En<em> In vivo</em> Imaging System används för att generera kvantitativa mätningar av murina infektion med Trypanosomatid protozo<em> Leishmania</em>. Detta är en icke-invasiv och icke-dödliga metod för att upptäcka parasiter uttrycka luciferas inom många vävnader under hela kroniska<em> Leishmania</em> SPP. infektion.
Distinkta arter av<em> Leishmania,</em> En protozo parasit i familjen<em> Trypanosomatidae</em>, Typiskt orsaka olika sjukdomar hos människan manifestationer. De vanligaste formerna av sjukdomen är visceral leishmaniasis (VL) och kutan leishmaniasis (CL). Musmodeller av leishmaniasis används allmänt, men kvantifiering av parasiten bördor under murina sjukdom kräver möss att avlivas vid olika tillfällen efter infektion. Parasit laster därefter mäts antingen med mikroskopi, begränsa utspädningen analys, eller qPCR amplifiering av parasitens DNA. Den<em> In vivo</em> Imaging System (IVIS) har ett integrerat programpaket som gör det möjligt att upptäcka en självlysande signal i samband med celler i levande organismer. Både för att minimera djurens användning och följa infektionen längden hos individer, in vivo-modeller för imaging<em> Leishmania</em> SPP. orsakar VL eller CL etablerades. Parasiter var konstruerad för att uttrycka luciferas, och dessa infördes i möss antingen intradermalt eller intravenöst. Kvantitativa mätningar av luciferas drivande mareld av transgena<em> Leishmania</em> Parasiter inom musen gjordes med hjälp IVIS. Individuella möss kan avbildas flera gånger under longitudinella studier, tillåter oss att bedöma mellan djur variation i den inledande experimentella parasit inokulat, och bedöma uppförökning av parasiter i mus vävnader. Parasiter upptäcks med hög känslighet vid kutan platser. Även om det är mycket troligt att signalen (fotoner / sekund / parasit) är lägre i djupare inre organ än huden, men kvantitativa jämförelser av signaler i ytlig respektive djup webbplatser som inte har gjorts. Det är möjligt att parasiten tal mellan kropp webbplatser inte direkt kan jämföras, men parasit belastningar i samma vävnader kan jämföras mellan möss. Exempel på en visceralizing arter (<em> L. infantum chagasi</em>) Och en art som orsakar kutan leishmaniasis (<em> L. Mexicana</em>) Visas. Det IVIS förfarande kan användas för att övervaka och analysera små djurmodeller av en mängd olika<em> Leishmania</em> Arter orsakar olika former av mänsklig leishmaniasis.
In vivo imaging-system (IVIS) ger en metod för hela djuret avbildning eller in vivo imaging experimentell infektion modeller av olika former av leishmaniasis. 18,16 Den Leishmania spp.. parasiter kan vara konstruerad för att uttrycka eldfluga luciferas på en nivå som upptäcks in vivo med IVIS bildteknik. En av de stora fördelarna med denna metod är att det tillåter icke-invasiv visualisering av Leishmania spp.. inuti levande djur värd. Denna metod har till…
The authors have nothing to disclose.
Detta arbete har finansierats delvis av en Merit Review bidrag från Department of Veterans Affairs, genom NIH anslag AI045540, AI067874, AI076233-01 och AI080801 (MEW), och genom AI29646 (SMB). Arbetet utfördes delvis under finansiering av CT och JG genom NIH T32 AI07511.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
D-Luciferin Potassium Salt | Reagent | Caliper LifeSciences (Formerly Xenogen) | 122796 | |
IVIS Imaging System 200 Series | Equipment | Caliper LifeSciences | Other IVIS models that can be used include: Lumina II, Lumina XR, Kinetic, and Spectrum. |