Протокол для множественного нокаута гена в мышиных органоидах малого кишечника Использование CRISPR-конкатэмера

20.9K просмотров

Цитируется: 18

11:53 мин.

12 июля 2017 г.

10.3791/55916-v

12 июля 2017 г.

20.9K просмотров

Alessandra Merenda¹^,² , Amanda Andersson-Rolf¹^,² , Roxana C. Mustata¹ , Taibo Li¹ , Hyunki Kim³ , Bon-Kyoung Koo¹^,²

¹Wellcome Trust - Medical Research Council Stem Cell Institute, University of Cambridge, ²Department of Genetics, University of Cambridge, ³Department of Pathology, Yonsei University College of Medicine

В этом протоколе описаны этапы клонирования нескольких однонаправленных РНК в один направляющий вектор-конкатенатор РНК, который особенно полезен при создании нокаутов с несколькими генами с использованием технологии CRISPR / Cas9. Появление двойных нокаутов в органоидах кишечника показано как возможное применение этого метода.