарите Берлин) для поддержки во время операции и Эльке Людвиг (услуги Шарите видео) для создания анимации.

Чтобы гарантировать высокое качество и воспроизводимость результатов, мы рекомендуем использовать стандартные операционные процедуры (СОП). В этом видео, опубликованное СОП, как разрабатываются и используются в нашей лаборатории применяются 1. 1. Окклюзии средней мозговой артерии <ol><li> Мыши наркозом с соответствующей анестезии режима в проконсультироваться с ветеринарным персоналом. (Например, индукция с 1,5 - 2% изофлюрана и обслуживания с 1,0 - 1,5% изофлюрана в 2 / 3 N2O и 1 / 3 O2 использования испарителя). <ol><li> Температура тела мышей поддерживается на уровне 36,5 ° C ± 0,5 ° C во время операции с нагревательного элемента. Обратная связь контролируемой грелку, которая нагревается в соответствии с ректальной температуры мыши, настоятельно рекомендуется. </li><li> Лечить кожи и меха окружающих с помощью соответствующего средства (например, 70% этиловый спирт) и высушите его впоследствии. </li></ol></li><li> Средней линии шеи разрез сделан и мягких тканей тянутся друг от друга. </li><li> Левой общей сонной артерии (LCCA) тщательно расчлененный свободным от окружающих нервов (без ущерба для блуждающего нерва) и лигатур осуществляется при помощи 6.0/7.0 строку. 5,0 строка может также использоваться. </li><li> Левой внешней сонной артерии (Керамзит) затем отделяются и второй узел сделан. </li><li> Затем левой внутренней сонной артерии (LICA) изолирована и узел подготовлен с 6,0 нити. </li><li> Получив хороший вид на левой внутренней сонной артерии (LICA) и левой крылонебный артерии (МПУ), оба артерий, обрезаются с помощью микрососудистых клипа. </li><li> Маленькое отверстие вырезается в LCCA перед его раздваивается, чтобы Керамзит и LICA. Мононити сделаны из нейлона 8,0 покрытием с кремнием отвердителя смесь (см. ниже), затем вводится в LICA, пока она не останавливается на клипе. Внимание должно быть уделено не вступать в затылочной артерии. (Рис. 1) </li><li> Обрезанный артерии открываются в то время как нити вставляется в LICA окклюдировать происхождения LMCA в круг Уиллиса. </li><li> Третий узел на LICA закрыта для исправления нити в нужном положении. </li><li> Мышей получать солевой 0,5 мл подкожно, как объем пополнения. Для облегчения боли, Лидокаин гель местно применяемых в рану. </li><li> Если реперфузии предназначен, мышей пребывания в течение 30 - 90 мин окклюзии в теплом клетки, рана может быть закрыто с небольшой клип шва. После этого второй анестезии выполняется, третий узел на ICA является мгновенная открыт и нити отозвано. </li><li> Остальные швы сокращен и кожа адаптируется с хирургический шов. </li><li> Все животные получают второе пополнение объема, как описано выше. </li><li> Животных поместили в клетки нагревают в течение двух часов для контроля температуры тела. <ol><li> Животные должны проверяться ежедневно после операции по поводу признаков дискомфорта. Мышей может показать некоторые послеоперационные потери веса. Они получают пищу в пюре-Петри блюдо положили на пол, чтобы поощрять еды. Пища заменяется ежедневно в течение семи дней. </li></ol></li></ol> 2. Шам операции <ol><li> Для операций, притворство нити вставляется закрывают LMCA и изъяты сразу, чтобы мгновенно реперфузии (1,8). Последующей эксплуатации идентична той, что производится на животных проходит церебральная ишемия (1,9 - 1,14), включая второй анестезии. </li></ol> 3. Подготовка накаливания <ol><li> Стерильность нити должны быть рассмотрены. Использование стерилизованного оборудования, а также надлежащего обращения с нитью впоследствии является необходимым условием для стерильных хирургии. Дезинфекция нити трудно, так как многие из распространенных методов стерилизации может ухудшить качество нити. Однако такие методы, как излучение, например, с УФ-светом или γ-лучей или химической стерилизации, например, с высокой реакционной способностью газов, таких как окись этилена, окись плату. </li><li> 8,0 нейлоновые нити нарезают длиной 11 мм под микроскопом </li><li> Нити наконечника должен быть покрыт полностью и равномерно по длине 8 мм с отвердителем смесь Xantopren М слизистой оболочки и Активатор NF Optosil </li></ol> 4. Представитель Результаты В зависимости от продолжительности крови ограничение потока, различных двигателей и поведенческие результате дефицита. И после 30 и 60 мин ишемии головного мозга, животные в большинстве случаев показывают, снизилась устойчивость к боковой толчок и кружить в связи с нарушением в передвижении. Более мягкие поражения проявляются как сгибателей позиции в передней LiMBS. Эти легко наблюдаемые признаки могут быть использованы в качестве основных оценка для успеха операции 2. Морфологически поражения можно оценить, используя либо гистологии или магнитно-резонансная томография (МРТ). Шестьдесят минут окклюзии средней мозговой артерии производит ткани pannecrosis в области в том числе и стриатуме и коре головного мозга, тогда как 30 минут ишемии причины главным образом нервных клеток смерти ограничивается полосатом теле. 3 (рис. 2) С точки зрения объема инфаркта, мы ожидаем, стандартное отклонение ниже, чем 30% в набор операций. Смертность зависит от окклюзии время около 5% после 30 мин ишемии и 10 - 20% через 60 мин. Другой минимально инвазивные возможность использования лазерной доплеровской флоуметрии (ЛДФ) в ходе операции, которая позволяет прямое управление ее успеха. В отдельных животных, снижение до 10 - 20% preocclusion значения четко указывает на успешное индукции фокальной ишемии головного мозга 4 Тем не менее, LDF не могут быть использованы в качестве метода для межличностных сравнений, так как LDF можно измерить только количественные изменения (в процентах) крови. потока в пределах небольшой и ограниченный объем образца ткани. Оно не дает информации о пространственной протяженности крови снижение потока 5. Есть несколько тестов, чтобы оценить поведенческие аспекты, перенесших инсульт, в том числе анализа походки 6,7, Rotarod 8, поляк теста 9,10, клей тест удаление 11,12, подъезд тест 13,14, лестничные ступени теста 15,16 и Моррис водном лабиринте 17. Во всех этих тестов, мышей, подвергнутых воздействию MCAo выполнять менее успешно, чем у контрольных животных. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig1.jpg" alt="Рисунок 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 1"> Рисунок 1. Схема архитектуры судна снабжения головного мозга (изображен на заднем плане) в мышь. Различные штаммы могут показать вариации, например затылочной артерии иногда выходит из внутренней сонной артерии. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig2.jpg" alt="Рисунок 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Рисунок 2"> Рисунок 2. Схематическое изображение типичных размеров поражения после того, различные моменты времени реперфузии в проксимальных модель MCAo. В середине, типичный ход функциональной активности и мозгового кровотока после MCAo изображены. (MCAo: средней мозговой артерии, LDF: Лазерные доплеровские измерения расхода)

<ol><li>Dirnagl, U. Members of the MCAO-SOP Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standard+operating+procedures+%28SOP%29+in+experimental+stroke+research%3A+SOP+for+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Precedings%22%5BJournal%5D)">Standard operating procedures (SOP) in experimental stroke research: SOP for middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Nature Precedings. , (2010).</li>
<li>Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+middle+cerebral+artery+occlusion%3A+evaluation+of+the+model+and+development+of+a+neurologic+examination%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination.</a> Stroke. 17, 472-476 (1986).</li>
<li>Katchanov, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+neuronal+vulnerability+following+mild+focal+brain+ischemia+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Selective neuronal vulnerability following mild focal brain ischemia in the mouse.</a> Brain Pathol. 13, 452-464 (2003).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDirnagl%2C+U+%22Complexities%2C+Confounders%2C+and+Challenges+in+Experimental+Stroke+Research%3A+A+checklist+for+researchers+and+reviewers+in+Rodent+models+of+stroke%22">Complexities, Confounders, and Challenges in Experimental Stroke Research: A checklist for researchers and reviewers in Rodent models of stroke</a>. Dirnagl, U. , Springer. New York Dordrecht Heidelberg London. 267-267 (2010).</li>
<li>Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+measurement+of+cerebral+cortical+blood+flow+by+laser-Doppler+flowmetry+in+a+rat+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 9, 589-596 (1989).</li>
<li>Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+analysis+of+gait+impairment+after+experimental+stroke+and+the+therapeutic+effect+of+environmental+enrichment+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">A comprehensive analysis of gait impairment after experimental stroke and the therapeutic effect of environmental enrichment in rats.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 28, 1936-1950 (2008).</li>
<li>Lubjuhn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+testing+in+a+mouse+stroke+model+induced+by+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+artery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Functional testing in a mouse stroke model induced by occlusion of the distal middle cerebral artery.</a> J Neurosci Methods. 184, 95-103 (2009).</li>
<li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+quantiative+measurement+of+motor+inco-ordination+in+naive+mice+using+an+acelerating+rotarod%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The quantiative measurement of motor inco-ordination in naive mice using an acelerating rotarod.</a> J Pharm Pharmacol. 20, 302-304 (1968).</li>
<li>Matsuura, K., Kabuto, H., Makino, H., Ogawa, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pole+test+is+a+useful+method+for+evaluating+the+mouse+movement+disorder+caused+by+striatal+dopamine+depletion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Pole test is a useful method for evaluating the mouse movement disorder caused by striatal dopamine depletion.</a> J Neurosci Methods. 73, 45-48 (1997).</li>
<li>Bouet, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensorimotor+and+cognitive+deficits+after+transient+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Sensorimotor and cognitive deficits after transient middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Exp Neurol. 203, 555-567 (2007).</li>
<li>Freret, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+administration+of+deferoxamine+reduces+brain+damage+and+promotes+functional+recovery+after+transient+focal+cerebral+ischemia+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Delayed administration of deferoxamine reduces brain damage and promotes functional recovery after transient focal cerebral ischemia in the rat.</a> Eur J Neurosci. 23, 1757-1765 (2006).</li>
<li>Modo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurological+sequelae+and+long-term+behavioural+assessment+of+rats+with+transient+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Neurological sequelae and long-term behavioural assessment of rats with transient middle cerebral artery occlusion.</a> J Neurosci Methods. 104, 99-109 (2000).</li>
<li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%22staircase+test%22%3A+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">The "staircase test": a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> J Neurosci Methods. 36, 2-3 (1991).</li>
<li>Baird, A. L., Meldrum, A., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+staircase+test+of+skilled+reaching+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">The staircase test of skilled reaching in mice.</a> Brain Res Bull. 54, 243-250 (2001).</li>
<li>Metz, G. A., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+and+subcortical+lesions+impair+skilled+walking+in+the+ladder+rung+walking+test%3A+a+new+task+to+evaluate+fore-+and+hindlimb+stepping%2C+placing%2C+and+co-ordination%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Cortical and subcortical lesions impair skilled walking in the ladder rung walking test: a new task to evaluate fore- and hindlimb stepping, placing, and co-ordination.</a> J Neurosci Methods. 115, 169-179 (2002).</li>
<li>Farr, T. D., Liu, L., Colwell, K. L., Whishaw, I. Q., Metz, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+alteration+in+stepping+pattern+after+unilateral+motor+cortex+injury%3A+a+new+test+strategy+for+analysis+of+skilled+limb+movements+in+neurological+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Bilateral alteration in stepping pattern after unilateral motor cortex injury: a new test strategy for analysis of skilled limb movements in neurological mouse models.</a> J Neurosci Methods. 153, 104-113 (2006).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> J Neurosci Methods. 11, 47-60 (1984).</li>
<li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema.+I%3A+a+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn+J+Stroke%22%5BJournal%5D)">Experimental studies of ischemic brain edema. I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Jpn J Stroke. 8, 1-8 (1986).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li>
<li>Endres, M., Dirnagl, U. Neuroprotective Strategies in Animal and in vitro-Models of Neuronal Damage: Ischemia and Stroke. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aEndres%2C+M+%22Molecular+and+Cellular+Biology+of+Neuroprotection+in+the+CNS%22">Molecular and Cellular Biology of Neuroprotection in the CNS</a>. Alzheimer, C. , Kluver Academic and Landes Bioscience. New York. Vol. 513 455-474 (2003).</li>
<li>Dirnagl, U., Iadecola, C., Moskowitz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathobiology+of+ischaemic+stroke%3A+an+integrated+view%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view.</a> Trends Neurosci. 22, 391-397 (1999).</li>
<li>Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+Stroke+Model+Guidelines+for+Preclinical+Stroke+Trials+%281st+Edition%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Stroke+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Rodent Stroke Model Guidelines for Preclinical Stroke Trials (1st Edition).</a> J Exp Stroke Transl Med. 2, 2-27 (2009).</li>
<li>Chen, Y., Ito, A., Takai, K., Saito, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blocking+pterygopalatine+arterial+blood+flow+decreases+infarct+volume+variability+in+a+mouse+model+of+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Blocking pterygopalatine arterial blood flow decreases infarct volume variability in a mouse model of intraluminal suture middle cerebral artery occlusion.</a> J Neurosci Methods. 174, 18-24 (2008).</li>
<li>Tsuchiya, D., Hong, S., Kayama, T., Panter, S. S., Weinstein, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+suture+size+and+carotid+clip+application+upon+blood+flow+and+infarct+volume+after+permanent+and+temporary+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of suture size and carotid clip application upon blood flow and infarct volume after permanent and temporary middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Brain Res. 970, 1-2 (2003).</li>
<li>Beckmann, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+magnetic+resonance+angiography+non-invasively+reveals+mouse+strain+differences+in+the+cerebrovascular+anatomy+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">High resolution magnetic resonance angiography non-invasively reveals mouse strain differences in the cerebrovascular anatomy in vivo.</a> Magn Reson Med. 44, 252-258 (2000).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 13, 683-692 (1993).</li>
<li>Florian, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neurosci Lett. 438, 180-185 (2008).</li>
<li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neurosci Lett. 349, 130-132 (2003).</li>
<li>Barber, P. A., Hoyte, L., Colbourne, F., Buchan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-regulated+model+of+focal+ischemia+in+the+mouse%3A+a+study+with+histopathological+and+behavioral+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Temperature-regulated model of focal ischemia in the mouse: a study with histopathological and behavioral outcomes.</a> Stroke. 35, 1720-1725 (2004).</li>
<li>Shin, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+induced+hypertension+improves+blood+flow+and+oxygen+metabolism+in+transient+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Mild induced hypertension improves blood flow and oxygen metabolism in transient focal cerebral ischemia.</a> Stroke. 39, 1548-1555 (2008).</li>
<li>Bottiger, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cerebral+ischemia+due+to+cardiocirculatory+arrest+in+mice+causes+neuronal+degeneration+and+early+induction+of+transcription+factor+genes+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Mol+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Global cerebral ischemia due to cardiocirculatory arrest in mice causes neuronal degeneration and early induction of transcription factor genes in the hippocampus.</a> Brain Res Mol Brain Res. 65, 135-142 (1999).</li>
<li>Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+induced+prolonged+protection+against+cerebral+ischemia+in+mice%3A+a+redox+sensitive+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism.</a> Neuroreport. 13, 1431-1435 (2002).</li>
<li>Endres, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+stroke+protection+by+physical+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of stroke protection by physical activity.</a> Ann Neurol. 54, 582-590 (2003).</li>
<li>Gertz, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+activity+improves+long-term+stroke+outcome+via+endothelial+nitric+oxide+synthase-dependent+augmentation+of+neovascularization+and+cerebral+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Physical activity improves long-term stroke outcome via endothelial nitric oxide synthase-dependent augmentation of neovascularization and cerebral blood flow.</a> Circ Res. 99, 1132-1140 (2006).</li>
<li>Richter, S. H., Garner, J. P., Wurbel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+standardization%3A+cure+or+cause+of+poor+reproducibility+in+animal+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Environmental standardization: cure or cause of poor reproducibility in animal experiments.</a> Nat Methods. 6, 257-261 (2009).</li>
<li>Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spectrum+of+systemic+immune+alterations+after+murine+focal+ischemia%3A+immunodepression+versus+immunomodulation%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The spectrum of systemic immune alterations after murine focal ischemia: immunodepression versus immunomodulation.</a> Stroke. 40, 2849-2858 (2009).</li>
<li>Meisel, C., Schwab, J. M., Prass, K., Meisel, A., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+nervous+system+injury-induced+immune+deficiency+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Central nervous system injury-induced immune deficiency syndrome.</a> Nat Rev Neurosci. 6, 775-786 (2005).</li>
<li>Engel, O., Meisel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+Infection+Before+and+After+Stroke%3A+Investigating+New+Targets%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Disord+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Models of Infection Before and After Stroke: Investigating New Targets.</a> Infect Disord Drug Targets. 9, (2010).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bench+to+bedside%3A+the+quest+for+quality+in+experimental+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Bench to bedside: the quest for quality in experimental stroke research.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 26, 1465-1478 (2006).</li>
<li>Macleod, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Good+laboratory+practice%3A+preventing+introduction+of+bias+at+the+bench%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Good laboratory practice: preventing introduction of bias at the bench.</a> Stroke. 40, 50-52 (2009).</li>
<li>Group, S. T. A. I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+standards+regarding+preclinical+neuroprotective+and+restorative+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Recommendations for standards regarding preclinical neuroprotective and restorative drug development.</a> Stroke. 30, 2752-2758 (1999).</li>
</ol>

Эксперименты на животных были проведены в соответствии с руководящими принципами и правилами установленными Landesamt Fuer Gesundheit унд Soziales, Берлин, Германия.

Модель переходных, проксимальная окклюзия СМА 18,19 представленные здесь имитирует один из наиболее распространенных видов ишемического инсульта у пациентов. 20 На основе переменной раза реперфузии, модель предлагает разные сорта ущерб от транзиторной ишемической атаки (ТИА) до крупных инфаркты в том числе основных частей ишемической полушарии. Это позволяет исследователю изучать различные патофизиологические механизмы после инсульта. 20,21 Операция может быть выполнена в короткий период времени и производит высокой воспроизводимостью поражений. Тем не менее, это требует тщательного контроля вмешивающихся факторов 22. Небольшие различия в работе техники может объясняться различными эффектами на инфаркт. 23,24 Кроме того, из-за различий в анатомии сосудов головного мозга, различных линий мышей показать другой результат. 25,26 тела Температура влияет на неврологическое повреждение, с переохлаждением, ведущие к меньшим поражением 27 и гипертермии к более серьезным дефицитом. 28 Соответственно, температурный контроль и техническое обслуживание является весьма актуальной в этой модели. 29 Кроме того, кровяное давление и газы крови являются важными вмешивающиеся факторы исхода и необходимость мониторинга. 30,31 использования быстрого и минимально инвазивных методов (неинвазивного измерения артериального давления, подходит и легко доступны сайты для сбора крови) рекомендуется. Выбор анестезии также очень важно, так как некоторые, возможно, нейропротекторное действие, и / или вазодилататоров, как, например изофлюрана 32. Следовательно, воздействие наркоза должна быть как можно короче и стандартизации. Мы исключаем животных, которые подверглись операции на срок более 15 мин. Бритье места операции производит microabrasions и воспаление и освобождает волосы фрагментов. Это может еще более увеличить воспаления и стимулировать местные инфекции, которая может оказать влияние на ход патофизиологии. Жилищные условия, в особенности использование обогащения, может повлиять на ход и результаты должны быть стандартизированы и описаны в научных докладов. 6,33,34 использования экологических обогащения и его влияния на воспроизводимость является предметом обсуждения. 35 Другим важным является confounder индуцированный инсульт риск инфицирования, особенно после увеличения времени ишемии 36, что приводит к дополнительной заболеваемости и увеличению смертности. 37,38 Как стать симптоматической инфекции на отметке день от 3 ​​до 5, это имеет важные последствия для долгосрочного наблюдения в таких моделей. Для получения результатов, имеющих значение для разработки новых стратегий лечения инсульта, стандартизация и контроль качества очень важно в доклинических исследованиях поступательного инсульта 39 &quot;надлежащей лабораторной практики&quot; 40,41 мандатов.: <ol><li> надлежащие и подробное описание животных, используемых; </li><li> Пример расчета размера и отчетности по размеру ожидаемого эффекта; </li><li> критерии включения и исключения, созданный до начала исследования; </li><li> рандомизации распределения по группам; </li><li> скрытое отнесение в отношении следователей; </li><li> отчетности животные исключены из анализа; </li><li> ослеплены оценки результатов; </li><li> сообщение о потенциальных конфликтах интересов и исследование финансирования. </li></ol>

<table><tbody><tr><td>Хирургические ножницы (для разреза кожи)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>2 пинцета Dumont (медицинский №5, прямой кончик)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>Пружинные ножницы (по Ваннасу)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Пинцет для наложения микрозажимов</td><td>Fine Science Tools</td><td>00072-14</td><td></td></tr><tr><td>Микрососудистый зажим (например, S&amp;amp;G B1-V)</td><td>Fine Science Tools</td><td>00396-01</td><td>Также возможен Serrefine</td></tr><tr><td>2 гемостата по Хартману</td><td>Fine Science Tools</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Иглодержатель (по Олсену-Хегару или другой)</td><td>Fine Science Tools</td><td>12002-14</td><td></td></tr><tr><td>Стандартный анатомический пинцет (для закрытия раны)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11000-12</td><td></td></tr><tr><td>Шовный материал 5/0</td><td>Suprama</td><td></td><td>для лигатуры сосудов</td></tr><tr><td>Шовный материал 6/0</td><td>Suprama</td><td></td><td>для шва кожи, также возможен 5/0</td></tr><tr><td>Лидокаин (например, Xylocain Gel 2%)</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>или другое местное обезболивающее</td></tr><tr><td>Диссекционный микроскоп (стереомикроскоп), увеличение от 6x до макс. 40x</td><td>Leica Zeiss</td><td>MZ6 Stemi2000C</td><td></td></tr><tr><td>Источник холодного света</td><td>Leica Microsystems</td><td>KL1500</td><td></td></tr><tr><td>Система нагревательного мата с обратной связью по температуре</td><td>Fine Science Tools</td><td>21052-00</td><td>С матом для мышей и малым датчиком</td></tr><tr><td>Система анестезии для изофлурана</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Изофлуран</td><td>Abott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ветеринарная камера для восстановления</td><td>Peco Services</td><td>V1200</td><td>Клетка с подогревом</td></tr><tr><td>Нейлоновая нить 8.0</td><td>Suprama</td><td>TEL181005</td><td>для покрытия</td></tr><tr><td>Скальпель</td><td></td><td></td><td>Для разрезания нити на фрагменты</td></tr><tr><td>Линейка</td><td></td><td></td><td>Для отрезания нити нужной длины</td></tr><tr><td>Xantopren M Mucosa</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Activator Universal Plus</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td>Optosil - Xantopren</td></tr><tr><td>2 пинцета Dumont (медицинский №5, прямой кончик)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>Мягкая подложка для хранения и захвата непокрытых нитей</td><td></td><td></td><td>например, тампоны, пена, &amp;#8230;</td></tr><tr><td>Емкость для вновь изготовленных нитей</td><td></td><td></td><td>например, чашка Петри, гибкая пена, &amp;#8230;</td></tr></tbody></table>

Моделирование инсульта у мышей - окклюзии средней мозговой артерии с накаливания Модель

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Инсульт является одной из наиболее частых причин смерти и инвалидности взрослого, особенно в высокоразвитых странах. Тем не менее, варианты лечения на данный момент весьма ограничены. Чтобы удовлетворить потребность в новых терапевтических подходов, экспериментальные исследования инсульта часто работают грызунов модели фокальной ишемии головного мозга. Большинство исследователей использовать постоянные или транзиторной окклюзии средней мозговой артерии (СМА) у мышей и крыс. Проксимальная окклюзия средней мозговой артерии (СМА) с помощью внутрипросветного техника наложения швов (так называемые лампы накаливания или шов модели), вероятно, наиболее часто используемые в экспериментальной модели инсульта исследований. Внутрипросветный модель MCAO имеет то преимущество, вызывающие воспроизводимых временной или постоянной ишемии территории MCA в относительно неинвазивным способом. Внутрипросветный подходы прерывание кровотока всей территории этой артерии. Накаливания окклюзии таким образом аресты поток проксимальнее lenticulo-полосатого артерий, которые снабжают базальных ганглиях. Накаливания окклюзии результаты MCA в воспроизводимых поражения в коре и полосатом теле и может быть постоянным или временным. В отличие от моделей вызывающие дистальных (для разветвления lenticulo-полосатого артерий) MCA окклюзия обычно запасных стриатуме и в первую очередь привлечь неокортекса. Кроме того, эти модели требуют удаление фрагментов костей черепа. В модели продемонстрировали в этой статье, кремния покрытая нить вводится в общей сонной артерии и передовые по внутренней сонной артерии в круг Уиллис, где она блокирует начало средней мозговой артерии. У пациентов, окклюзии средней мозговой артерии являются одними из наиболее частых причин ишемического инсульта. Так как различные ишемические интервалы могут свободно выбираться в этой модели в зависимости от момента времени реперфузии ишемического повреждения различной степени тяжести могут быть произведены. Реперфузии путем удаления окклюзии нити по крайней мере частично моделей восстановление кровотока после спонтанного или терапевтического (ТАП) лизис сгустка тромбоэмболических у людей. В этом видео мы представим базовую технику, а также основных проблем и вмешивающиеся факторы, которые могут ограничить прогностическая ценность этой модели.

Нитчатые окклюзии средней мозговой артерии общую модель для изучения ишемического инсульта у мышей.

Инсульт является одной из наиболее частых причин смерти и инвалидности среди взрослого населения, особенно в высокоразвитых странах. Однако доступные на сегодняшний день варианты лечения...

Общая цель данной процедуры — создание мышиной модели очаговой ишемии головного мозга путем перекрытия средней мозговой артерии с помощью интралюминальной нити. Для этого выполняется срединный разрез шеи с последующей визуализацией общей сонной артерии. Следующим этапом является наложение лигатур на общую сонную артерию; для их фиксации и предотвращения кровотечения используются зажимы на внешней сонной артерии.Заключительным этапом процедуры является введение филамента в виллизиев круг. Это приводит к перекрытию ветви средней мозговой артерии и, в конечном итоге, к возникновению неврологического дефицита. В результате окклюзию можно определить по изменению поведения.Одним из основных преимуществ окклюзии проксимального отдела средней мозговой артерии (СМА) с помощью метода филамента является высокая воспроизводимость поражений в стриатуме и коре. Ишемия может быть как перманентной, так и транзиторной; кроме того, поскольку данный метод не требует краниэктомии, окклюзия СМА с использованием филамента может считаться относительно неинвазивной. Как правило, специалисты, впервые применяющие этот метод, сталкиваются с трудностями из-за сложности микрохирургических манипуляций. Перед началом процедуры подготовьте филамент, разрезав под микроскопом нейлоновую нить диаметром 8.0 на отрезки длиной 11 мм.Кончик нити должен быть полностью и равномерно покрыт силиконовой смесью на протяжении восьми миллиметров; для достижения оптимальных результатов рекомендуется использовать стандартные операционные процедуры. Тип используемых мышей зависит от целей исследования. Как правило, возраст мышей должен составлять более 10 недель.Используйте соответствующие анестетики, согласовав их выбор с ветеринарным персоналом. Во время операции поддерживайте температуру тела мышей на уровне около 36.5 °C с помощью нагревательной пластины; подготовьте операционное поле, продезинфицируйте кожу и окружающий шерстью участок, и дайте им высохнуть. Выполните срединный разрез вдоль шеи и осторожно разведите мягкие ткани в стороны.Левую общую сонную артерию осторожно выделяют, освобождая от окружающих нервов, не повреждая блуждающий нерв, и накладывают лигатуру с помощью шовного материала размера 5.0–7.0. Затем изолируют левую наружную сонную артерию и завязывают второй узел. После выделения левой внутренней сонной артерии вокруг нее накладывают слабый узел.С использованием филамента 6.0 узел будет затянут позже в ходе процедуры. После достижения хорошего обзора левой внутренней сонной артерии и левой нёбно-подъязычной артерии обе артерии перекрывают зажимом для подготовки к введению филамента. В общей сонной артерии до ее бифуркации делается небольшое отверстие.Ранее подготовленную мононить вводят в артерию. Пережатые артерии раскрывают, в то время как нить вводят во внутреннюю сонную артерию. Для окклюзии средней мозговой артерии затягивают третий узел на внутренней сонной артерии.Для фиксации нити в заданном положении нанесите лидокаин-гель местно на рану для обезболивания. При проведении ложных операций нить вводят и сразу же извлекают для обеспечения мгновенной реперфузии, после чего подкожно вводят 0,5 milliliters физиологического раствора для восполнения объема жидкости. Чтобы изучить эффекты реперфузии, развяжите третий узел и удалите нить.Спустя определенный период времени после ишемии, обычно через 30–60 минут. В данном примере реперфузия проводится через 60 минут после окклюзии путем введения второй восстанавливающей объем инъекции физиологического раствора. В завершение укоротите оставшиеся нити и зашейте кожу хирургическим швом.Поместите животных в подогреваемую клетку на два часа для восстановления после операции; ежедневно проверяйте животных на наличие признаков дискомфорта. После операции может наблюдаться потеря веса, поэтому мышам следует предоставлять размягченный корм, помещенный в чашку Петри на дне клетки, чтобы стимулировать прием пищи.Корм заменяют ежедневно в течение семи дней. Продолжительность ограничения кровотока может приводить к различиям в двигательном и поведенческом дефиците. После 30 или 60 минут ишемии головного мозга у большинства животных наблюдается снижение сопротивления.Впоследствии наблюдаются толчки вперед и кружение из-за нарушения локомоции; при менее выраженных поражениях проявляется сгибательная позиция передних конечностей. Эти легко наблюдаемые признаки могут быть использованы в качестве базовой оценки успешности операции. Полученное поражение можно оценить с помощью гистологии или магнитно-резонансной томографии.Как показано здесь, 60-минутная окклюзия средней мозговой артерии вызывает паннекроз тканей в области, охватывающей как стриатум, так и кору, тогда как 30-минутная ишемия приводит преимущественно к гибели нейронов, ограниченной стриатумом. Опытные хирурги, выполняющие MCAO, могут освоить эту технику за 10 минут. При выполнении данной процедуры важно помнить о необходимости соблюдения стандартных операционных процедур для обеспечения воспроизводимости результатов и контроля сопутствующих факторов.

modeling-stroke-mice-middle-cerebral-artery-occlusion-with-filament

Research

JoVE Journal

Medicine

Медицина

Мы демонстрируем в видео способе получения окклюзии средней мозговой артерии у взрослых мышей использования внутрипросветного мононити. Мы также показываем, как оценить степень инфаркт мозга по 2,3,5-triphenyltetrazolium хлорида (ТТК) окрашивания.

Мышь модели окклюзии средней мозговой артерии

Внутрипросветный средней мозговой артерии (MCAO) модель является наиболее часто используемой моделью среди экспериментальных моделях ишемического инсульта. Здесь мы покажем всей модели в деталях с проводником лазерной доплеровской флоуметрии, и результаты ее представитель.

Внутрипросветный средней мозговой артерии (MCAO) Модель развития ишемического инсульта с лазерной допплеровской флоуметрии Руководство у мышей

Это видео описывает процедуру развития транзиторного инсульта на мышиной модели с использованием окклюзии средней мозговой артерии на основе силиконовой нити. Разработанная модель имитирует человеческий инсульт, тем самым помогая исследовать новые терапевтические стратегии для лечения инсульта.

Модель транзиторного инсульта на основе вставки филамента: хирургическая процедура для выполнения окклюзии средней мозговой артерии в головном мозге мышей

Различные мышиные модели окклюзии средней мозговой артерии (MCAO) широко используются в экспериментальных исследованиях мозга. Здесь мы демонстрируем модель транскраниальной постоянного дистальной MCAO который производит последовательную корковой инфаркт размером, соответствующим повреждения, введенного большинства ишемических инсультов человека.

Моделирование Ход у мышей: Постоянный Коагуляция артерии Дистальный средней мозговой

Для того, чтобы понять патофизиологию инсульта, важно использовать надежные модели. Эта статья будет описывать один из наиболее часто используемых моделей инсульта у мышей, называемая мозговая закупорка артерии (МСАО) модель среднего (также называемый внутрипросветного нить или шовный модель) с реперфузией.

Хирургический подход к средней мозговой артерии Окклюзия и Реперфузии Индуцированные инсульта у мышей

Инсульт является глобальной проблемой с минимальными вариантами лечения и отсутствием текущей клинической терапии для регенерации потерянной ткани мозга. Здесь описаны методы создания точного фототромботического инсульта в моторной коре грызунов и последующего введения гидрогелевых биоматериалов для изучения их влияния на регенерацию тканей после инсульта.

Инъекция гидрогелевых биоматериальных каркасов в мозг после инсульта

Различные модели окклюзии средней мозговой артерии (MCAo) используются в экспериментальных исследованиях инсульта. Здесь описана экспериментальная модель инсульта транзиторного MCAo через наружную сонную артерию (ECA), целью которой является имитация инсульта человека, при котором цереброваскулярный тромб удаляется из-за спонтанного лизиса сгустка или терапии.

Моделирование инсульта у мышей: транзиторная окклюзия средней мозговой артерии через наружную сонную артерию

Этот протокол демонстрирует уникальную модель инсульта мыши с инфарктом средних размеров и отличной выживаемостью. Эта модель позволяет исследователям доклинического инсульта увеличивать продолжительность ишемии, использовать старых мышей и оценивать долгосрочные функциональные результаты.

Модифицированная транскраниальная модель окклюзии средней мозговой артерии для изучения исходов инсульта у пожилых мышей

Данный протокол описывает модель транзиторной фокальной ишемии головного мозга у мышей через внутрипросветную окклюзию средней мозговой артерии. Кроме того, показаны примеры оценки результатов с использованием магнитно-резонансной томографии и поведенческих тестов.

Модель транзиторной окклюзии средней мозговой артерии при инсульте

Этот протокол описывает процесс подготовки к реперфузии окклюзии средней мозговой артерии через общую сонную артерию.

Модифицированная модельная подготовка для реперфузии окклюзии средней мозговой артерии

Узнайте метод окклюзии средней мозговой артерии у мышей с помощью внутрисосудистой нити для моделирования ишемического инсульта. Этот подход позволяет изучать неврологические дефициты и гистологические изменения в мозге.

Моделирование инсульта у мышей - окклюзии средней мозговой артерии с накаливания Модель

Больше видео