Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

עקרונות של ניתוח מכרסמים למנתח חדש

doi: 10.3791/2586 Published: January 6, 2011

ERRATUM NOTICE

Summary

לפני שתנסה ניתוח, מנתח חדש צריך הכשרה בטכניקות ניתוח מושגי יסוד. מאמר זה יציג שיקולים כירורגי בסיסי בדגש על מכרסמים.

Abstract

מסיבות הרווחה הן מדעיים בעלי חיים, הכשרה כירורגית מושגים טכניקות בסיסיות צריך להתבצע לפני מתמיד המבקשים לנתח מכרסם. סטודנטים, פוסט דוקטורט מלומדים, ואחרים מעוניינים לביצוע ניתוחים מכרסמים במסגרת פרוטוקול מחקר אולי לא היתה הכשרה כירורגית פורמלי כחלק הקורסים הנדרשים שלהם. הניתוח עצמו הוא המיומנות הטכנית, ואחד שישפרו עם התרגול. העקרונות של הטכניקה aseptic עם זאת, לעתים קרובות להישאר בלתי מוסברים או untaught. עבור המנתחים החדש ביותר, מידע חיוני זה מוצג באופן הדרגתי או למדו בעבודה, אף לא אחד מהם הוא אידיאלי. היא עשויה גם לגרום ללמוד כיצד לבצע ניתוח קשה במיוחד, כמו המנתח חדש לומד גם טכניקה כירורגית עקרונות asepsis באותו זמן. מאמר זה מסכם ועושה המלצות מיומנויות בסיסיות וטכניקות כירורגיות הכרחי לניתוח מוצלח מכרסם. מאמר זה נועד להשלים את הידיים על ידי מוסד הכשרה של המשתמש.

Protocol

1. לפני ביצוע ניתוח, להיות מודע לכך יש דרישות משפטיות אתיות על השימוש של בעלי חיים במחקר ובהוראה

  1. כל הנהלים כירורגית חייב להיות מאושר על ידי הרשות אתית או משפטית מקומית (IACUC או ועדת האתיקה או משרד הפנים, וכו ').
  2. ודא אישור זה במקום לפני תחילת.
  3. אם יש שאלה של הסכמה לניתוח או אישור לשימוש בבעלי חיים, לא להמשיך.

2. הבנת שיטת אספטי

  1. עקרות כמושג
    1. מטרת הטכניקה aseptic היא לצמצם או למנוע במידת האפשר את הנטל חיידקי נורמלי הנוכחי על החיה בסביבה לפני תחילת הניתוח. משמעות הדבר היא כי הם מכשירים מעוקרות, משטח עבודה כירורגית היא לחטא, ועל בעלי חיים ידיו של המנתח הם וחיטוי.
    2. הניתוח, שבוצע כהלכה, לא צריך אנטיביוטיקה מניעתית או טיפולים אחרים, מלבד הקלה על כאב.
    3. אפילו עם טכניקה מעולה aseptic, חיידקים שמקורם בנושא כירורגית ייתכן שעדיין יהיה הציג לתוך הפצע שנוצר בניתוח. טכניקה נכונה aseptic מגביל את הסיכון של החדרת חומרים מזהמים, ובעיקר חיידקים, לתוך אתרי כירורגית.
  2. סטרילי שדה
    1. השדה הסטרילי מקיף את אזור הניתוח, האזור מוכן על החיה, ו הקדמי של המנתח.
  3. הפסקות עקרות
    1. הפסקות עקרות להתרחש כאשר המנתח נוגע משהו מחוץ לתחום סטרילית. זו עשויה להיות פניה, מתקן תאורה, אזור מוכנים של החיה, או מכשיר שאינו סטרילי.
    2. זו הסיבה אנטיביוטיקה מניעתית עשויה לשמש.
    3. זכרו, פעילות מיוחדת מתקיימת. תהיה רגוע, מתחשב, ומדויק.

3. הכנות לקראת ניתוח

  1. ניתוח מכרסמים אינו מחייב חבילת כירורגי ייעודי. באופן אידיאלי, ניתוחים צריכה להתנהל באזור נפרד בתוך מעבדה, כגון ברדס או זרימה למינרית הקבינט. בכל מקרה, את האזור הנבחר צריך להיות מסודר, מואר היטב, ומתוך זרימת התנועה. ניתוחים מכרסמים נערכים לעתים קרובות על benchtop מעבדה. לפני הסדרת תחום כירורגי, לנקות את benchtop היטב בחומר חיטוי.
  2. זה מועיל עבור המנתח להיות עוזר. עוזר זה יכול לעזור עם הרדמה, הכנת בעלי חיים, ההתאוששות ניטור. זה מאפשר המנתח להכין את עצמם בעוד בעלי חיים מוכנים, ובכך לקצר זמן של החיה תחת הרדמה, ואולי המאפשר ניתוחים נוספים שיש לבצע.
  3. מסדרים את אזור הניתוח, כך ישנם שלושה אזורים נפרדים: הכנה, ניתוח, התאוששות.
  4. באזור הכנה, להרכיב את הציוד הדרוש:
    1. עיניים סיכה משחה
    2. קליפרס או גילוח
    3. גזה
    4. לשפשף פתרונות כירורגיים
      1. פתרונות לשפשף כירורגי נפוץ הם iodophors או chlorhexidine /
      2. איזופרופיל אלכוהול 70% משמש גם כחלק לשפשף את הניתוח.
  5. באזור הניתוח, להרכיב ולסדר מספקת את הצורך.
    1. מקור חום לשמירה על מכרסם החם
      1. מקור החום האידיאלי הוא חימום הסירקולציה המחודשת כרית מים. כריות חימום חשמליים אינם מקובלים לניתוח. כפפות כירורגיות מלא במים חמים, או יד מחממי כימי עשוי לשמש גם. אם אחד משני האחרונים משמשים, בטמפרטורה של האובייקט חייב להיות במעקב צמוד במהלך הניתוח.
    2. כירורגי פלטפורמה
      1. זה עשוי להיות בלוק עמיד במים סטריליים להציב מעל מקור חום.
    3. פנויה אספקה
      1. אלה עשויים לכלול: וילונות כירורגי סטרילי, גזה, צמר גפן applicators, נוזלים עבור הממשל הפתרון, מכרסם ברקמות השקיה.
    4. ועיקור המכשירים
      1. השלמה של מכשירים ישתנו בהתאם הניתוח, אבל בדרך כלל כוללים ניתוחים, retractors רקמות, מלקחיים, hemostats, ומספריים.
      2. כלי מעקר או עיקור פתרון אם המכשירים הם אותו כדי לשמש על נושא אחד או יותר של ניתוח
        1. השימוש מעקר חרוז חם לעקר מכשירים בין בעלי חיים נפוצה.
    5. חומר כדי לסגור את חתך ניתוחי.
      1. החומרים המשמשים יהיה תלוי באתר בקשה כירורגית אך עשויים לכלול: תפר מחטים, סיכות המוליך מצרך, או דבק רקמות
    6. כל ציוד מיוחד אחר הדרוש (מנגנון stereotaxic, שתלים, מיקרוסקופ ההפעלה)

4. הכנת מכשירים לכירורגיה

  1. מכשירים צריך להיות נקיסטרילי בתחילת הניתוח. מטרה זו מושגת בדרך כלל על ידי יצירת ערכות ניתוח מלא כי הם autoclaved.
  2. מכשירים יכולים לשמש לניתוח יותר מכרסם ללא מעוקר ו אריזה מחדש, אך יש לנקות ו מעוקרים בין מכרסמים.
    1. אם מעקר חם חרוז משמש, כדי להיות בטוח, כדי לאפשר זמן עבור המכשירים להתקרר לאחר עיקור. מכשירים יכול להיות מקורר על ידי טבילה במים סטריליים.
    2. Sterilants כימית עשוי לשמש גם, אך דורשים זמן מגע ארוך יותר (~ 10 דקות, יכול להיות 30-60 דקות, דורשים שטיפה). אלכוהול הוא לא sterilant.
  3. סידור הכלים על וילון אטום סטרילית כדי שבו הם ישמשו.

5. הכנת בעלי חיים לכירורגיה

  1. שלושת הדברים מנוהלים לפני הניתוח הם הרדמה, שיכוך כאבים, ואנטיביוטיקה.
    1. הרדמה הכרחי לניתוח. הרדמה עשוי להיות מנוהל באמצעות שאיפה או הזרקה.
      1. ההרדמה נשימתית הנפוץ ביותר בשימוש כיום isoflurane.
      2. הנפוצים ביותר בשימוש בזריקות הרדמה הוא שילוב של קטמין ו xylazine, אולי עם עוד הוסיף הרגעה.
      3. התייעץ עם צוות המתקן וטרינרי שלך במינונים המתאימים.
    2. מנע משככי כאבים מומלץ ואת צריכה להינתן לפני הניתוח מתחיל.
      1. בשימוש נפוץ סטרואידיות נוגדות דלקות כוללים flunixin ו carprofen.
      2. אופיואידים זמין עשויים לכלול עצירות, מורפיום, או פנטניל.
      3. התייעץ עם צוות המתקן וטרינרי שלך במינונים המתאימים ומסלולים של הממשל.
    3. בעזרת הניתוח שנערך כראוי, אנטיביוטיקה אין צורך בדרך כלל, למעט כמה בסיכון גבוה ניתוחים במערכת העיכול.
      1. אם אנטיביוטיקה משמשים, המשמש לספק peri-operatively (לפני החתך הראשון).
      2. התייעץ עם צוות המתקן וטרינרי שלך אנטיביוטיקה, במינון המתאים, ומסלולים של הממשל.
  2. הכנה כירורגי של האתר החתך
    1. לגלח את האתר החתך. בדרך כלל לגלח שטח של כ 3 פעמים את גודל החתך המוצע. גודלו של האזור מגולח מוכן עשוי להיות מוגבל על ידי גודל של החיה או אזור על החיה.
    2. האזור המגולח הוא חיטוי באמצעות יישומים מרובים של פתרון לקרצף כירורגית אלכוהול איזופרופילי. יישום הוא בדרך כלל לשפשף כירורגית הראשון, ואז אלכוהול. סוף עם יישום הפתרון הסופי של שיחים.
    3. קרצוף כירורגי מבוצע בתבנית עגולה, החל במרכז וסובבת כלפי חוץ, או על בעלי חיים קטנים, אופנה חד כיווני.
      1. אם קרצוף unidirectionally, מקום גזה סטרילית בשוליים crainial האזור מגולח, המכסה את השיער של החיה. אחוז ולייצב את החיה בעדינות דרך גזה סטרילית. החל לשפשף פתרון ואלכוהול unidirectionally הרחק גזה סטרילי.
  3. העברת בעלי חיים לאזור הניתוח
    1. הזז את חיה עם האתר כירורגית מוכן כלפי מעלה, ללא קשר באתר מוכן.
    2. מקם את חיה על אזור הניתוח כך באתר כירורגית היא כלפי מעלה, אל מול המנתח.
  4. שכבות של החיה
    1. אם בעל החיים הוא מונח על ידי עוזר, עוזר לזכור את פני השטח החיצוני של וילון נחשב חלק של שדה סטרילי ולא חייב להיות מטופלים על ידי עוזר. שכבות של נותר לעתים קרובות המנתח, ומניחה כלולה חבילת כירורגית.
    2. לעטוף תקן למים נייר חד פעמיות מומלץ בדרך כלל.

6. הכנת מנתח לכירורגיה

  1. הכנה של המנתח יש להדגיש כי פעילות מיוחדת תהיה מתרחש, שבו המנתח חייב להיות מודע כל מהלך שלהם ויצאו השדה הסטרילי.
  2. השיער והפנים מכוסים בדרך כלל על ידי כובע ואת המסכה, בהתאמה. אלה צריכים להיות חדש בתחילת הפגישה כירורגית, אבל לא צריך להיות שונה בין בעלי חיים.
  3. המנתחים צריך ללבוש חלוק חד פעמי כירורגית, נקי חד פעמי מעבדה מעיל או לפחות חלוק מעבדה נקי. זה לא צריך להיות שונה בין בעלי חיים, אבל יש לשנות בין הפגישות הניתוח.
  4. ידיים יש לנקות היטב לפני הניתוח. כפפות כירורגיות או כפפות הבחינה יש להשתמש. אם כפפות הבחינה משמשים, יש לשטוף עם חומר חיטוי כירורגי לפני בשימוש. יש להחליף כפפות בין בעלי חיים.

7. במהלך הניתוח

  1. תחזוקה של השדה הסטרילי.
    1. לאחר הידיים סטרילית השדה ההפעלה סטרילי, תצטרך לעבור בזהירות ולזכור לא לשבור עקרות. זה incluדה משום שהתחום סטרילי שבו אתה יכול להגדיר את המכשירים, נזכר לא לגרד את האף, ורק לחלק את החולה באמצעות ניתוח לעטוף הסטרילי.
  2. טיפול רקמות
    1. טיפול רקמות בעדינות. שמור על רקמות לחות, במיוחד אם הניתוח הוא ממושך. מזעור יצירת כיסים רקמות לנתיחה מיותרים.
    2. טיפול רקמות נכונה מפחיתה את ההזדמנות הסיכון מנותחות זיהומים, מאיץ ריפוי, ומפחית את הכאב לאחר הניתוח.
  3. החלפת נוזלים לאיבוד
    1. המסלולים הרגילים של הממשל נוזל מכרסמים הם תת עורית או intraperitoneal. שימוש בכמויות קטנות intraperitoneally חיות-1-2 מ"ל קטן בעכברים, למשל.
    2. נוזלים מחומם עשוי לסייע במניעת ירידה בטמפרטורת הגוף. עכבר טמפרטורת הגוף החולדה הוא גבוה יותר מאשר בני אדם, כך נוזלים חייב להיות חם יותר.
  4. שמרו על חום
    1. המיקום של כרית חימום מתחת החיה במהלך הניתוח ואת כלוב במהלך ההתאוששות היא הדרך הסטנדרטית לשמור על טמפרטורת הגוף של בעל החיים.
      1. זהירות עם כריות חימום לשימוש רק אלה מסומנים לניתוח. אחרים עשויים לגרום לפציעה תרמית.
    2. נוזלים מחומם, intraperitoneally נתון, עשוי גם לעזור חיות חם.
  5. הפעלה מיקרוסקופ, עשויה להקל על כמה נהלים (ניתוח כלי הדם, מנתחים מבוגרים, וכו 'יכול גם להיות מושגת על ידי שימוש מגדילי כמו loupes, וכו')

8. לאחר הניתוח לשחזור שיקולים

  1. בעלי חיים צריכים להתאושש על מצע נייר שטוח (מגבות נייר סטרילי, וכו ') ולא מצעים סטנדרטיים בעלי חיים.
  2. שמור על בעלי החיים החם. חום יסייעו החלמה מהירה. מטרה זו מושגת בדרך כלל על ידי הצבת את הכלוב התאוששות חצי על כרית חימום כך שבעלי חיים יכולים לבחור הטמפרטורה המועדפת שלהם, כפי שהם להתאושש.
  3. אין להחזיר חיות בכלובים או לאזור חיה מחזיק עד כל בעלי החיים נראים תקינים. כל חיה כי יש לו ניתוח כנראה חזר היכולת לתקן את עצמו בכלוב ולהיות מסוגלים לנוע בדרך כלל בטרם חזר לאזור מחזיק.
  4. צג בעלי חיים שלאחר הניתוח צפוי סימנים של מחלה או זיהום. בעלי חיים בדרך כלל לאבד כמות קטנה של משקל לאחר ניתוח, אבל עם כאבים נכונה אספקת מזון, הם צריכים להחזיר את משקל במהירות.

9. לאחר הניתוח המעקב הוא החלק האחרון של ניתוח מוצלח

  1. במשך 5-7 ימים לאחר הניתוח, לעקוב אחר מצבו הכללי של בעל החיים.
    1. לאחר הניתוח, חיות צריך להיות בהיר, ערני, פעיל. הם צריכים להיות באינטראקציה עם cagemates בדרך כלל, לאכול ולשתות, והוא מסוגל להשיג נורמלי מינים ספציפיים תנוחות.
    2. בעלי חיים מדוכאים, אנורקסית, או איטית יש לבחון כדי לגרום לשינוי זה. שקלו את האפשרות של כאב או זיהום לא מטופל.
  2. מזון / נוזל צריכת חשוב גם התאוששות.
    1. יהיו כמה ירידה-off בצריכת לאחר הניתוח. זה עשוי להיות מיתנה על ידי הפיכת מים ומזון קל לגשת.
      1. צינורות ארוכים קשית עשויה להועיל.
      2. מתן יומי של מזון הרטובות בתחתית הכלוב עלול גם לפתות בעלי חיים כדי לאכול.
    2. כמה משככי כאבים בתוצאה חולדות פיקה, אז להיות מודעים לכך חיות מותר לאכול פריטים בלתי הולמת (כגון מצעים) פציעה.
  3. צג חיות סימנים של זיהום על החתך. תקופת הסכנה היא הראשונה 7 ימים ובעלי חיים צריך להיבדק מדי יום.
    1. סימני זיהום כוללים אדמומיות, נפיחות, הפרשות (מוגלתי או הצפק), כאב או פתיחת החתך (בקיעה).

10. לאחר ניתוח שלך תושלם, השלב האחרון הוא מודד הצלחה של הניתוח

  1. האם המודל המושרה / חלק להסיר / פונקציונליות כנו?
  2. האם יש כאב קטן ככל האפשר?
  3. האם יש זיהום לא?
  4. הצלחה!

Discussion

ניתוח ניסיוני על מכרסמים נעשית לעתים רחוקות על ידי וטרינרים או רופאים. במקום זאת, היא בד"כ מבוצעת על ידי החוקרים ביו הכשרה פורמלית עם מעט או ללא בעקרונות ניתוח בטכניקה aseptic. במסגרת מחקר, ניתוח הוא בדרך כלל למדתי מעמיתים, את עצמם בדרך כלל לא רשמית או הכשרה. הניתוח מבוצע במעבדת המחקר עשוי גם להיות שנצפו בעיקר כשיטה להכנת מודל חיה עם המטרה של יצירת קבוצה של בעלי חיים למחקר. בעוד כל ניתוח מסוים היא בדרך כלל עניין של תיאום עין יד ומיומנות טכנית, אשר שניהם ניתן לרכוש דרך, עקרונות תרגול מיומנויות הקשורות למושג הטכניקה aseptic (ובכך ניתוח ללא זיהום), לא ניתן לרכוש אך ורק באמצעות תרגול הם בדרך כלל לא העביר במלואם לחוקרים.

העדר הכשרה פורמלית עקרונות הניתוח יכול להוביל חוסר הבנה של המשמעות של הניתוח הן שוות נכון מבחינה טכנית, טיפול לפני ואחרי הניתוח של בעלי חיים. בחינת הניתוח הן עצמו את הטיפול פרי פעולה של בעלי חיים יביא לעלייה רווחת בעלי החיים ואת איכות הנתונים המתקבלים מהמודל כירורגית. לדוגמה, דלקת תת קלינית לאחר ניתוח התוצאות יכול לבלבל, כמו שינויים בהתנהגות ופיזיולוגיה לראות עם הכאב יכול. כמו מינים טורפים, רוב המכרסמים הם סטואית מפתיע ולמרות הסובלים מכאבים לאחר ניתוח או זיהום עלולים להראות סימנים קליניים מעטים. סימנים עדינים של כאב או מצוקה מכרסמים הם מוסתרים עוד יותר חוסר הכללית של הכשרה של החוקרים ביו הכרה של סימנים כאלה במכרסמים. בנוסף, מכרסמים הם הפעילים ביותר במהלך המחזור כהה, כאשר הצוות הם בדרך כלל לא ניתן להציג סימנים קליניים והתנהגותיים של כאב לאחר הניתוח. וידאו זה אינו תחליף הכשרה כירורגית נאותה, אשר באופן אידיאלי להיות גם על הידיים ו המסופקים על ידי המוסד שלהם, אלא נועד לתת החוקרים סקירה של חששות נפוצים הפגנה החזותי של נהלים aseptic קיבל וטכניקות נדרשים לפתח מיומנות מינימלית בביצוע של ניתוח הישרדות במכרסמים.

Disclosures

המחברים כל עבודה צ'ארלס ריבר, ספקית גדולה של בעלי חיים בניתוח שינו למחקר.

References

  1. American College of Laboratory Animal Medicine Position on Rodent Surgery. Forthcoming.
  2. Animal Welfare, 9 CFR, Parts 1, 2, and 3. Forthcoming.
  3. Bradfield, J. F., Schachtman, T. R., McLaughlin, R. M., Steffen, E. K. Behavioral and physiologic effects of inapparent wound infection in rats. Lab Anim Sci. 42, 572-578 (1992).
  4. Brown, M. J., Pearson, P. T., Tomson, F. N. Guidelines for animal surgery in research and teaching. AVMA Panel on Animal Surgery in Research and Teaching, and the ASLAP (American Society of Laboratory Animal Practitioners). Am J Vet Res. 54, 1544-1559 (1993).
  5. Brown, P. A., Hoogstraten-Miller, S. Principles of Aseptic Rodent Survival Surgery: Parts I & 2. Laboratory Animal Medicine and Management. Reuter, J. D., Suckow, M. A. International Veterinary Information Service. Ithaca. (2004).
  6. Institute of Laboratory Animal Resources, National Research Council. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. National Academy Press. Washington, DC. 556-570 (1996).
  7. Popp, M. B., Brennan, M. F. Long-term vascular access in the rat: importance of asepsis. Am J Physiol. 241, H606-H612 (1981).
  8. Rutala, W. A. APIC guideline for selection and use of disinfectants. Am J Infect Control. 24, 313-342 (1996).

Erratum

Formal Correction: Erratum: Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.
Posted by JoVE Editors on 05/04/2011. Citeable Link.

A correction was made to Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon. The order of the authors was incorrect. The order of the authors has been changed to :

Kathleen R. Pritchett-Corning, Guy B. Mulder, Yiying Luo, William J. White

Instead of:

Kathleen R. Pritchett-Corning, Yiying Luo, Guy B. Mulder, William J. White

עקרונות של ניתוח מכרסמים למנתח חדש
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon. J. Vis. Exp. (47), e2586, doi:10.3791/2586 (2011).More

Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon. J. Vis. Exp. (47), e2586, doi:10.3791/2586 (2011).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter