Анализ штрих-кодирования для фенотипической и функциональной характеристики иммунных клеток
Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 5:42 мин. • July 8th, 2025
Начните с тестовых образцов, содержащих стимулированные и фиксированные иммунные клетки.
Стимуляция индуцирует экспрессию специфических маркеров в клетках, в то время как фиксация сохраняет фенотипические маркеры, включая антигены клеточной поверхности, и маркеры функционального состояния, включая цитокины.
Добавьте в каждый образец уникальную комбинацию антител, конъюгированных с изотопами тяжелых металлов.
Этот метод позволяет уникальным образом штрихкодировать несколько образцов, различая каждый образец по комбинации изотопов тяжелых металлов.
Антитела связываются с общим эпитопом, штрих-кодируя все клетки в образцах.
Объедините все образцы со штрихкодами в одной пробирке для последующей обработки.
Добавьте коктейль из конъюгированных с металлом антител к окрашиванию поверхностных антигенов.
Добавьте буфер для пермеабилизации для повышения проницаемости клеточной мембраны для внутриклеточного окрашивания.
Добавьте еще один набор металлоконъюгированных антител для окрашивания внутриклеточных цитокинов.
Штрихкодирование позволяет одновременно окрашивать и получать объединенные образцы с помощью массовой цитометрии. Этот метод максимизирует эффективность анализа, улучшая оценку мар
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео