Culture organotypique de Retina lapin adulte
Summary
Cet article montre la dissection et l'incubation de la rétine de lapin et médiation par des particules de transfert de gènes de plasmides codant pour la GFP ou une variété de marqueurs subcellulaires dans les cellules ganglionnaires de la rétine.
Abstract
Systèmes de culture organotypiques de tissus nerveux fonctionnels sont des outils importants dans la recherche neurobiologique. Idéalement, un tel système devrait être compatible avec les techniques d'imagerie, les manipulations génétiques, et l'enregistrement électrophysiologiques. Nous présentons ici un système d'interphase simples de culture de tissu pour la rétine de lapin adulte qui ne requiert aucun équipement spécialisé et très peu d'entretien. Nous démontrons la dissection et l'incubation de la rétine de lapin et médiation par des particules de transfert de gènes de plasmides codant pour la GFP ou une variété de marqueurs subcellulaires dans les cellules ganglionnaires de la rétine. Rétines de lapin cultivés de cette manière peut être gardé en vie pendant 6 jours avec très peu de changements de la structure anatomique globale ou la morphologie de l'individu ganglionnaires et cellules amacrines.
Protocol
Discussion
1. Que puis-je faire avec cette méthode?
- Voir la morphologie cellulaire clairement.
- Cellules Label pour enregistrer à partir d'eux.
- Surexpriment les protéines, comme PSD95, mais également d'autres protéines qui modulent la réponse de la cellule, par exemple, les canaux ioniques, les récepteurs.
- Express ARN inhibiteurs.
2. Combien de temps puis-je conserver la rétine adulte?
- 4 jours n'est pas un problème pour le lapin adulte. Après six jours les cellu…
References
- Landreth, . B. W., Agranoff, N. R., Smalheiser, S. M., Crain, M. B., Bornstein, R., Adler, P. J., Magistretti, A. G., Hyndman, W. J., Shoemaker, H., Rehm, T., Schafer, H., Betz, S. U., Kim, H., Takahashi, A. R., Caffe, A., Soderpalm, T., van Veen, H. C., Wong, S., Thompson, D. Y., Yu, S. J., Cringle, V. A., Alder, S. J., Taylor, G. M., Seigel, A. R., Caffe, P., Ahuja, B., Holmqvist, S., Azadi, J., Forsell, I., Holmqvist, J., Hatakeyama, R., Kageyama, S. S., Zhang, X. Y., Fu, C. J., Barnstable, S. W., Wang, X., Mu, W. J., Bowers, W. H., Klein, T., Inoue, M., Hojo, Y., Bessho, Y., Tano, J., Lee, R., Kageyama, A., Kretz, S. H., Hermening , S., Isenmann , I., Liljekvist-Larsson, K., Johansson, B., Reidel, W., Orisme, T., Goldmann, W. C., Smith, U., Wolfrum, H., Xin, J. A., Yannazzo, R. S., Duncan, E. V., Gregg, M., Singh, P., Koulen, S. A., Johnston, D. C., Tang, D. C., Lo, A. K., McAllister, K. a. t. z., LC, L. E., Rajagopalan, J. S., Malter, A. K., McAllister, W. -. B., Gan, J., Grutzendler, W., Wong, R., Wong, J., Lichtman, H., Sato, S., Hattori, S., Kawamoto, I., Kudoh, A., Hayashi, I., Yamamoto, G., Zhang, M. E., Selzer, R. L., Sohn, M. T., Murray, K., Schwarz, J., Nyitray, P., Purray, A. P., Franko, J. A., O’Brien, M., Holt, G., Whiteside, S. C., Lummis, M. H., Hastings, L., Klimaschewski, W., Nindl, M., Pimpl, P., Waltinger, K., Pfaller, P., Kettunen, J., Demas, C., Lohmann, N., Kasthuri, Y., Gong, R. O., Wong, N., Gamper, M. S., Shapiro, M. J., Wirth, P., Wahle, J., O’Brien, S. C., Lummis, A. M., Benediktsson, S. J., Schachtele, S. H., Green, M. E., Dailey, L., Chow, E. M., Levine, T. A., Reh, R. L., Rockhill, F. J., Daly, M. A., MacNeil, S. P., Brown, R. H., Masland, W., Sun, N., Li, S., He, W., Sun, N., Li, S., He, R. C., Stacy, R. O., Wong, E., Strettoi, V., Pignatelli, C., Rossi, V., Porciatti, B., Falsini, V., Pignatelli, E., Strettoi, V. P., Connaughton, D., Graham, R., Nelson, P. H., Edqvist, F., Hallbook, T. C., Jakobs, R. T., Libby, Y., Ben, S. W., John, R. H., Masland, Y., Qin, G., Xu, W., Wang, R., Roizenblatt, J. D., Weiland, S., Carcieri, G., Qiu, M., Behrend, M. S., Humayun, A., Koizumi, G., Zeck, Y., Ben, R. H., Masland, T. C., Jakobs, Explant culture of adult goldfish retina: a model for the study of CNS regeneration. Brain Res. 161, 39-55 (1979).
