Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:28 мин. • April 28th, 2025
Поместите срез мозга мыши в перфузионную камеру, содержащую aCSF, под двухфотонный микроскоп.
Мышь генетически спроектирована для экспрессии GFP в микроглии, что позволяет отслеживать движения микроглии.
Закрепите ломтик держателем.
Используя светлопольное освещение, найдите интересующую область.
Переключитесь на флуоресцентное освещение, чтобы визуализировать микроглию.
Наполните микропипетку тестируемым составом, установите ее на держатель шприца и опустите, чтобы коснуться среза.
Активируйте двухфотонный режим визуализации, фокусируя низкоэнергетический свет ближнего инфракрасного диапазона в ткани.
В фокусной точке лазера два фотона объединяют свою энергию для возбуждения GFP, излучая флуоресценцию.
Захватывайте изображения в нескольких Z-плоскостях, чтобы сосредоточиться на процессах микроглии.
Запишите базовую активность, затем введите соединение и продолжите запись.
Соединение связывается с рецепторами микроглии, запуская сигнальные пути, которые стимулируют распространение микроглиального отростка к источнику соединения.
Отслеживайте увеличение флуоресценции вблизи места инъекции с течением времени, чтобы отслеживать движение.
30 минут до начала записи, подключите перистальтический н
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео