Summary

वयस्क खरगोश रेटिना के Organotypic संस्कृति

Published: April 29, 2007
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Summary

यह आलेख विच्छेदन और खरगोश रेटिना और GFP या रेटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं में subcellular मार्करों के एक किस्म एन्कोडिंग plasmids के कण मध्यस्थता जीन स्थानांतरण के ऊष्मायन को दर्शाता है.

Abstract

कार्यात्मक तंत्रिका ऊतकों की Organotypic संस्कृति प्रणालियों neurobiological अनुसंधान में महत्वपूर्ण औजार हैं. आदर्श रूप में, एक ऐसी प्रणाली इमेजिंग तकनीक, आनुवंशिक हेरफेर, और electrophysiological रिकॉर्डिंग के साथ संगत होना चाहिए. यहाँ हम वयस्क खरगोश रेटिना है कि कोई विशेष उपकरण और बहुत कम रखरखाव की आवश्यकता है के लिए एक सरल interphase टिशू कल्चर प्रणाली मौजूद है. हम विच्छेदन और खरगोश रेटिना और GFP या रेटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं में subcellular मार्करों के एक किस्म एन्कोडिंग plasmids के कण मध्यस्थता जीन स्थानांतरण के ऊष्मायन प्रदर्शित करता है. खरगोश retinas सुसंस्कृत इस तरह जिंदा लिए समग्र शारीरिक संरचना के बहुत कम परिवर्तन या व्यक्ति की आकारिकी नाड़ीग्रन्थि और amacrine कोशिकाओं के साथ छह दिनों तक रखा जा सकता है.

Protocol

बनाना जीन बंदूक बुलेट (स्वर्ण) 100% EtOH में 100X PVP (0.5mg/ml) बनाओ. BioRad 1.6 माइक्रोन microcarrier सोने की 30mg वजन और यह एक 1.5 मिलीलीटर Eppendorf ट्यूब में जगह. 0.5-3 μg प्लाज्मिड / मिलीग्राम सोने के एक एकाग्रता दे की जरूरत प्लाज्मिड क…

Discussion

1. मैं इस विधि के साथ क्या कर सकते हैं?

  • सेल आकारिकी स्पष्ट रूप से देखें.
  • लेबल करने के लिए उन से रिकॉर्ड कोशिकाओं.
  • Overexpress प्रोटीन PSD95 की तरह, लेकिन यह भी अन्य प्रोटीन है कि सेल प्रतिक्रिया मिलाना, जैसे आयन च?…

References

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Cite This Article
Lye, M. H., Jakobs, T. C., Masland, R. H., Koizumi, A. Organotypic Culture of Adult Rabbit Retina. J. Vis. Exp. (3), e190, doi:10.3791/190 (2007).

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