In questo video, Nijole Jasinskiene dimostra la metodologia utilizzata per generare transgenici zanzare Aedes aegypti, che sono vettori per la febbre dengue. Le tecniche per la corretta preparazione di aghi microiniezione, disidratanti embrioni, e l'esecuzione di microiniezione sono dimostrati.
Abstract
In questo video, Nijole Jasinskiene dimostra la metodologia utilizzata per generare transgenici zanzare Aedes aegypti, che sono vettori per la febbre dengue. Le tecniche per la corretta preparazione di aghi microiniezione, disidratanti embrioni, e l'esecuzione di microiniezione sono dimostrati.
Protocol
Preparazione in anticipo di microiniezione Zanzare alimentazione del sangue: per iniezione da Lunedi a Venerdì femmine alimentare sul precedente Giovedi. Preparare gli aghi di vetro utilizzando il programma di 3 o 2 (vedi Materiali). Posa tubo per gli embrioni è fiala cultura Drosophila. Cotone idrofilo bagnato in fondo, con un disco di carta da filtro umida che lo ricopre. Preparare antiscivolo in plastica di copertura da attaccare a doppio lato del nastro ad una estremità. T…
Prepared by drawing capillary tubing into a fine 3-8 um with a shaft of approximately 100-300 um micropipette puller. When the needle is new, the tip is sealed and usually breaks in the first or second injection or the glass needle tip can be beveled using a Brown type micro-pipette beveller (Sutter Instrument).
Aedes aegypti
Animal
Male and female mosquitos, to obtain embryos.
Drosophila culture vial
For mosquito egg-laying.
Halocarbon oil
Reagent
Oil for desiccation: Halocarbon oil 700:Halocarbon oil 27(1:1)
Jasinskiene, N., Juhn, J., James, A. A. Microinjection of A. aegypti Embryos to Obtain Transgenic Mosquitoes. J. Vis. Exp. (5), e219, doi:10.3791/219 (2007).