In deze video, Nijole Jasinskiene toont de methoden die gebruikt worden om transgene Aedes aegypti muggen, die vectoren voor knokkelkoorts te genereren. De technieken voor het correct opstellen van micro-injectie naalden, droogmiddelen embryo's en het uitvoeren van micro-injectie worden aangetoond.
Abstract
In deze video, Nijole Jasinskiene toont de methoden die gebruikt worden om transgene Aedes aegypti muggen, die vectoren voor knokkelkoorts te genereren. De technieken voor het correct opstellen van micro-injectie naalden, droogmiddelen embryo's en het uitvoeren van micro-injectie worden aangetoond.
Protocol
Voorbereiding van de micro-injectie Bloed te voeden muggen: voor injectie van maandag tot vrijdag voeden vrouwen op de vorige donderdag. Bereid glas naalden met behulp van het programma 3 of 2 (zie ook Materiaal). Leggen buis voor de embryo's is Drosophila cultuur flacon. Natte watten in de bodem, met een natte schijf van filtreerpapier te bedekken. Bereid plastic dekglas door steken dubbelzijdig tape om het ene uiteinde. Trim tape om dekglas, zodat het eindigt aan de rand va…
Prepared by drawing capillary tubing into a fine 3-8 um with a shaft of approximately 100-300 um micropipette puller. When the needle is new, the tip is sealed and usually breaks in the first or second injection or the glass needle tip can be beveled using a Brown type micro-pipette beveller (Sutter Instrument).
Aedes aegypti
Animal
Male and female mosquitos, to obtain embryos.
Drosophila culture vial
For mosquito egg-laying.
Halocarbon oil
Reagent
Oil for desiccation: Halocarbon oil 700:Halocarbon oil 27(1:1)
Jasinskiene, N., Juhn, J., James, A. A. Microinjection of A. aegypti Embryos to Obtain Transgenic Mosquitoes. J. Vis. Exp. (5), e219, doi:10.3791/219 (2007).