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Biology

Principes de la chirurgie des rongeurs pour le nouveau chirurgien

doi: 10.3791/2586 Published: January 6, 2011

ERRATUM NOTICE

Summary

Avant de tenter la chirurgie, un nouveau chirurgien doit avoir une formation de base en techniques chirurgicales et des concepts. Cet article présente les considérations chirurgicales de base avec un accent sur les rongeurs.

Abstract

Pour des raisons de bien-être à la fois scientifique et animale, la formation dans les concepts de base et des techniques chirurgicales doivent être entrepris avant que cherche toujours à opérer un rongeur. Les étudiants, post-doctorants, et autres personnes intéressées à pratiquer des interventions chirurgicales sur des rongeurs dans le cadre d'un protocole de recherche peut ne pas avoir eu de formation en chirurgie formelle dans le cadre de leurs cours requis. Chirurgie soi est une compétence technique, et qui va s'améliorer avec la pratique. Les principes de l'asepsie, cependant, restent souvent inexpliquée ou ignorante. Pour la plupart des nouveaux chirurgiens, cette information vitale est présenté de manière fragmentaire ou appris sur le tas, ni de ce qui est idéal. Il peut également faire apprendre à effectuer une chirurgie particulièrement difficile, comme le nouveau chirurgien est d'apprendre à la fois une technique chirurgicale et les principes de l'asepsie au même moment. Cet article résume et fait des recommandations pour les compétences de base en chirurgie et les techniques nécessaires pour la chirurgie des rongeurs réussie. Cet article est destiné à compléter la formation pratique par l'institution de l'utilisateur.

Protocol

1. Avant de pratiquer la chirurgie, sachez qu'il ya des exigences légales et éthiques autour de l'utilisation des animaux en recherche et en enseignement

  1. Toutes les interventions chirurgicales doivent être approuvés par l'autorité locale éthiques ou juridiques (IACUC ou comité d'éthique ou le bureau d'accueil, etc.)
  2. Assurez-vous que cette approbation est en place avant de commencer.
  3. S'il ya une question de l'approbation pour une chirurgie ou d'approbation pour l'utilisation des animaux, ne continuez pas.

2. Comprendre les règles d'asepsie

  1. Stérilité comme un concept
    1. L'objectif de la technique aseptique est de réduire ou d'éliminer autant que possible la charge normale bactériennes présentes sur l'animal et l'environnement avant le début de la chirurgie. Cela signifie que les instruments sont stérilisés, la surface de travail chirurgical est désinfectée, et l'animal et les mains du chirurgien sont désinfectés.
    2. La chirurgie, réalisée correctement, n'a pas besoin d'antibiotiques à titre prophylactique ou tout autres traitements, autres que le soulagement de douleur.
    3. Même avec une excellente technique aseptique, les bactéries provenant de la réserve chirurgicale peut encore être introduite dans une plaie chirurgicalement créé. Technique aseptique appropriée limite le risque d'introduction d'agents infectieux, principalement des bactéries, dans des sites chirurgicaux.
  2. Champ stérile
    1. Le champ stérile englobe la zone chirurgicale, la zone préparée sur l'animal, et le front du chirurgien.
  3. Ruptures dans la stérilité
    1. Ruptures dans la stérilité se produire lorsque le chirurgien touche quelque chose en dehors du champ stérile. C'est peut-être son visage, un luminaire, un espace dépourvu de l'animal, ou un instrument non-stérile.
    2. C'est la raison antibiotiques prophylactiques peuvent être utilisés.
    3. Rappelez-vous, une activité spéciale se déroule. Soyez calme, réfléchi et précis.

3. Préparation pour la chirurgie

  1. La chirurgie des rongeurs ne nécessite pas une suite dédiée chirurgicale. Idéalement, les cabinets doivent être menées dans une zone séparée dans un laboratoire, comme un capuchon ou hotte à flux laminaire. Peu importe, la zone choisie doit être bien rangé, bien éclairé, et hors de la circulation. Chirurgies rongeurs sont souvent menées sur une paillasse de laboratoire. Avant de faire de la zone chirurgicale, nettoyer la paillasse bien avec un désinfectant.
  2. Il est utile pour le chirurgien d'avoir un assistant. Cet assistant peut aider à l'anesthésie, la préparation des animaux, et suivi du recouvrement. Cela permet au chirurgien de se préparer alors que les animaux sont préparés, raccourcissant ainsi le temps de l'animal sous anesthésie, et peut-être permettant plus de chirurgies à effectuer.
  3. Disposer de la zone chirurgicale afin qu'il existe trois zones distinctes: la préparation, la chirurgie et la récupération.
  4. Pour la zone de préparation, d'assembler les fournitures nécessaires:
    1. Pommade ophtalmique lubrifiante
    2. Tondeuses ou rasoirs
    3. Gaze
    4. Lavage chirurgical des solutions
      1. Lavage chirurgical des solutions couramment utilisés sont les iodophores ou chlorhexidine /
      2. 70% d'alcool isopropylique est également utilisé dans le cadre du lavage chirurgical.
  5. Pour la zone chirurgicale, d'assembler et d'organiser les fournitures nécessaires.
    1. Source de chaleur pour garder au chaud le rongeur
      1. La source de chaleur idéale est un tampon de recirculation d'eau de chauffage. Coussins chauffants électriques ne sont pas acceptables pour la chirurgie. Les gants chirurgicaux rempli d'eau chaude, ou chauffe-mains chimiques peuvent également être utilisés. Si l'une de ces deux derniers sont utilisés, la température de l'objet doit être soigneusement contrôlée pendant la chirurgie.
    2. Plate-forme de chirurgie
      1. Cela peut être une compresse stérile étanche placé au-dessus de la source de chaleur.
    3. Fournitures jetables
      1. Ceux-ci peuvent inclure: les draps chirurgicaux stériles, de la gaze, des applicateurs de coton, de fluides pour l'administration à le rongeur, solution d'irrigation des tissus.
    4. Instruments stériles
      1. Le complément d'instruments varient en fonction de la chirurgie, mais comprennent généralement des bistouris, des écarteurs tissus, pinces, pinces hémostatiques et ciseaux.
      2. Stérilisateur à l'instrument ou de la stérilisation solution si les mêmes instruments sont utilisés sur plus d'un sujet de chirurgie
        1. L'utilisation d'un stérilisateur à billes chaude pour stériliser les instruments entre les animaux est courante.
    5. Matériel pour fermer l'incision chirurgicale.
      1. Les matériaux utilisés dépendront du site opératoire et de l'application, mais peuvent inclure: suture et d'aiguilles, des agrafes et un applicateur de base, ou de la colle tissulaire
    6. Tout autre équipement spécial nécessaire (appareil de stéréotaxie, les implants, microscope opératoire)

4. Préparer les instruments pour la chirurgie

  1. Les instruments doivent être propres etstérile au début de l'intervention. Ceci est souvent accompli par la création de packs complets de chirurgie qui sont autoclavées.
  2. Les instruments peuvent être utilisés pendant plus d'une chirurgie de rongeurs, sans autoclavage et le remballage, mais devrait être nettoyé et stérilisé entre les rongeurs.
    1. Si un stérilisateur à chaud billes est utilisé, assurez-vous de laisser du temps pour les instruments à refroidir après stérilisation. Les instruments peuvent être refroidi par trempage dans de l'eau stérile.
    2. Stérilisants chimiques peuvent aussi être utilisés, mais ils nécessitent un temps de contact plus long (~ 10 minutes-peut être 30-60 minutes, nécessite un rinçage). L'alcool n'est pas un agent stérilisant.
  3. Disposer d'instruments sur le drapé étanche stérile dans l'ordre dans lequel elles seront utilisées.

5. Préparer l'animal pour la chirurgie

  1. Les trois choses qui sont administrés avant la chirurgie sont l'anesthésie, l'analgésie, et des antibiotiques.
    1. L'anesthésie est nécessaire pour la chirurgie. Anesthésiques peuvent être administrés par inhalation ou par injection.
      1. Anesthésiques inhalés les plus couramment utilisés actuellement l'isoflurane.
      2. La plupart des communes anesthésique injectable utilisé est une combinaison de kétamine et de xylazine, éventuellement avec un autre sédatif ajouté.
      3. Consultez votre vétérinaire personnel de l'établissement pour des dosages appropriés.
    2. Préemptive analgésiques sont recommandés et doivent être administrés avant la chirurgie commence.
      1. Communément utilisé non-stéroïdiens anti-inflammatoires comprennent flunixine et carprofène.
      2. Opioïdes disponibles peuvent inclure la buprénorphine, la morphine ou le fentanyl.
      3. Consultez votre vétérinaire personnel de l'établissement pour des dosages appropriés et les voies d'administration.
    3. Avec la chirurgie est bien menée, les antibiotiques ne sont généralement pas nécessaires, sauf pour certaines chirurgies à haut risque gastro-intestinal.
      1. Si les antibiotiques sont utilisés, utilisées fournissent en péri-opératoire (avant la première incision).
      2. Consultez votre vétérinaire pour le personnel des établissements d'antibiotiques appropriés, les posologies et voies d'administration.
  2. La préparation chirurgicale de l'incision
    1. Rasez le site d'incision. Généralement raser une zone d'environ 3 fois la taille de l'incision proposée. La taille de la zone rasée et préparée peut être limitée par la taille de l'animal ou de la zone sur l'animal.
    2. La zone rasée est désinfectée à l'aide de multiples applications de la solution de lavage chirurgical et d'alcool isopropylique. L'application est généralement lavage chirurgical d'abord, puis l'alcool. Terminez par une application finale de la solution de gommage.
    3. Récurer chirurgicale est effectuée dans un mouvement circulaire, en commençant au centre et en spirale vers l'extérieur, ou sur des animaux plus petits, d'une manière unidirectionnelle.
      1. Si frotter unidirectionnelle, placer une gaze stérile à la marge crainial de la zone rasée, qui couvre les cheveux de l'animal. Saisir et stabiliser l'animal doucement à travers la gaze stérile. Appliquer gommage solution et l'alcool unidirectionnellement loin de la gaze stérile.
  3. Déplacement à l'animal de la zone chirurgicale
    1. Déplacez l'animal avec le site préparé chirurgicale à la hausse, et sans contact avec le site préparé.
    2. Position de l'animal sur la zone chirurgicale de sorte que le site chirurgical est à la hausse, face au chirurgien.
  4. Drapage l'animal
    1. Si l'animal est drapée par l'assistant, l'assistant doit se rappeler que la surface extérieure du drapé est considéré comme une partie du champ stérile et ne doivent pas être manipulés par l'assistant. Drapage est souvent laissé au chirurgien, et le drapé est inclus dans le pack chirurgicale.
    2. Une norme drapé imperméables jetables en papier est généralement recommandée.

6. Préparation du chirurgien pour la chirurgie

  1. Préparation du chirurgien doit souligner que d'une activité spéciale aura lieu, celui dans lequel le chirurgien doit être conscient de chacun de leurs mouvements dans et hors du champ stérile.
  2. Les cheveux et le visage sont généralement couverts par un chapeau et un masque, respectivement. Ces nouvelles devraient être au début de la session chirurgicale, mais n'ont pas besoin d'être changé entre les animaux.
  3. Les chirurgiens doivent porter une blouse chirurgicale jetable, propre blouse jetable ou tout au moins un sarrau propre. Ceci n'a pas besoin d'être changé entre les animaux, mais doit être changé entre les sessions chirurgie.
  4. Les mains doivent être bien nettoyés avant la chirurgie. Les gants chirurgicaux ou de gants d'examen doit être utilisé. Si des gants d'examen sont utilisés, ils doivent être lavés avec un désinfectant chirurgicale avant d'être utilisés. Les gants doivent être changés entre les animaux.

7. Pendant la chirurgie

  1. Entretien du champ stérile.
    1. Une fois que vos mains sont stériles et le champ opératoire est stérile, vous aurez soin de se déplacer et se rappeler de ne pas briser la stérilité. Cette includes ayant un champ stérile sur lequel vous pouvez déposer les instruments, en se rappelant de ne pas vous gratter le nez, et seulement la remise au patient de chirurgie à travers le champ stérile.
  2. La manipulation des tissus
    1. Manipuler les tissus en douceur. Gardez tissus humides, surtout si la chirurgie est prolongée. Minimiser la création de poches de tissu et la dissection inutile.
    2. Une bonne manipulation des tissus réduit opportunité et les risques d'infections post-opératoires, accélère la guérison, et réduit la douleur post-opératoire.
  3. Remplacer les liquides perdus
    1. Les voies habituelles de l'administration de liquide chez les rongeurs sont sous-cutanée ou intrapéritonéale. Utilisez de petites quantités d'animaux par voie intrapéritonéale-1-2 ml petite pour les souris, par exemple.
    2. Réchauffé fluides peut aider à prévenir une baisse de la température du corps. Souris et la température corporelle du rat est plus élevé que les êtres humains, donc les fluides doivent être chauds.
  4. Maintenir la chaleur
    1. Placement d'un coussin chauffant dessous de l'animal pendant la chirurgie et la cage lors de la récupération est un moyen standard pour maintenir la température corporelle d'un animal.
      1. Attention avec coussins chauffants utiliser seulement ceux marqués pour la chirurgie. D'autres peuvent provoquer des lésions thermiques.
    2. Liquides réchauffés, intrapéritonéale, peut également aider les animaux au chaud.
  5. Microscope opératoire-peut faciliter certaines procédures (chirurgie microvasculaire, plus les chirurgiens, etc Peut également être obtenue par l'utilisation des loupes comme des loupes, etc)

8. Considérations de récupération post-opératoire

  1. Les animaux doivent récupérer sur une literie de papier à plat (serviettes en papier stérile, etc) plutôt que la norme la literie de l'élevage.
  2. Gardez l'animal au chaud. Chaleur contribuera à un prompt rétablissement. Ceci est souvent accompli en plaçant la cage de récupération demi-sur un coussin chauffant afin que les animaux peuvent choisir leur température préférée en tant qu'ils se rétablissent.
  3. Ne renvoyez pas les animaux ou les cages des animaux à la zone de détention jusqu'à ce que tous les animaux semblent normales. Tout animal qui a subi une intervention chirurgicale doit avoir retrouvé la capacité à se redresser dans la cage et être capable de se déplacer normalement, avant d'être retourné à l'aire d'attente.
  4. Surveiller les animaux en post-opératoire des signes inattendus de maladie ou d'infection. Les animaux perdent généralement une petite quantité de poids après la chirurgie, mais avec l'analgésie appropriée et la fourniture de nourriture, ils doivent reprendre le poids rapidement.

9. Surveillance post-opératoire est la partie finale de la chirurgie réussie

  1. Pour cinq à sept jours après la chirurgie, de surveiller l'état général de l'animal.
    1. En postopératoire, les animaux doivent être vif, alerte et actif. Ils doivent être en interaction avec les cagemates normalement, manger et boire, et capable d'atteindre la normale spécifiques à l'espèce des postures.
    2. Les animaux qui sont déprimés, anorexiques, ou léthargique devraient être examinés quant à la cause de ce changement. Envisager la possibilité d'une douleur non traitée ou une infection.
  2. Alimentation / fluide d'admission est également important de récupération.
    1. Il y aura une certaine baisse de la consommation hors-après la chirurgie. Ceci peut être atténué par rendre la nourriture et l'eau facile d'accès.
      1. Tubes sipper plus longue pourrait être utile.
      2. La prestation quotidienne de nourriture humide dans le fond de la cage peut également inciter les animaux à manger.
    2. Certains analgésiques dans le résultat des rats dans le pica, donc être conscients que les animaux peuvent manger les articles inappropriés (tels que la literie) à des blessures.
  3. Surveiller les animaux pour des signes d'infection à l'incision. La période de danger est les 7 premiers jours et les animaux doivent être contrôlés quotidiennement.
    1. Les signes d'infection sont la rougeur, enflure, écoulement (purulent ou séreux), la douleur, ou l'ouverture de l'incision (déhiscence).

10. Après votre chirurgie est terminée, l'étape finale consiste à évaluer le succès de votre chirurgie

  1. Était le modèle induit / pièce retirée / fonctionnalité rétablie?
  2. Y avait-il tant de douleur possible?
  3. Y avait-il pas d'infection?
  4. Succès!

Discussion

La chirurgie expérimentale sur des rongeurs est rarement effectuée par les vétérinaires ou les médecins. Au lieu de cela, il est souvent réalisée par des chercheurs biomédicaux avec peu de formation formelle ou pas dans les principes de la chirurgie et la technique aseptique. Dans un contexte de recherche, la chirurgie est généralement appris de ses collègues, eux-mêmes généralement pas formellement formés soit. Chirurgie réalisée dans le laboratoire de recherche peut également être considéré essentiellement comme une méthode de préparation d'un modèle animal dans le but de générer un ensemble d'animaux pour une étude. Alors que toute chirurgie particulier est généralement une question de coordination œil-main et l'habileté technique, les deux pouvant être acquises par la pratique, des principes et des compétences associées à la notion d'une technique aseptique (et donc la chirurgie sans infection) ne peuvent être acquises uniquement par la pratique et sont souvent pas entièrement transmis aux chercheurs.

L'absence de formation formelle dans les principes chirurgicaux peuvent conduire à un manque de compréhension de l'importance égale de la chirurgie techniquement correct et les soins pré-et post-opératoire des animaux. Examen de deux la chirurgie elle-même et les soins péri-opératoires des animaux se traduira par une augmentation de bien-être animal et la qualité des données obtenues à partir du modèle chirurgical. Par exemple, subclinique infections post-chirurgicales peuvent brouiller les résultats, comme on peut les changements de comportement et la physiologie vu avec douleur. Comme les espèces proies, la plupart des rongeurs sont étonnamment stoïque et bien souffrant de douleur post-chirurgicale ou une infection peut montrer quelques signes cliniques. Les signes subtils de la douleur ou de détresse chez les rongeurs sont encore obscurcis par un manque général de formation des chercheurs biomédicaux, en reconnaissance de ces signes chez les rongeurs. En outre, les rongeurs sont les plus actifs durant le cycle noir, lorsque le personnel ne sont généralement pas disponibles pour voir les signes cliniques et comportementales de la douleur après la chirurgie. Cette vidéo ne remplace pas la formation chirurgicale proprement dite, qui devrait idéalement être à la fois pratique et fournie par leur institution, mais est conçu pour donner aux chercheurs un aperçu des préoccupations communes et acceptées démonstration visuelle de procédures aseptiques et les techniques nécessaires pour développer une compétence minimale dans l'exercice de la chirurgie de survie chez les rongeurs.

Disclosures

Tous les auteurs travaillent pour Charles River, un des principaux fournisseurs d'animaux chirurgicalement modifiés pour la recherche.

References

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  2. Animal Welfare, 9 CFR, Parts 1, 2, and 3. Forthcoming.
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  8. Rutala, W. A. APIC guideline for selection and use of disinfectants. Am J Infect Control. 24, 313-342 (1996).

Erratum

Formal Correction: Erratum: Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.
Posted by JoVE Editors on 05/04/2011. Citeable Link.

A correction was made to Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon. The order of the authors was incorrect. The order of the authors has been changed to :

Kathleen R. Pritchett-Corning, Guy B. Mulder, Yiying Luo, William J. White

Instead of:

Kathleen R. Pritchett-Corning, Yiying Luo, Guy B. Mulder, William J. White

Principes de la chirurgie des rongeurs pour le nouveau chirurgien
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PDF DOI

Cite this Article

Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon. J. Vis. Exp. (47), e2586, doi:10.3791/2586 (2011).More

Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon. J. Vis. Exp. (47), e2586, doi:10.3791/2586 (2011).

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