Dans cette vidéo, Nijole Jasinskiene démontre la méthodologie employée pour générer transgéniques moustiques Aedes aegypti, vecteurs de la dengue. Les techniques pour la préparation correcte des aiguilles de microinjection, desséchants embryons, et effectuant la microinjection sont démontrés.
Abstract
Dans cette vidéo, Nijole Jasinskiene démontre la méthodologie employée pour générer transgéniques moustiques Aedes aegypti, vecteurs de la dengue. Les techniques pour la préparation correcte des aiguilles de microinjection, desséchants embryons, et effectuant la microinjection sont démontrés.
Protocol
Préparation à l'avance de la microinjection Moustiques nourrissent de sang: pour l'injection du lundi au vendredi femelles se nourrissent sur le jeudi précédent. Préparer des aiguilles de verre en utilisant le programme 3 ou 2 (voir matériaux). Pose du tube pour le flacon de culture des embryons est la drosophile. Coton humide dans le fond, avec un disque de papier filtre humide qui la recouvre. Préparer lamelle en plastique en collant double-face de la cassette à…
Prepared by drawing capillary tubing into a fine 3-8 um with a shaft of approximately 100-300 um micropipette puller. When the needle is new, the tip is sealed and usually breaks in the first or second injection or the glass needle tip can be beveled using a Brown type micro-pipette beveller (Sutter Instrument).
Aedes aegypti
Animal
Male and female mosquitos, to obtain embryos.
Drosophila culture vial
For mosquito egg-laying.
Halocarbon oil
Reagent
Oil for desiccation: Halocarbon oil 700:Halocarbon oil 27(1:1)
Jasinskiene, N., Juhn, J., James, A. A. Microinjection of A. aegypti Embryos to Obtain Transgenic Mosquitoes. J. Vis. Exp. (5), e219, doi:10.3791/219 (2007).